Poster w pdf - Wydział Chemii UJ

BADANIE WARUNKÓW ROZDZIAŁU ORAZ IDENTYFIKACJA LEKÓW
PSYCHOTROPOWYCH Z GRUPY TRÓJCYKLICZNYCH ANTYDEPRESANTÓW TECHNIKĄ
ELEKTROFOREZY KAPILARNEJ
K.Madej, M.Woźniakiewicz
Zakład Chemii Analitycznej, Wydział Chemii, Uniwersytet Jagielloński, Kraków
WSTĘP:
Aparatura:
Trójcykliczne antydepresanty (TCA) należą do często stosowanych leków
psychotropowych, które w dawkach wyższych od terapeutycznych wykazują
znaczną toksyczność i mogą być przyczyną zgonu. W związku z tym leki te są
przedmiotem zainteresowania analizy toksykologiczno-sądowej i często są
identyfikowane w różnego rodzaju materiałach dowodowych. Analizę TCA w
materiale niebiologicznym najczęściej przeprowadza się z wykorzystaniem metod
spektrofotometrycznych i chromatograficznych. Od kilkunastu lat trwa również
dynamiczny rozwój metod analizy leków przy użyciu nowej techniki- elektroforezy
kapilarnej (CE). W dziedzinie tej najważniejsze znaczenie mają trzy odmiany
separacyjne: strefowa elektroforeza kapilarna (CZE), micelarna elektrokinetyczna
chromatografia
kapilarna
(MECC)
oraz
rozdziały
chiralne.
Zestaw do elektroforezy kapilarnej – Prince (firmy PrinceTechnologies, Emmen,
Holland), wyposażony w detektor spektrofotometryczny Lambda 1010 (firmy Bishop,
Leonberg, Germany).
Warunki eksperymentalne:
Rozdziały analitów prowadzono w kwarcowej kapilarze o wymiarach: dł. 100/66 cm i
śr. wewn. 50µm, pod napięciem 30 kV. Próbki były wstrzykiwane hydrodynamicznie,
a detekcję analitów przeprowadzono przy dł. fali 210 nm.
CEL PRACY: Rozpoznanie możliwości zastosowania technik CE
jako metod identyfikacyjnych leków z grupy TCA w preparatach
farmaceutycznych.
Metody separacyjne:
CZE z buforem separacyjnym o składzie 30% metanolu w 50 mM kwasie 3(cykloheksyloamino)-hydroxy-1-propanosulfonowym o pH 9,5 (dodatek 1 M NaOH),
WZORY STRUKTURALNE SUBSTANCJI CZYNNYCH
W ANALIZOWANYCH PREPARATACH
MECC z buforem separacyjnym o składzie 40 mM tetraboranu sodu (pH 9,5) z
dodatkiem 10 mM STDC (sól sodowa kwasu taurodeoksycholinowego)
N
N
H2C
H2C
CH2
H2C
H
CH2
H2C
N
CH2
Przygotowanie próbek do analizy:
Cl
CH3
Wzorcowe mieszaniny leków sporządzono przez odpowiednie rozcieńczenie wodą
metanolowych roztworów podstawowych leków.Jedną tabletkę osobno każdego
prepararatu: PETYLYL-u lub ANAFRANIL-u sproszkowano (po usunięciu
zewnętrznej powłoki) w moździeżu agatowym, rozpuszczono w odpowiedniej
ilości metanolu, poddano działaniu ultradźwięków i przefiltrowano.
CH3
N
CH2
Dezypramina
Klomipramina
(PETYLYL)
(ANAFRANIL)
CH3
WYNIKI BADAŃ
Rozdział wzorcowej mieszaniny leków
CZE
MECC
Ami - amitryptylina
Clo - klomipramina
0, 006
Ami
0, 004
A [AU]
EO F
Imi - imipramina
0, 002
De s
Ami
0, 004
A [AU]
Do x
Imi
0, 001
Clo
0
2
4
6
8
10
12
Dox
0, 003
Imi
0, 002
Nor - nortryptylina
0
EO F
0, 005
Dox - doksepin
No r
0, 003
0, 006
Des - dezypramina
0, 005
0, 001
14
-0, 001
0
0
-0, 002
5
10
15
20
25
30
35
40
t [min]
t [min]
Analiza preparatów farmaceutycznych
0,003
0,01
Dox (IS )
0,0025
De s
0,008
A [AU]
0,006
A [AU]
Clo
0,002
EOF
0,0015
Imi (IS )
0,004
0,001
EOF
0,002
0,0005
0
0
2
4
6
8
10
12
14
0
0
5
10
15
20
25
30
t [min]
-0,002
t [min]
Wyniki analizy preparatów farmaceutycznych
Nazwa preparatu
PETYLYL
ANAFRANIL
Substancja czynna
dezypramina
klompramina
Standard wewnętrzny
imipramina
doxepin
Względny czas migracji
0,86
1,58
SD
0,01 (n=5)
0,01 (n=5)
Wnioski:
¾ Stosując dwa warianty separacyjne CZE i MECC w warunkach zoptymalizowanych
uzyskano dobre rozdziały odpowiednio 5-ciu i 4-ech leków z grupy TCA.
¾ Przeprowadzone jakościowe analizy preparatów farmaceutycznych PETYLYL-u i
ANAFRANIL-u charakteryzowały się wysoką powtarzalnością parametru
identyfikacyjnego (względnego czasu migracji) czynnego składnika badanego
preparatu.
¾ Reasumując stwierdzono, że przy zastosowaniu obu metod CZE i MECC można
jednoznacznie zidentyfikować jeden z 6-ciu testowanych leków psychotropowych
znajdujący się w preparacie farmaceutycznym.