Oznaczanie mirystycyny w produktach z muszkatołowca korzennego

Oznaczanie mirystycyny w produktach z muszkatołowca korzennego

Oznaczanie mirystycyny w produktach
z muszkatołowca korzennego
Julia Nowak, Marta Gładysz, Michał Woźniakiewicz, Paweł Kościelniak
Zakład Chemii Analitycznej
Wydział Chemii Uniwersytetu Jagiellońskiego
Orzech muszkatołowca korzennego
CH2
O
O
O
H3C
gałka muszkatołowa
mirystycyna
Po przyjęciu 10-20 g gałki
muszkatołowej może dojść do1,2:
• zaburzenia równowagi,
• halucynacji,
• stanów euforii,
• niepokoju i pobudzenia,
• nudności, tachykardii.
Oznaczenie mirystycyny w produktach z muszkatołowca korzennego może mieć znaczenie
w toksykologii i badaniach sądowych.
Celem pracy było zatem opracowanie nowoczesnych metod przygotowania próbki i oznaczania
mirystycyny w gałce muszkatołowej.
1DG.
2BC.
Barceloux (red.), Medical Toxicology of Natural Substances. John Wiley & Sons, Inc. New Jersey, 2008.
Sangalli, W. Chiang, Toxicology of nutmeg abuse. J Toxicol Clin Toxicol. 38(6) (2000) 671–678.
Opracowana metoda analizy
Technika przygotowania próbek: ekstrakcja wspomagana mikrofalami (MAE)
Optymalizacja ekstrakcji
Możliwy
rozkład
analitu
100
90
Ppow [%]
Optymalne warunki ekstrakcji
Temperatura 70 oC
Czas
80
20 min (do 48 próbek
jednocześnie)
Rozpuszczalnik n-heksan (+woda)
70
50oC
70oC
60
Objętość rozp. 5 ml (+2 ml)
Ilość próbki 4 mg
50
5
10
15
20
25
30
t [min]
Technika analizy ekstraktów: chromatografia gazowa sprzężona ze spektrometrią mas (GC-MS)
Parametry pracy GC-MS
mirystycyna
γ-oktalakton (IS)
CH2
O
Temperatura dozownika
290 oC
Program temperaturowy
70 – 300 oC
O
O
H3C
Gaz nośny
Podział strumienia
3
4
5
6
7
8
t [min]
9
10
Chromatogram próbki po ekstrakcji techniką MAE
11
12
13
Całkowity czas
Detekcja MS
hel (1 ml/min)
4:1
13 min
SIM (192, 85 m/z)
Walidacja metody analitycznej
30
Liniowość [µg/ml]
Precyzja
Pole pow. mir / IS
Parametry walidacji
0,5 - 100
LOD [mg/g]
0,037
LOQ [mg/g]
0,125
Odzysk [%]
97 - 109
CV intraday n=5 [%]
2,9 - 6,4
CV interday n=15 [%]
6,0 - 12,0
R² = 0,9996
25
20
15
10
5
0
0
20
40
60
c [µg/ml]
Analiza popularnych przypraw – gałka muszkatołowa (n=3)
14
12.94
12
10
9.66
c (mg/g)
8.71
8
7.00
6
5.91
5.85
4
2
0.98
1.02
0
Kotanyi
Mielona
Prymat
Mielona
Apetita
Mielona
Kamis Dary Natury Sklep
Mielona
Mielona
on-line
Mielona
Sklep
on-line
"Kwiat"
Sklep
on-line
Orzech
80
100
Wnioski
Opracowana metoda analizy jest wydajna, szybka i pozwala na analizę niewielkich ilości
próbki
•
Zaobserwowano dużą zmienność stężenia mirystycyny w badanych przyprawach – może być
to związane z różnym czasem i warunkami przechowywania (co potwierdzono w badaniach)
Stężenie mirystycyny µg/mg
•
12
10
8
6
MAE listopad
MAE marzec
4
Spadek zawartości mirystycyny o ok. 20%
w przypadku przechowywania próbek
w szczelnie zamkniętych, oryginalnych
opakowaniach, w temp. pokojowej.
2
0
Prymat
•
Appetita
Kamis
Najwyższe stężenie mirystycyny występuje w przyprawach producentów polecanych przez
osoby zażywające gałkę muszkatołową jako „działające najsilniej”3
3http://hyperreal.info/talk/,
Badania zostały zrealizowane z wykorzystaniem aparatury zakupionej ze środków
Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego w ramach Programu
Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka (projekt POIG.02.01.00-12-023/08).
odczytano 1.05.2014