1. Rozkład celulozy a) Na zestalony na płytce P

PODSTAWY BIOTECHNOLOGII
MIKROBIOLOGICZNY ROZKŁAD MATERIAŁÓW
(BIODEGRADACJA)
1. Rozkład celulozy
a)
b)
c)
d)
e)
f)
Na zestalony na płytce Petriego agar mineralny nałożyć za pomocą pęsety krążek
bibuły filtracyjnej.
Na powierzchni krążka umieścić kilka grudek ziemi kompostowej.
Płytki nie odwrócone wstawić o cieplarki o temp. 30oC na 2-3 tygodnie
Po inkubacji przeprowadzić obserwacje przy użyciu lupy lub mikroskopu
stereoskopowego i opisać zmiany, jakie nastąpiły w krążku bibuły filtracyjnej
(wytrawienia, zmiany barwy).
Ze zmienionych miejsc pobrać ezą materiał, wykonać preparaty:
• bakteryjny barwiony fuksyną,
• grzybowy w płynie Lugola
Oglądać pod mikroskopem, podać morfologię występujących bakterii i grzybów.
2. Rozkład tkanin
a)
b)
c)
d)
e)
Przygotować sześć pasków wybranej tkaniny o wymiarach 100 x 15 mm.
Trzy paski tkaniny włożyć za pomocą szpatułki do pojemnika z glebą.
Po 2-tygodniowej inkubacji w cieplarce w temp. 28oC wyjąć paski i oczyścić z
gleby.
Używając lupy lub mikroskopu stereoskopowego zaobserwować i opisać zmiany
wyglądu tkanin.
Sprawdzić wytrzymałość tkanin w porównaniu z kontrolą.
3. Wpływ grzybów na skórę
a)
b)
Na płytce z podłożem Czapek – Doxa za pomocą jałowej pęsety umieścić dwa
paski: jeden skóry naturalnej , drugi z materiału skóropodobnego.
Jałową pipetą pobrać 1 cm3 zawiesiny zarodników grzybów, zaszczepić
przygotowane płytki i rozprowadzić ją głaszczką na powierzchni badanych
próbek.
Płytki z zaszczepionymi próbkami umieścić w cieplarce w temp. 300C i
wilgotności względnej 95% na ok. 28 dni.
Po okresie inkubacji badane próbki wyjąć z płytek, zmyć bieżącą wodą
wodociągową. Usunąć nadmiar wody przy użyciu bibuły. Paski pozostawić do
wyschnięcia w temperaturze pokojowej.
Wysuszone paski oglądać pod lupą lub mikroskopem stereoskopowym i
zaobserwować zmiany w porównaniu z próbką kontrolną (próbka nie poddana
działaniu grzyba).
Zanotować wyniki eksperymentu.
c)
d)
e)
f)
4. Wpływ grzybów na tworzywa sztuczne
a)
b)
Do oznaczenia przygotować trzy próbki
Na płytce ze zmodyfikowanym podłożem Czapek – Doxa umieścić, używając
jałowej pęsety próbkę tworzywa sztucznego.
Jałową pipetą pobrać 0,2 cm3 zawiesiny zarodników grzyba i przenieść na płytkę.
Rozprowadzić zawiesinę po powierzchni przy użyciu głaszczki.
Płytki z zaszczepionymi próbkami umieścić w cieplarce w temp. 300C i
wilgotności względnej 95% na ok. 28 dni.
Po okresie inkubacji ocenić wzrost grzyba nieuzbrojonym okiem lub za pomocą
lupy czy mikroskopu. Wizualną ocenę intensywności wzrostu grzyba
przeprowadzić wg skali podanej w tabeli 1.
c)
d)
e)
f)
Tabela 1
Skala oceny wizualnej
Skala ocen
Wyniki badań
0
1
Brak widocznego pod mikroskopem wzrostu grzybów na próbce
Wzrost grzybów na próbce słabo widoczny nieuzbrojonym okiem,
ale dobrze widoczny pod mikroskopem
Wzrost grzybów na próbce widoczny nieuzbrojonym okiem, ale
mniej niż 25% powierzchni pokryte grzybem
Wzrost grzybów na próbce widoczny nieuzbrojonym okiem i ponad
25% powierzchni pokryte grzybem
2
3
5. Opracowanie wyników
Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w formie sprawozdania
Literatura:
1. Bulock J. Kristiansen B.: Basic biotechnology, Academic Press, London 1987.
2. Chmiel A.: Biotechnologia, PWN, W-wa 1991
3. Szostak – Kotowa J.: Ćwiczenia z mikrobiologii ogólnej i przemysłowej, Wyd. AE,
Kraków 2002.