MOCZNIK

MOCZNIK
Zestaw odczynnikowy do oznaczania stężenia mocznika
Tylko do diagnostyki in vitro
Nr kat. 5030.10150
Nr kat. 5030.20300
3 x 50 ml
3 x 100 ml
(R1: 3 x 40 ml; R2: 1 x 30 ml)
(R1: 3 x 80 ml; R2: 1 x 60 ml)
ZASTOSOWANIE
Zestaw służy do oznaczania stężenia mocznika w surowicy, osoczu lub
w moczu.
ZASADA METODY
Metoda
kinetyczna,
glutaminianową.
enzymatyczna, z ureazą i dehydrogenazą
ureaza
mocznik + H2O ↔ 2NH4+ + CO2
GLDH
NH4+ + NADH + H+ + 2-oksoglutaran ↔ glutaminian + NAD+
Mocznik jest hydrolizowany przez ureazę do jonów amonowych i
dwutlenku węgla. W obecności GLDH z jonów amonowych i
2-oksoglutaranu powstaje glutaminian, a NADH jest utleniane do NAD.
Szybkość zmian absorbancji mierzona przy długości fali 340 nm jest
proporcjonalna do stężenia mocznika.
MATERIAŁ DO BADAŃ
Surowica, osocze lub mocz pobrane zgodnie ze standardowymi
procedurami. Jako antykoagulant może być stosowana heparyna. Mocz
należy rozcieńczyć w stosunku 1/50 wodą destylowaną.
Próbki można przechowywać do 7 dni w temp. 2-8°C.
WARTOŚCI PRAWIDŁOWE
Surowica, osocze: 10 – 50 mg/dl (1,67 – 8,35 mmol/l)
Mocz: 20 – 35 g/24 h (330 – 580 mmol/24 h)
Podane wartości należy traktować jako orientacyjne. Zaleca się, aby
każde laboratorium określiło własne zakresy wartości prawidłowych.
SKŁAD ODCZYNNIKÓW
R1
Bufor TRIS pH 7,80
Dehydrogenaza glutaminianowa (GLDH)
Ureaza
2-Oksoglutaran
ADP
Azydek sodu
R2
Bufor węglanowy pH 9,65
NADH
Azydek sodu
Niereaktywne detergenty i stabilizatory
100 mmol/l
> 0,5 kU/l
> 6 kU/l
7 mmol/l
0,3 mmol/l
< 13,9 mmol/l
7,2 mmol/l
1,1 mmol/l
< 13,9 mmol/l
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKA ROBOCZEGO
Zmieszać odczynniki R1 i R2 w stosunku 4 + 1. Odczynnik roboczy jest
stabilny przez 2 miesiące w temp. 2-8°C lub 5 dni w temp. 15-25°C.
PRZECHOWYWANIE ODCZYNNIKÓW
Przechowywać w temp. 2-8°C w oryginalnych, zamkniętych
opakowaniach. Chronić przed kontaminacją i bezpośrednim działaniem
światła. Nie zamrażać.
Po otwarciu odczynniki prawidłowo przechowywane i chronione przed
zanieczyszczeniem są stabilne do daty ważności podanej na
opakowaniu.
CHARAKTERYSTYKA UŻYTKOWA
Limit detekcji: 3 mg/dl (0,5 mmol/l)
Czułość: 1,4 ∆mA x dl / mg (8,6 ∆mA x l / mmol)
Liniowość: 300 mg/dl (50,1 mmol/l). Dla wyższych stężeń próbkę
należy rozcieńczyć 0,9 % roztworem NaCl w stosunku 1+1; wynik
oznaczenia pomnożyć przez 2.
Powtarzalność (w serii oznaczeń):
poziom
I
18
n
43,31
średnia (mg/dl)
7,23
średnia (mmol/l)
< 3,00 %
% CV
II
18
143,55
23,97
< 2,50 %
Odtwarzalność (między seriami oznaczeń):
poziom
I
II
18
n
18
44,03
144,73
średnia (mg/dl)
7,35
24,17
średnia (mmol/l)
< 5,00 %
< 4,00%
% CV
Korelacje:
Badania korelacji wyników z wynikami uzyskanymi za pomocą
odczynników referencyjnych nie wykazały znaczących różnic. Dokładne
wyniki badań są dostępne na życzenie.
Interferencje:
Bilirubina do 20 mg/dl i lipemia do 1500 mg/dl (triglicerydy) nie
wpływają na wyniki oznaczeń.
Inne substancje i leki mogą interferować.
KONTROLA POPRAWNOŚCI DZIAŁANIA
W celu zapewnienia wiarygodności wykonywanych oznaczeń zaleca się
stosować surowice kontrolne z wartościami mocznika zmetrykowanymi
dla metody kietycznej UV.
Nie stosować odczynników, jeżeli absorbancja odczynnika roboczego
mierzona wobec wody przy długości fali 340 nm jest niższa niż 1,000.
DODATKOWE MATERIAŁY I WYPOSAŻENIE
- Fotometr lub analizator automatyczny z termostatowanym gniazdem
pomiarowym umożliwiający pomiar absorbancji przy długości fali 340
nm.
- Wzorzec mocznika lub kalibrator
- Standardowe wyposażenie laboratorium diagnostycznego.
WYKONANIE OZNACZENIA
Do kuwety napipetować:
Wzorzec
Próbka
Odcz. roboczy
1000 µl
1000 µl
Doprowadzić do temperatury oznaczenia (25°C lub 37°C), następnie
dodać:
Wzorzec
10 µl
Próbka
10 µl
Dokładnie wymieszać, inkubować przez ok. 1 minutę w temp. 25°C lub
ok. 30 – 40 sekund w temp. 37°C. Odczytać początkową absorbancję
(A1) przy długości fali 340 nm wobec wody lub powietrza. Powtórzyć
odczyt (A2) po dokładnie 1 minucie. Obliczyć zmianę absorbancji (∆A)
dla wzorca i badanych próbek.
1-04-2008
OBLICZENIA
A1 (Próbki) – A2 (Próbki)
Stężenie mocznika = ---------------------------------- x stęż. wzorca
A1 (Wzorca) – A2 (Wzorca)
Stężenie azotu mocznikowego = stężenie mocznika x 0,467
INFORMACJE DODATKOWE
1. Odczynniki zawierają azydek sodu. Przy pracy z odczynnikami
stosować środki ostrożności typowe dla rutynowych prac
laboratoryjnych.
2. Odpady utylizować zgodnie z obowiązującymi przepisami – przez
termiczne przekształcanie lub odpowiednimi metodami obróbki
fizyczno-chemicznej.
3. Aplikacje do analizatorów automatycznych dostarczamy na
życzenie.
4. Wzorzec mocznika lub multikalibrator do analizatorów
automatycznych należy nabywać osobno.
REFERENCJE
1. Talke H., Schubert G. E.: Enzymatische Harnstoffbestimmung im
Blut und Serumim optischen Test nach Warburg. Klin. Wschr. 43,
174-175 (1965).
2. Sampson E. J., Baird M. A., Burtis C. A., Smith E. M., Witte D. L.,
Bayse D. D.: A coupled-enzyme equilibrium method for measuring
urea in serum: optimization and evaluation of the AACC study group
on urea candidate reference method. Clin. Chem. 26, 816-826 (1980).
3. Young D. S.: Effects of drugs on clinical laboratory tests, AACC
Press, 4th ed. (1995).
STOSOWANE SYMBOLE GRAFICZNE - OBJAŚNIENIA:
CONT.
□a
X
zawartość
numer katalogowy
przed użyciem zapoznać się z instrukcją
wyrób do diagnostyki in vitro
temperatura przechowywania
producent
m
numer serii
2
data ważności
1-04-2008