apoptoza [tryb zgodności]
Transkrypt
apoptoza [tryb zgodności]
Cytometryczne techniki badania apoptozy: analiza zmian morfologicznych FSC/SSC zmiany konformacji błon komórkowych AnnV zmiany przepuszczalności błon komórkowych PI 7-AAD detekcja zburzeń funkcji mitochondriów•lipofilne barwniki fluorescencyjne akumulujące się w błonach mitochondriów JC-1, DIOC, Rodamina123, CMXRos •ilościowe wiązanie kardiolipiny w wewnętrznych błonach mitochondriów przez barwnik NAO Cytometryczne techniki badania apoptozy ocena aktywności kaspaz •przeciwciała monoklonalne wykrywające aktywna formę kaspaz •fluorescencyjne substraty kaspaz (dla kaspazy -3,-6,-8,-9) •wykrywanie przeciwciałami zdegradowanych substratów kaspaz PARP • wykrywanie florescencyjnego produktu uwalnianego z podawanego substratu pod wpływem działania kaspazy (Ac-DEVD-AMC), •FLICA znakowane fluorescencyjnie specyficzne inhibitory kaspaz detekcja fragmentacji DNA •TUNEL (dUDP) •BrDU •Analiza profilu DNA z użyciem PI Annexin V and PI Staining to Determine Early and Late Apopotic Events Necrosis Late apoptosis Early apoptosis http://www.imgenex.com ZNAKOWANIE APOPTOZY AnnV/PI PI 6,85% 42,01% AnnV APOPTOZA-- ZNAKOWANIE AnnV APOPTOZA MACS&MORE,Vol8-2/2004 APOPTOZA ZNAKOWANIE JCJC-1 Fl2 Ctrl R2 R2 R3 R3 R4 R4 Fl1 CYKL KOMÓRKOWY Ewa Kozłowska TUNEL ASSAY BIOSOURCE,Method Booklet 3 APOPTOZA znakowanie pęknięć w DNA Przy pomocy BrdU liczba komórek HISTOGRAM Intensywność fluorescencji APOPTOZA - TUNEL ASSAY BIOSOURCE,Method Booklet 3