Krążki z nitrocefiną
Transkrypt
Krążki z nitrocefiną
KRĄŻKI Z NITROCEFINĄ MAST ID™ 171059. Do szybkiego wykrywania β-laktamaz u Neisseria gonorrhoeae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus spp., Haemophilus influenzae i beztlenowców. TYLKO DO DIAGNOSTYKI IN VITRO ZAWARTOŚĆ 50 krążków bibułowych o średnicy 6mm w zaciemnionej plastikowej fiolce. ZASADA TESTU Od dawna stwierdzono, że pewne bakterie wytwarzają enzymy inaktywujące antybiotyki β-laktamowe, tj. penicyliny i cefalosporyny. Powstało kilka testów klinicznych do wykrywania β-laktamaz, takich jak metoda jodometryczna, metoda acidometryczna i rozkład różnych substratów chromogennych. Nitrocefina jest chromogenną cefalosporyną, skuteczną w wykrywaniu wszystkich znanych β-laktamaz. Β-laktamazy hydrolizują wiązanie amidowe w pierścieniu β-laktamowym nitrocefiny, powodując wyraźną zmianę koloru z żółtego na czerwony. Szybkie testy na wytwarzanie β-laktamaz mogą dostarczyć klinicznie ważne informacje wcześniej, niż test z krążkami dyfuzyjnymi i test na MIC. Krążki z nitrocefiną MAST ID™ przeznaczone są do szybkiego testowania izolowanych kolonii Neisseria gonorrhoeae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus sp., Haemophilus influenzae i bakterii beztlenowych, zwłaszcza Bacteroides sp. Drobnoustroje należące do określonych grup taksonomicznych, lub nawet pojedyncze szczepy, mogą wytwarzać różnorodne β-laktamazy o powinowactwie do różnych substratów. Test z nitrocefiną jest jedynym wiarygodnym testem do wykrywania wytwarzających β-laktamazę Enterococcus spp. • Łatwy w użyciu Nanieść kolonie na powierzchnię zwilżonego krążka • Wygodny Test można przeprowadzić używając czystą płytkę Petriego, albo mikroskopowe szkiełko podstawowe • Tani Nie wymaga żadnych dodatkowych odczynników • Zdefiniowany punkt końcowy Zmiana koloru z żółtego na czerwony DODATKOWE MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE DOSTARCZONE Standardowe mikrobiologiczne wyposażenie i sprzęt, takie jak ezy, podłoża do hodowli, wymazy, patyczki, palniki i inkubatory itp., a także odczynniki serologiczne i biochemiczne oraz dodatki takie, jak krew. ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Tylko do diagnostyki in vitro. Stosować zatwierdzone środki ostrożności w stosunku do materiału szkodliwego biologicznie oraz techniki aseptyczne. Test może używać jedynie odpowiednio przeszkolony i wykwalifikowany personel laboratoryjny. Sterylizować wszystkie odpady szkodliwe biologicznie przed wyrzuceniem, zgodnie z formularzem Product Safety Data. INSTRUKCJA 1. Umieścić wymaganą ilość krążków z nitrocefiną MAST ID™ w czystej pustej płytce Petriego lub na mikroskopowym szkiełku podstawowym. 2. Krążki powinny być zwilżone jedną kroplą dejonizowanej wody. Nie zwilżać nadmiernie. 3. Używając sterylną ezę lub patyczek przenieść kilka izolowanych i podobnych kolonii i rozetrzeć na powierzchni krążka. 4. Obserwować, czy zmienia się kolor krążka. 5. Metoda alternatywna: zwilżyć krążek jedną kroplą dejonizowanej wody, następnie trzymając krążek pęsetką zetrzeć kolonie z powierzchni agaru. INTERPRETACJA WYNIKÓW • Zmiana zabarwienia z żółtego na czerwone na powierzchni, na którą naniesiono hodowlę, wskazuje na dodatnią reakcję. Uwaga: zmiana barwy zazwyczaj nie zachodzi na całej powierzchni krążka. • Na wynik ujemny wskazuje brak zmiany zabarwienia na powierzchni krążka. • Dla większości szczepów bakteryjnych wynik dodatni uwidocznia się w czasie 5 minut. Jednak dla pewnych gronkowców oraz dla gatunków beztlenowców zmiana barwy może zajść dopiero po 60 min. • Pewne szczepy Staphylococcus aureus wytwarzają niewielkie ilości β-laktamazy, chyba że indukuje się produkcję tego enzymu przez hodowlę na podłożu zawierającym sub-inhibicyjne stężenia antybiotyku β-laktamowego. W tym celu drobnoustroje można hodować na podłożu zawierającym taki inducer β-laktamaz, jak w MAST MS14, β-Lactamase Inducer Selectatab™. • Dodatni wynik można interpretować jako oporność na penicyliny i cefalosporyny wrażliwe na β-laktamazy. Wrażliwość powinno się potwierdzać standardowymi metodami badania wrażliwości na podstawie zahamowania wzrostu. • Ujemne wyniki sugerują wrażliwość, ale jej nie gwarantują. Szczep Staphylococcus aureus ATCC 29213 (QC0365) Haemophilus influenzae ATCC 10211 (QC0441) Kontrola dodatnia ujemna PRZECHOWYWANIE • Krążki należy przechowywać w zamrażarce w temperaturze poniżej -10°C od chwili otrzymania w dostarczonym pojemniku. • Przed otwarciem pojemnika pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej. Natychmiast po użyciu ponownie zamrozić pojemnik z krążkami. OGRANICZENIA TESTU • U wymienionych organizmów rzadko donosi się o oporności na antybiotyki β-laktamowe bez wytwarzania β-laktamaz. • Krążki z nitrocefiną MaST ID™ powinny być używane jedynie jako szybki test uzupełniający i nie powinny zastępować konwencjonalnych metod badania wrażliwości. • Test z Nitrocefiną ma niewielkie zastosowanie dla ściśle spokrewnionych taksonomicznych grup drobnoustrojów, np. dla Enterobacteriaceae. METODY ALTERNATYWNE Klientom, którzy wolą acidometryczną metodę wykrywania β-laktamaz, MAST poleca także paski i pierścienie intralaktamowe (ETO/1 i ETO2). Literatura Literatura dostępna na życzenie.