Uczelnia: Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Koło Naukowe Biologów

Uczelnia: Uniwersytet Rolniczy w Krakowie
Koło Naukowe Biologów
Autor: Joanna Szymanowicz, Daria Danecka
Opiekun naukowy: dr M. Murawski, dr T. Schwarz
The use of supercritical water as potential factor of gamete conservation and
storage improvement
Zastosowanie wody w stanie nadkrytycznym jako potencjalnego czynnika poprawy
wyników konserwacji i przechowywania gamet
Nasienie tryka poddane działaniu skrajnie niskich temperatur w procesie kriokonserwacji
charakteryzuje się niską wartością biologiczną. Z tego powodu zabiegiem koniecznym w
inseminacji owiec nasieniem mrożonym jest skrócenie do minimum drogi plemnika do miejsca
zapłodnienia, poprzez zastosowanie unasienniania domacicznego kosztowną i skomplikowaną
metodą laparoskopową. Szerokie rozpowszechnienie inseminacji doszyjkowej w praktyce
produkcyjnej wymaga podniesienia jakości nasienia po rozmrożeniu poprzez zmianę w technice
kriokonserwacji w tym ograniczenia zastosowania szkodliwych krioprotektorów.
Woda wprowadzona w stan nadkrytyczny poprzez działanie zimnej plazmy nabiera
specyficznych właściwości fizykochemicznych takich jak: zwiększona zdolność do rozpuszczania
substancji, ułatwione przenikanie przez błony komórkowe, oraz obniżony punkt zamarzania, co
może działać krioprotekcyjnie, zwiększając żywotność plemników.
Celem badań była analiza przeżywalności plemników tryka poddanych kriokonserwacji w
rozrzedzalniku z wodą dejonizowaną oraz wodą wprowadzoną w stan nadkrytyczny z użyciem
zimnej plazmy.
Analizie poddano 14 ejakulatów. Każdy z nich poddano wstępnej ocenie objętości,
koncentracji plemników i ich ruchliwości a następnie podzielono na dwie równe części z których
jedną zamrożono w rozrzedzalniku z wodą dejonizowaną zaś drugą wodą wprowadzoną w stan
nadkrytyczny.
Zastosowanie wody w stanie nadkrytycznym spowodowało nieznaczny wzrost ruchliwości
plemników rozmrożonych i ich przeżywalności w temp. 37oC w łaźni wodnej. Istotne różnice na
korzyść tej grupy stwierdzono natomiast w morfologicznej ocenie akrosomu i analizie wylewu
enzymów świadczących o integralności błon komórkowych wstawki plemnika (tab. 1).
Woda w stanie
Parametr
Woda dejonizowana
nadkrytycznym
Ruchliwość przed zamrożeniem [%]
89,3±7,3
Ruchliwość po rozmrożeniu [%]
26,4±12,2
30,8±12,4
Uszkodzone akrosomy [%]
64,6±17,2a
56,4±14,1b
187,1±160,4A
152,7±118,3B
2198,3±1810,5A
1612,1±1144,8B
Wylew AspAT [U/l]
Wylew ALP [U/l]
Przeżywalność [min]
266,6±61,3
270,9±76,7
Uzyskane wyniki wskazują na poprawę istotnych z punktu widzenia wartości biologicznej
parametrów nasienia po zastosowaniu do rozrzedzalnika wody w stanie nadkrytycznym.