62798_Platelia Candida Ag - Bio-Rad

NEISSERIA – GC AGAR BASE
69354
PODŁOŻE DO IZOLACJI GONOKOKÓW I MENINGOKOKÓW
1- ZASTOSOWANIE
Podłoże to jest przeznaczone do izolacji Neisseria z materiałów klinicznych (takich jak wydzielina z cewki
moczowej, materiały z górnych dróg oddechowych, płyn mózgowo-rdzeniowy).
2- ZASADA METODY
Wzrost Neisseria zapewniają składniki odżywcze zawarte w podłożu, oraz dostarczone w Suplemencie G.
Podłoże może być używane bez inhibitora w przypadku materiałów czystych np. płynu mózgowo-rdzeniowego. W
przypadku innych materiałów zaleca się jednoczesny posiew na podłoże bez inhibitora i na podłoże uzupełnione
inhibitorem VCF (nr kat. 55532). Podłoże z VCF jest wybiórcze dla Neisseria gonorrhoeae i Neisseria
meningitidis.
3- POSTAĆ PODŁOŻA
•
Podłoże w proszku:
- opakowanie 500 g
nr kat. 69354
4- PODSTAWOWE SKŁADNIKI (g/l)
Podłoże agarowe Neisseria – GC agar base sporządzono wg składu opisanego przez: Martin J.E. i wsp. (1).
Wyciąg mięsny
Wyciąg drożdżowy
Trzustkowy hydrolizat kazeiny
Glukoza
Skrobia
Chlorek sodu
Fosforan sodu dwuzasadowy
Agar
Końcowe pH
5.0 g
5.0 g
17.5 g
2.0 g
2.0 g
3.0 g
3.0 g
15.0 g
7.2 ± 0.2
Przygotowanie podłoża:
Przed użyciem wstrząsnąć suche podłoże w pojemniku.
Rozpuścić 36 g proszku w 1 litrze jałowej wody destylowanej. Ogrzewać, do całkowitego rozpuszczenia.
Wysterylizować w autoklawie w temp. 121°C przez 15 minut. Dodać jałowo Supplement G (po uprzednim
podgrzaniu do 37°C w łaźni wodnej) w stosunku 50 ml suplementu na 185 ml podłoża podstawowego.
Wymieszać i rozlać na płytki lub w butelki.
Podłoże z inhibitorem:
Do 50 ml Supplement G dodać 5 ml VCF inhibitor.
Mieszaninę połączyć ze 185 ml odtworzonego podłoża podstawowego. Wymieszać i rozlać na płytki lub w butelki
Uwaga: Płytki można przygotować z wyprzedzeniem. W takim wypadku należy przechowywać je w
temperaturze +2-8°C, w suchym miejscu (w torebce plastikowej).
5- PRZECHOWYWANIE
• Podłoże w proszku: w szczelnie zamkniętym pojemniku, w suchym miejscu, w temperaturze +15 do 25°C.
Data ważności i numer serii znajduje się na opakowaniu.
6- PROCEDURA
Dostarczony materiał:
• Dostarczony materiał: Podłoże Neisseria – GC agar base
• Inne konieczne ale nie dostarczone materiały
Supplement G (nr kat. 62692)
Inhibitor VCF (nr kat. 55532)
Inokulacja
Przed użyciem podłoże należy ogrzać w cieplarce do temp. około 37°C.
Badany materiał kliniczny wysiać bezpośrednio na podłoże.
Należy zapoznać się z zaleceniami dotyczącymi pobierania i przechowywania materiałów biologicznych (2).
Jeśli materiał nie będzie od razu wysiany, należy pobrać go na podłoże transportowe (TGV AER, nr kat. 50456).
Inkubacja:
Płytki inkubować przez 24-48 godzin w temp. 37°C w środowisku z CO2.
Odczyt:
W celu ułatwienia wykrywania kolonii gonokoków i meningokoków stosuje się test Gordona i MacLeoda. Na część
płytki (lub na kilka kolonii) rozpyla lub nalewa się 1% roztwór dwumetylo- lub czterometylo-parafenyloenediaminyHCl. Ponieważ związek ten spontanicznie utlenia się na powietrzu, musi być przygotowywany bezpośrednio
przed użyciem i wykorzystany w ciągu 30 minut.
Kolonie oksydazo-dodatnie w ciągu około minuty zmienią barwę na różową. Barwa stopniowo będzie ciemnieć
do czerwonej, fioletowej, i ostatecznie, czarnej. Reakcja ta jest dodatnia dla dwoinek Neisseria i nielicznych
bakterii Gram(+).
Identyfikacja Neisseria do gatunku może być wykonana z użyciem testu płytkowego NEISSERIA 4H (nr kat.
53740).
7- KONTROLA JAKOŚCI
• Podłoże w proszku ma beżową barwę.
• Wzrost szczepów wzorcowych na podłożu Neisseria- GC agar base:
SZCZEP
N.gonorrhoeae ATCC 19424 (CO2)
N.meningitidis ATCC 13077 (CO2)
N.meningitides ATCC 13090 (CO2)
Wynik po inkubacji w temp. 37°C przez 24-48 godz.
Wzrost dobry
Wzrost dobry
Wzrost dobry
8- KONTROLA JAKOŚCI PRODUCENTA
Wszystkie produkty wytwarzane i wprowadzane do obrotu przez Bio-Rad podlegają naszemu systemowi jakości
poczynając od momentu otrzymania surowców aż do chwili wprowadzenia do obrotu ostatecznego produktu
komercyjnego. Każda seria odczynników jest poddana kontroli jakości i jest dopuszczona do sprzedaży po
spełnieniu określonych kryteriów jakości. Dane dotyczące procesu produkcji oraz kontroli jakości każdej serii
produkcyjnej są archiwizowane u producenta.
9- BIBLIOGRAFIA
1. Martin J.E., Billings T.E., Hackney J.F., and Thayer J.D – Primary isolation of N. gonorrhoeae with a new
commercial medium. Public Health Rep 1967. 82. 361-363.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
92430 Marnes-la-Coquette France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
11/2005
2