Mikrobiologia lekarska – preparaty mikroskopowe i pożywki
Transkrypt
Mikrobiologia lekarska – preparaty mikroskopowe i pożywki
Mikrobiologia lekarska – preparaty mikroskopowe i pożywki Kierownik Zakładu Mikrobiologii i Laboratoryjnej Immunologii Medycznej: dr hab. n.med. prof. nadzw. Janina Grzegorczyk Opracowanie: dr n. med. Małgorzata Brauncajs prof. dr hab. n. med. Zbigniew Krzemiński Dwiczenie 1. Mikrobiologia ogólna - Pożywki bakteryjne. Techniki posiewów. Uzyskiwanie czystej hodowli. Pożywki bakteryjne wzbogacone. Pożywka Loefflera (w postaci skosu; do hodowli maczugowców). Pożywka Loewensteina-Jensena (w postaci skosu; do hodowli prątków). Dwiczenie 1. Mikrobiologia ogólna - Pożywki bakteryjne. Techniki posiewów. Uzyskiwanie czystej hodowli. Szczepy barwnikotwórcze. barwniki niedyfundujące do podłoża (Micrococcus spp., Staphylococcus spp.) 3 barwniki dyfundujące do podłoża (Pseudomonas spp.) Dwiczenie 2. Mikrobiologia ogólna – Budowa komórki bakteryjnej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Preparaty bakteryjne barwione metodą negatywną ukazujące kształty komórek bakteryjnych. Kształt cylindryczny. 4 Kształt kulisty. Dwiczenie 2. Mikrobiologia ogólna – Budowa komórki bakteryjnej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Preparaty bakteryjne ukazujące obecnośd otoczki. Preparat barwiony metodą pozytywnonegatywną. 5 Preparat z tkanki zakażonej przez bakterie posiadające otoczki. Dwiczenie 2. Mikrobiologia ogólna – Budowa komórki bakteryjnej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Preparaty bakteryjne ukazujące obecnośd przetrwalników. Preparat zabarwiony metodą Grama (przetrwalniki widoczne jako niezabarwione struktury wewnątrz komórek). 6 Preparat zabarwiony zielenią malachitową i safraniną (przetrwalniki zabarwione na kolor zielony). Dwiczenie 2. Mikrobiologia ogólna – Budowa komórki bakteryjnej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Preparat bakteryjny ukazujący rzęski (bakterie dwurzęse). 7 Dwiczenie 3. Mikrobiologia ogólna – Identyfikowanie bakterii. Występowanie bakterii w środowisku człowieka i w jego organizmie. Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Identyfikowanie bakterii na podstawie ich cech biochemicznych - testy API. 8 Dwiczenie 3. Mikrobiologia ogólna – Identyfikowanie bakterii. Występowanie bakterii w środowisku człowieka i w jego organizmie. Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Określanie właściwości hemolitycznych bakterii. Hemoliza typu alfa (zazielenienie wokół kolonii bakteryjnych). 9 Hemoliza typu beta (przejaśnienie wokół kolonii bakteryjnych). Dwiczenie 4. Mikrobiologia ogólna – Antybiotyki i chemioterapeutyki. Antybiogram wykonany metodą krążkowo-dyfuzyjną. 10 Dwiczenie 4. Mikrobiologia ogólna – Antybiotyki i chemioterapeutyki. Ustalanie najmniejszego stężenia hamującego antybiotyku (MIC – ang. minimal inhibitory concentration) przy zastosowaniu E-testu; MIC = 0,125. 11 Dwiczenie 4. Mikrobiologia ogólna – Antybiotyki i chemioterapeutyki. Metody wykrywania szczepów gronkowca złocistego opornych na metycylinę (MRSA – ang. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus). Metoda z użyciem krążka z cefoksytyną (szczep oporny po lewej stroni). 12 Metoda przeglądowa (wzrost szczepu świadczy o oporności; brak wzrostu świadczy o wrażliwości). Dwiczenie 6. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramujemne (rodzaj Neisseria), krętki (rodzaj Borrelia, Treponema, Leptospira). Neisseria gonorrhoeae – preparat z wysięku ropnego z cewki moczowej zabarwiony metodą Grama; wewnątrz granulocytów obojętnochłonnych widoczne Gram-ujemne dwoinki (rodzaj nazwany tak ku czci lekarza i bakteriologa niemieckiego Alberta Ludwiga Sigesmunda Neissera (1855-1916), który odkrył te drobnoustroje w 1879 r. jako czynnik etiologiczny rzeżączki). 13 Dwiczenie 6. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramujemne (rodzaj Neisseria), krętki (rodzaj Borrelia, Treponema, Leptospira). Demonstracja preparatów rożnych stopni czystości pochwy zabarwionych metodą Grama. Prawidłowa flora fizjologiczna pochwy; przeważają Gram-dodatnie pałeczki kwasu mlekowego (Lactobacillus spp,) (łac. lactis - mleko; bacillum laseczka, pałeczka). 14 Pośrednia flora bakteryjna pochwy; przeważają różne Gram-ujemne beztlenowe bakterie. Niewiele Gramdodatnich Lactobacillus pp. Dwiczenie 6. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramujemne (rodzaj Neisseria), krętki (rodzaj Borrelia, Treponema, Leptospira). Ciąg dalszy - Demonstracja preparatów rożnych stopni czystości pochwy zabarwionych metodą Grama. Bakteryjna waginoza (vaginosis bacterialis); dominują Gram-ujemne bakterie beztlenowe. 15 Grzyby w wydzielinie z pochwy. Dwiczenie 6. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramujemne (rodzaj Neisseria), krętki (rodzaj Borrelia, Treponema, Leptospira). Preparat Treponema pallidum w zakażonej tkance zabarwiony metodą Giemsy (grec. (trepo) - obracam; (nema) - nid). 16 Dwiczenie 7. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Staphylococcus). Wzrost Staphylococcus aureus (rozkłada mannitol) i Staphylococcus epidermidis (nie rozkłada mannitolu) na pożywce wybiorczo-diagnostycznej Chapmana. 17 Dwiczenie 7. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Staphylococcus). Wzrost Staphylococcus aureus na pożywce Chapmana. 18 Dwiczenie 7. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Staphylococcus). Różnicowanie gronkowców z mikrokokami w oparciu o ich wrażliwośd na furazolidon; mikrokoki oporne (wzrost z lewej strony), gronkowce wrażliwe (wzrost z prawej strony). 19 Dwiczenie 7. Mikrobiologia szczegółowa – Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Staphylococcus). Preparat Staphylococcus aureus zabarwiony metodą Grama; komórki ułożone w skupiska przypominające winne grona (grec. (staphyle) - winne grono; łac. coccus z grec. (kokkos) - ziarnko, pestka). 20 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Preparaty Corynebacterium diphtheriae i Corynebacterium pseudodiphtheriticum zabarwione metodą Neissera i metodą Grama (grec. (koryne) - maczuga; (baktron) - kij, laska). Preparat C.diphtheriae zabarwiony metodą Neissera; na koocach komórek widoczne wybarwione na granatowo ziarna wolutyny. 21 Preparat C.diphtheriae zabarwiony metodą Grama; widoczne charakterystyczne ułożenie komórek przypominające chioskie znaki graficzne. Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Ciąg dalszy - Preparaty Corynebacterium diphtheriae i Corynebacterium pseudodiphtheriticum zabarwione metodą Neissera i metodą Grama (grec. (koryne) - maczuga; (baktron) - kij, laska). Preparat C.pseudodiphteriticum zabarwiony metodą Neissera; brak ziaren wolutyny. 22 Preparat C.pseudodiphteriticum zabarwiony metodą Grama; widoczny charakterystyczny palisadowy układ komórek. Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Wzrost Streptococcus pyogenes na agarze z krwią z krążkiem zawierającym bacytracynę; strefa zahamowania wzrostu wokół krążka pozwala zidentyfikowad ten gatunek. 23 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Wzrost Streptococcus pneumoniae na agarze z krwią z krążkiem zawierającym optochinę; strefa zahamowania wzrostu wokół krążka pozwala zidentyfikowad ten gatunek. 24 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Preparat hemokultury zabarwiony metodą Grama; wskazuje na obecnośd Streptococcus pyogenes. 25 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Preparat Streptococcus pyogenes zabarwiony metodą Grama; widoczne komórki ułożone w charakterystyczne paciorki (łaocuszki) (grec. (streptos) – naszyjnik, łac. coccus z grec. (kokkos) - ziarnko, pestka). 26 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Preparat zabarwiony metodą Grama z zakażonej tkanki, wskazujący na obecnośd Streptococcus pneumoniae (Gram-dodatnie dwoinki posiadające wspólną otoczkę). 27 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Wzrost Enterococcus faecalis na pożywce z żółcią i eskuliną - (podłoże Coccosel-agar) (grec. (enteron) - jelito; (kokkos) - ziarnko, pestka). 28 Dwiczenie 8. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki Gramdodatnie (rodzaj Corynebacterium). Ziarenkowce Gramdodatnie (rodzaj Streptococcus i Enterococcus). Preparatu Enterococcus faecalis zabarwiony metodą Grama; widoczne charakterystyczne ułożenie komórek w dwoinki i skupiska. 29 Dwiczenie 9. Mikrobiologia szczegółowa – Laseczki tlenowe (rodzaj Bacillus) i beztlenowe (rodzaj Clostridium). Pałeczki Gram dodatnie i Gram-ujemne (rodzaj Actinomyces, Bacteroides, Fusobacterium, Propionibacterium). Preparaty Clostridium tetani (A) i Clostridium botulinum (B) zabarwionych metodą Grama (grec. (kloster) – wrzeciono). Przetrwalniki (niewybarwione) na koocach Przetrwalniki (niewybarwione) na koocach komórek w postaci owalnej. komórek w postaci jajowatej. 30 Dwiczenie 9. Mikrobiologia szczegółowa – Laseczki tlenowe (rodzaj Bacillus) i beztlenowe (rodzaj Clostridium). Pałeczki Gram dodatnie i Gram-ujemne (rodzaj Actinomyces, Bacteroides, Fusobacterium, Propionibacterium). Preparat Actinomyces israelii z ropy zabarwiony metodą Grama; widoczne skupisko komórek tworzące tzw. „ziarno siarkowe” (grec. dop. (aktis, aktinos) promieo; (mykes) - grzyb). 31 Dwiczenie 9. Mikrobiologia szczegółowa – Laseczki tlenowe (rodzaj Bacillus) i beztlenowe (rodzaj Clostridium). Pałeczki Gram dodatnie i Gram-ujemne (rodzaj Actinomyces, Bacteroides, Fusobacterium, Propionibacterium). Preparaty pałeczek beztlenowych zabarwionych metodą Grama Bacteroides spp. (łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska; (-ides) - przyrostek oznaczający pokrewieostwo lub podobieostwo). 32 Fusobacterium spp.) (łac. fusus - wrzeciono; łac. bacterium z grec. (baktron) - kij, laska, pałeczka). Dwiczenie 9. Mikrobiologia szczegółowa – Laseczki tlenowe (rodzaj Bacillus) i beztlenowe (rodzaj Clostridium). Pałeczki Gram dodatnie i Gram-ujemne (rodzaj Actinomyces, Bacteroides, Fusobacterium, Propionibacterium). Ciąg dalszy - Preparaty pałeczek beztlenowych zabarwionych metodą Grama Propionibacterium spp. (łac. acidum propionicum kwas propionowy; bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska). 33 Dwiczenie 9. Mikrobiologia szczegółowa – Laseczki tlenowe (rodzaj Bacillus) i beztlenowe (rodzaj Clostridium). Pałeczki Gram dodatnie i Gram-ujemne (rodzaj Actinomyces, Bacteroides, Fusobacterium, Propionibacterium). Podłoża stosowane do hodowli bakterii beztlenowych: (od lewej: podłoże tioglikolanowe, podłoże Wrzoska z kawałkami wątroby, bulion pod parafiną, podłoże z tkanką mózgową. 34 Dwiczenie 10. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki jelitowe (rodzina Enterobacteriaceae), rodzaj Pseudomonas, rodzaj Vibrio. Wzrost rożnych gatunków pałeczek jelitowych na pożywkach wybiorczonamnażających i wybiorczo-diagnostycznych. Pożywka MacConkeya (kolonie bakterii laktozo-dodatnich zabarwione na czerwono, laktozoujemnych bezbarwne). 35 Dwiczenie 10. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki jelitowe (rodzina Enterobacteriaceae), rodzaj Pseudomonas, rodzaj Vibrio. Ciąg dalszy - Wzrost rożnych gatunków pałeczek jelitowych na pożywkach wybiorczonamnażających i wybiorczo-diagnostycznych. Pożywka SS (Salmonella-Shigella); kolonie bezbarwne – Shigella spp. (od nazwiska Kiyoshi Shiga, który wykrył pałeczkę czerwonki w 1897 roku), bezbarwne z czarnym środkiem – Salmonella spp (od nazwiska D.E. Salmona, bakteriologa amerykaoskiego), różowe – E. coli (od nazwiska T. Eschericha, który pierwszy wyizolował typowy drobnoustrój z tego rodzaju). 36 Dwiczenie 10. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki jelitowe (rodzina Enterobacteriaceae), rodzaj Pseudomonas, rodzaj Vibrio. Mgławicowy wzrost Proteus vulgaris (pałeczka odmieoca; ( (Proteus) greckie bóstwo morskie „Odmieniec” posiadające zdolnośd dowolnego zmieniania postaci). 37 Dwiczenie 10. Mikrobiologia szczegółowa – Pałeczki jelitowe (rodzina Enterobacteriaceae), rodzaj Pseudomonas, rodzaj Vibrio. Podłoże zanurzeniowe do badania bakteriurii (Uromedium). 38 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Wzrost rożnych gatunków prątków na pożywce Loewensteina-Jensena: (probówka nr 1 - Nocardia spp. na skosie agarowym, probówki nr 2 i 3 - prątki na pożywce L-J). 39 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Testy biochemiczne stosowane w identyfikacji prątków – test Bogena i test niacynowy. (probówka nr 1 - test niacynowy, nr 2 - Nocardia spp. – skos, probówka nr 3 - test Bogena). 40 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Test Bogena. 41 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Test niacynowy. 42 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Preparat Mycobacterium tuberculosis zabarwiony metodą Ziehla-Neelsena: komórki prątków zabarwione na czerwono, tło preparatu na niebiesko. 43 Dwiczenie 11. Mikrobiologia szczegółowa – Prątki (rodzaj Mycobacterium) (grec. (mykes) - grzyb; łac. bacterium - bakteria z grec. (baktron) - kij, laska) i nokardie (rodzaj Nocardia) (od nazwiska E. Nocarda, który pierwszy opisał te drobnoustroje). Ustalanie lekooporności prątków metodą wskaźnikową. 44
Podobne dokumenty
Mikrobiologia lekarska – preparaty mikroskopowe i pożywki
Antybiogram wykonany metodą krążkowo-dyfuzyjną.
Bardziej szczegółowo