Program kursu: „Real-Time PCR – Analiza ekspresji

Program kursu:
„Real-Time PCR – Analiza ekspresji genów”
Dzień
Godz.
Temat zajęć
Dzień 1
9.00
9.45
Rozpoczęcie kursu
Doświadczenie I
Izolacja RNA z materiału biologicznego
Spektrofotometryczne oznaczanie czystości RNA
Synteza cDNA
Wykład 1 „Podstawy techniki Real-Time PCR”
Przerwa obiadowa
Doświadczenie II
Wyznaczanie krzywej wzorcowej dla układu amplifikacyjnego genu ACTB.
Wykład 2 „Etapy przedanalityczne w technice QPCR”
Omówienie wyników doświadczenia II (opcjonalnie)
Zakończenie zajęć
11.00
11.45
13.00
14.30
15.15
16.15
16.45
Dzień 2
9.00
9.30
10.30
11.00
12.00
13.00
13.30
14.30
15.00
Omówienie wyników doświadczenia II
Wykład 3 „Technika QPCR w analizie ekspresji genów ”
Doświadczenie III
Analiza ekspresji genów PLAGL1, LATS1 i SASH1 z wykorzystaniem metody ∆∆Ct
Przygotowanie materiałów
Nastawianie reakcji
Wykład 4 „Projektowanie i optymalizacja układów QPCR w oparciu o detekcję
SybrGreen. Analiza krzywej topnienia”
Prezentacja i omówienie aparatury
Przerwa obiadowa
Analiza wyników doświadczenia III. Dyskusja. Omówienie aparatury QPCR na rynku
polskim
Zakończenie zajęć
Przedstawione ramy czasowe mogą ulec niewielkim zmianom.
W trakcie kursu wykorzystywane są m.in. zestawy do izolacji DNA z serii EXTRACTME (DNA-Gdańsk) oraz
zestawy do Real-Time PCR z serii SensiFAST (Bioline). Doświadczenia wykonywane są na aparacie ABI®
7500 Fast (Life Technologies).
Koszt uczestnictwa obejmuje materiały drukowane (część teoretyczną i praktyczną), obiady, kawę i napoje,
certyfikat ukończenia kursu.
BLIRT S.A.
ul. Trzy lipy 3/1.38, 80-172 Gdańsk
tel.: +48 58 739-61-50, fax: +48 58 739-61-51
www.dnagdansk.com, e-mail: [email protected]