Alpha-2-Macroglobulin - Serum Application Note

Alfa-1-mikroglobulina
Systemy IMMAGE i IMMAGE800 Immunochemistry System
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
alfa-1-mikroglobuliny (białka HC) w moczu
w systemach IMMAGE
 i IMMAGE
800 Immunochemistry System
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczania alfa-1-mikroglobuliny w ludzkim moczu metodą nefelometryczną przy
użyciu systemów IMMAGE i IMMAGE800 Immunochemistry System.
Zakres normy
0–7 mg/L (1). Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z opisem w punkcie „Procedura, instrukcje programowania” na stronie 2.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor
Kalibrator
Kontrole
Nr kat.
Q0495
S2007
X0975
X0976
X0977
Nazwa
Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human Alpha-1-Microglobulin
Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 1
Dako Human Urine Protein Calibrator
Dako Human Urine Protein Low Control
Dako Human Urine Protein High Control
Składniki są gotowe do użycia i stabilne do daty ważności podanej na etykiecie.
Wartości kalibratorów i zakresy kontrolne podano na Karcie parametrów analitycznych.
Potrzebne materiały
dodatkowe
Kaseta
Próbki
Mocz ludzki.
Stabilne przez 10 dni w temperaturze 2–8°C.
Nie zaleca się zamrażania próbek przed analizą.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli uzyskiwane wyniki są niezadowalające, należy sprawdzić odczynniki i parametry urządzenia, a następnie
powtórzyć kalibrację. Jeśli problem nie ustępuje, należy skontaktować się z dostawcą urządzenia lub obsługą
techniczną firmy Dako.
Kaseta IMMAGE User Defined Reagent (UDR)
Nr kat. Beckman Coulter 447255
®
IMMAGE jest zarejestrowanym znakiem towarowym firmy Beckman Coulter, Inc. Fullerton, CA. 92835.
(114052-001)
30 197.Q0495.01/PL/KGR/15.11.05 s. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR nr 33 21 13 17
Alfa-1-mikroglobulina
Systemy IMMAGE i IMMAGE800 Immunochemistry System
Dane dotyczące działania
Zakres pomiarowy
Około 3–100 mg/L, w zależności od konkretnej partii kalibratora.
Stabilność kalibracji
Zaleca się ponawianie kalibracji w systemie IMMAGE lub IMMAGE800 Immunochemistry System co 21 dni i po
każdej zmianie partii odczynników. Ponowienie kalibracji zalecane jest także wówczas, jeśli wyniki kontroli jakości nie
mieszczą się w przedziale podanym na Karcie parametrów analitycznych lub w przedziale wyznaczonym przez
dane laboratorium.
Stabilność
Po zakończeniu pracy w danym dniu zaleca się umieszczenie kaset z odczynnikami w temperaturze 2–8 °C.
Czułość
Limit detekcji oszacowano na podstawie metody statystycznej dla niedokładności pomiarów bliskiej zeru (2).
Ustalono, że limit detekcji jest równy trzykrotności S0 (S0=√b, stały udział w całkowitej niepewności).
Limit detekcji oszacowano na 1,7 mg/L.
Precyzja
Precyzję określono poprzez przebadanie próbek na 4 różnych poziomach alfa-1-mikroglobuliny (A1M) metodą
analityczną ANOVA w 6 seriach. W każdej serii wykonano nową kalibrację i po 6 oznaczeń.
A1M
Próbka
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Razem
Całk.
wsp.
zmienności (%)
n
0,31
3,5
36
0,38
0,45
2,7
36
0,48
1,78
1,85
3,3
36
0,63
2,21
2,29
2,6
36
Wartość
średnia
(mg/L)
W serii
Między
seriami
1
8,8
0,24
0,20
2
16,3
0,24
3
56,1
4
89,0
Dokładność
W przypadku kontroli Dako Human Urine Protein Low Control, nr kat. X0976 i Dako Human Urine Protein High
Control, nr kat. X0977, można spodziewać się odzysku alfa-1-mikroglobuliny na poziomie 85–115%.
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 3–100 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stężenia antygenu dla stężenia alfa-1-mikroglobuliny do 1000 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono reaktywności krzyżowej ze znanymi białkami.
Nie stwierdzono zakłóceń przy stężeniach do 5 g/L albuminy, 300 mg/L bilirubiny, 25 mmol/L wapnia, 5 g/L
kreatyniny, 50 g/L glukozy, 5 mg/L hemoglobiny i 50 g/L mocznika.
Porównanie metod
Oznaczanie alfa-1-mikroglobuliny zgodnie z niniejszą procedurą porównano z dostępnymi komercyjnie testami
turbidymetrycznymi. Dane dostępne są na życzenie.
Procedura
1. Zaprogramować odczynnik zdefiniowany przez użytkownika (UDR) w systemie IMMAGE® lub IMMAGE® 800,
w sekcji Informacje o protokole. Bardziej szczegółowe informacje zawiera rozdział 5 Instrukcji obsługi systemu
®
®
IMMAGE lub IMMAGE 800 Immunochemistry System (3).
Instrukcje programowania odczynnika UDR w systemie IMMAGE
2. Przenieść Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human Alpha-1-Microglobulin do pojemnika „A” w nowej kasecie
zdefiniowanej przez użytkownika.
3. Przenieść Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 1 do pojemnika „B” kasety. Zob. uwaga poniżej.
4. Nadać substancji (Chemistry) nazwę „A1MX”.
5. Wartość kalibratora jest zależna od partii. Gdy używany jest Dako Human Urine Protein Calibrator (nr kat. X0975),
należy ręcznie przygotować następującą serię rozcieńczeń zgodnie z przedstawioną poniżej tabelą rozcieńczeń.
Tabela rozcieńczeń
Wzorzec
Lp. (i)
Wz. (1)
Wz. (2)
Wz. (3)
Wz. (4)
Wz. (5)
Wz. (6)
Nr kat. X0975
µL
[
10
]
[
10
]
[
20
]
[
40
]
[
75
]
[
150
]
NaCl 0,9%
µL
[ 310
]
[ 150
]
[ 140
]
[ 120
]
[
75
]
[
0
]
f(i)
f(1)
f(2)
f(3)
f(4)
f(5)
f(6)
Wsp.
stężenia
0,0313
0,0625
0,1250
0,2500
0,5000
1,0000
[
[
[
[
[
[
C(i)
Stężenie
0,0313 x C(cal)
0,0625 x C(cal)
0,1250 x C(cal)
0,2500 x C(cal)
0,5000 x C(cal)
1,0000 x C(cal)
]
]
]
]
]
]
Stężenie alfa-1-mikroglobuliny we wzorcach (C(i)) (mg/L) obliczane jest ze stężenia alfa-1-mikroglobuliny (C(Cal)) (mg/L)
podanego dla konkretnej partii kalibratora (nr kat. X0975) oraz względnego współczynnika stężenia (f(i)), jako iloczyn, tj.
C(i) = f(i) x C(Cal). Dokładną wartość C(Cal) bieżącej partii kalibratora Dako Human Urine Protein Calibrator, nr kat.
X0975, podano na Karcie parametrów analitycznych.
(114052-001)
30 197.Q0495.01/PL/KGR/15.11.05 s. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR nr 33 21 13 17
Alfa-1-mikroglobulina
Systemy IMMAGE i IMMAGE800 Immunochemistry System
Informacje o protokole systemu IMMAGE® s. 1 z 2
Nazwa substancji
A1MX
Jednostki
mg/L
Nr partii
Podany na kasecie UDR
Protokół
Niekonkurencyjny
nefelometryczny
Numer seryjny
odczynnika
Podany na kasecie UDR
Termin ważności
odczynnika
Podany na fiolce
z odczynnikiem
Objętość próbki
lub rozcieńczenia
10 µL
Wzmocnienie
1
Objętość buforu
0 µL
Rozcieńczenie
kalibratora
1:1
Objętość
w pojemniku A
30 µL
Rozcieńczenie próbki
1:1
Objętość w
pojemniku B
195 µL
Czas reakcji
1,5 minuty
6/2
Nastawy kalibratora
Zależne od partii
Informacje o protokole systemu IMMAGE® s. 2 z 2
Poziomy
kalibratorów/repliki
Model kalibracji zdefiniowany przez użytkownika: logistyka czteroparametrowa
Informacje o protokole systemu IMMAGE® 800 s. 1 z 3
Nazwa substancji
A1MX
Jednostki
mg/L
Numer seryjny
odczynnika
Podany na fiolce
z odczynnikiem
Protokół
Niekonkurencyjny
nefelometryczny
Numer partii
kasety
Podany na kasecie UDR
Termin ważności
odczynnika
Podany na fiolce
z odczynnikiem
Numer seryjny
kasety
Podany na kasecie UDR
Testów na kasetę
35 testów
Informacje o protokole systemu IMMAGE® 800 s. 2 z 3
Objętość próbki
lub rozcieńczenia
10 µL
Wzmocnienie
1
Objętość buforu
0 µL
Rozcieńczenie
kalibratora
1:1
Objętość
w pojemniku A
30 µL
Rozcieńczenie próbki
1:1
Objętość
w pojemniku B
195 µL
Czas reakcji
1,5 minuty
Nastawy kalibratora
Zależne od partii
Informacje o protokole systemu IMMAGE® 800 s. 3 z 3
Poziomy
kalibratorów/repliki
6/2
Poziomy
aktualizacji/repliki
4/2
Model kalibracji zdefiniowany przez użytkownika: logistyka czteroparametrowa
Uwaga
Maksymalna objętość pojemnika „A” i „B” kasety UDR wynosi 8,0 mL, zaś objętość martwa wynosi 250 µL. System
dozuje 195 µL buforu z pojemnika B zgodnie z protokołem opisanym powyżej, jednak faktycznie zasysa łącznie
205 µL, aby wykluczyć ryzyko skażenia cieczy. A zatem maksymalnie napełniony pojemnik wystarcza na około 35
testów. Zaleca się monitorowanie zużycia odczynników i uzupełnianie ich w pojemnikach A i B do czasu zużycia
wszystkich 300 testów z kasety.
Piśmiennictwo
1. Tencer J, Thysell H, Grubb A. Analysis of proteinuria: reference limits for urine excretion of albumin,
protein HC, immunoglobulin G, к- and λ-immunoreactivity, orosomucoid and α1-antitrypsin. Scand J Clin Lab
Invest 1996;56:691-700.
2. EURACHEM/CITAC working group. EURACHEM/CITAC Guide: Quantifying uncertainty in analytical
measurement. Eurachem CITAC, second edition 2000; P1:08-111.
3. IMMAGE Immunochemistry System Operations Manual (PN 962254), IMMAGE800 Immunochemistry System
Operations Manual (PN A11403).
(114052-001)
30 197.Q0495.01/PL/KGR/15.11.05 s. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR nr 33 21 13 17