ZAKŁAD CYTOLOGII Instytut Zoologii

Transkrypt

ZAKŁAD CYTOLOGII Instytut Zoologii
ZAKŁAD CYTOLOGII
Instytut Zoologii
Maria Anna Ciemerych-Litwinienko
Budynek C, II piętro
216C
www.biol.uw.edu.pl/cytologia
komórki macierzyste
komórki macierzyste
pierwotne
komórki
płciowe
ektoderma
tkanki
i
narządy
endoderma
węzeł
zarodkowy
mezoderma
komórki
prekursorowe
tkankowo
specyficzne listki zarodkowe
multipotentne
komórki
macierzyste
konieczne do samoodnawiania się tkanek
trofektoderma
tkanki pozazarodkowe
1. zachowują zdolność do samoodnowy
2. pozostają niezróżnicowane
3. mogą z nich powstać wyspecjalizowane komórki
komórki macierzyste
komórki macierzyste
1. zachowują zdolność do samoodnowy
2. pozostają niezróżnicowane
3. mogą z nich powstać wyspecjalizowane komórki
komórki satelitowe mięśni szkieletowych
fot. Terry Partridge/from Myores website
jak przebiega różnicowanie komórek satelitowych?
in vivo w uszkodzonym mięśniu?
in vitro po ich izolacji?
jaką rolę w różnicowaniu komórek satelitowych odgrywają
czynniki zewnętrzne np. białka macierzy pozakomórkowej?
fot. Terry Partridge/from Myores website
komórki macierzyste
komórki macierzyste
choroby takie jak np. dystrofie mięśniowe
prowadzą do wyczerpania puli komórek satelitowych
mobilizować komórki endogenne?
np. SDF-1
czym je zastąpić?
czym je zastąpić?
fot. Terry Partridge/from Myores website
fot. Terry Partridge/from Myores website
komórki macierzyste
komórki macierzyste
przeszczepiać komórki egzogenne?
czym je zastąpić?
komórki
ludzkiej krwi
pępowinowej
fot. Terry Partridge/from Myores website
komórki
izolowane
z tkanki łącznej
ludzkiej pępowiny
mysie zarodkowe
komórki macierzyste
(ES)
mysie indukowane
komórki pluripotentne
(iPS)
mysie komórki
płynu owodniowego
komórki macierzyste
komórki macierzyste
mysie komórki płynu
owodniowego
Karolina Archacka
mysie komórki ES
eksprymujące YFP
Andreas Nagy
Mount Sinai Hospital
Toronto Canada
mysie komórki ES
eksprymujące
histon H2B—GFP
Kat Hadjantonakis
Sloan-Kettering Institute
New York, USA
regeneracja mięśnia szkieletowego
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
nawet jeżeli komórki satelitowe są obecne
regeneracja nie zawsze przebiega prawidłowo
często mięsień ulega zwłóknieniu
(nadmierna synteza białek charakterystycznych dla tkanki łącznej)
dr Karolina
Archacka
barwienie trichromem Massona
Karolina Archacka
dr Iwona
Grabowska
dr Edyta
Brzóska
ES
krew pępowinowa krew pępowinowa
AFS
komórki izolowane komórki izolowane
Pax7 KO
z pępowiny
z pępowiny
ES
SDF-1
iPS
białka adhezji i fuzji
dr Małgorzata dr hab. Maria Anna
Zimowska Ciemerych-Litwinienko
cykl komórkowy
rozwój zarodkowy
ES
ES
MMP
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
mgr inż. Paulina
Mosiołek
TGFbeta1
MMP
mgr Joanna
Bem
ES
mikroRNA
Pax7 KO
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
mgr Areta
Czerwińska
mgr Marta
Przewoźniak
ES
ES
Pax7 KO białka adhezji i fuzji
czynniki wzrostu
mgr Władysława
Stremińska
histologia
doświadczania
z wykorzystaniem
zwierząt
Katarzyna
Ilach
hodowle komórkowe
prof. Jerzy
Moraczewski
regeneracja mięśni
różnicowanie komórek
satelitowych
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
Magistranci i Licencjanci Zakładu Cytologii 2010/2011
Koło Naukowe Biologii Medycznej
dr Karolina Archacka Zakład Cytologii
dr Katarzyna Tońska Instytut Biotechnologii i Genetyki
nieobecni:
Piotr Rowicki (I MU) Izabela Plaskota (I MU)
Kamil Kowalski (Lic) Wojciech Solarek (Lic)
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
dr Iwona Grabowska
Udział komórek macierzystych w regeneracji mięśni szkieletowych.
Miogeniczny potencjał komórek macierzystych.
Różnicowanie komórek w hodowlach przestrzennych.
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
dr Edyta Brzóska
Miogeneza i fuzja – badania w systemach in vitro
Rola czynnika SDF-1 w różnicowaniu mioblastów oraz zasiedlaniu
mięśni przez komórki macierzyste
licencjaty 2008-2011:
licencjaty 2008-2011:
2008
2007 -
2010
2011
Różnicowanie zarodkowych komórek macierzystych w kokulturze z mioblastami
linii C2C12 – hodowla przestrzenna
Sylwia Gawrzak
Populacje komórek występujących w mięśniach podczas rozwoju i regeneracji
Maciej Krupa
Rola czynnika transkrypcyjnego Pax7 w różnicowaniu mysich zarodkowych
komórek macierzystych – analiza potworniaków
Wojciech Solarek
LUDZIE i BADANIA
2009 -
2011 -
Lokalizacja podjednostki alfa3 integryny podczas regeneracji mięśnia Soleus
Areta Czerwińska
Wpływ podawania egzogennego SDF-1 na różnicowanie się in vitro komórek
satelitowych
Agnieszka Markowska
Różnicowanie się mioblastów – rola białek adhezyjnych
Iwona Czaplicka
Wpływ SDF-1 na migrację komórek macierzystych in vitro
Kamil Kowalski
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
dr Małgorzata Zimowska
Rola macierzy zewnątrzkomórkowej w regeneracji mięśni
szkieletowych in vivo i różnicowaniu mioblastów in vitro
dr Karolina Archacka
Zarodkowe komórki macierzyste oraz komórki pochodzenia płodowego w rozwoju
i regeneracji i mięśni szkieletowych. Czynniki kontrolujące różnicowanie komórek ES.
licencjaty 2008-2011:
2008
Określenie aktywności MMP-9 w czasie różnicowania mioblastów linii
C2C12
Eliza Nowak
2009
Określenie lokalizacji Wnt i Frizzled podczas regeneracji mięśni
szkieletowych myszy
Agnieszka Czajka
2011
Określenie wpływu inhibitora TIMP na proces różnicowania mioblastów in
vitro. Określenie lokalizacji i aktywność MMP-9 i MMP-2.
Barbara Świerczek
Określenie wpływu zahamowania działania TGFbeta1 na aktywność MMP-9 i
MMP-2 w czasie różnicowania mioblastów in vitro.
Piotr Jung
licencjaty :
obecnie
Określenie wzoru ekspresji Wnt w zarodkowych komórkach macierzystych
Damian Dudka
opieka nad pracami licencjackimi i magisterskimi Agnieszki Denkis, Agnieszki Czajki
i Małgorzaty Tybor dotyczącymi różnicowania komórek macierzystych i regeneracji
mięśni szkieletowych
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
mgr Marta Przewoźniak
Wpływ czynników zewnętrznych na zmiany ekspresji białek adhezyjnych podczas
różnicowania i fuzji mioblastów oraz różnicowaniu komórek ES.
mgr Areta Czerwińska
Rola białka Pax7 w regulacji miogenicznego różnicowania komórek ES
opieka nad pracą licencjacką i magisterską Anny Andrzejewskiej dotyczącymi wpływu
czynników wzrostu na różnicowanie komórek macierzystych
opieka nad pracą magisterską Piotra Rowickiego dotyczącą różnicowania komórek ES
indukowanego insuliną, transferyną i selenem
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
mgr Joanna Bem
Rola mikroRNA w miogenicznym różnicowaniu komórek ES
LUDZIE i BADANIA
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE i BADANIA
mgr inż. Paulina Mosiołek
Rola TGFbeta w różnicowaniu mioblastów i regeneracji mięśni szkieletowych
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LUDZIE
przykładowe prace, których autorami byli licencjaci / magistranci:
dr hab. Maria Anna Ciemerych-Litwinienko, prof. U.W.
Możliwości rozwojowe zarodkowych komórek macierzystych (ES), indukowanych
komórek pluripotentnych (iPS), regulacja cyklu komórkowego
licencjaty 2007-2009:
2007 –
2010 -
Ekspresja czynnika transkrypcyjnego Oct-4 w mysich zarodkowych
komórkach
macierzystych hodowanych z mioblastami linii komórkowej C2C12
Agnieszka Denkis
Rola mikroRNA w zachowaniu pluripotencji komórek macierzystych,
powstawaniu tkanek i nowotworzeniu
Piotr Rowicki
Czynniki wzrostu i cytokiny w różnicowaniu mioblastów i regeneracji mięśni
szkieletowych
Anna Andrzejewska
1. M. Zimowska, E. Brzóska, M. Swierczyńska, W. Stremińska and J. Moraczewski.
(2008) Distinct patterns of MMP-9 and MMP-2 activity in slow and fast twitch skeletal
muscle regeneration in vivo Int. J. Dev. Biol. 52: 307-314
2. K. Olszyński, M. Zimowska (2009) Budowa i funkcja metaloproteinaz macierzy
zewnątrzkomórkowej. Post. Bioch. 55(1):76-84.
3. M. Zimowska, A. Duchesnay, P. Dragun, A. Oberbek, J. Moraczewski and I. Martelly
(2009) Immunoneutralization of TGFb1 improves skeletal muscle regeneration:
effects on myoblast differentiation and glycosaminoglycan content. Int. J. Cell Biol.
2009:659372
4. I. Grabowska, A. Szeliga, J. Moraczewski , I. Czaplicka , Brzóska E. (2011)
Comparison of satellite cell-derived myoblasts and C2C12 differentiation in two- and
three-dimensional cultures: changes in adhesion protein expression. Cell Biol Int.
14;35(2):125-33.
5. I. Grabowska, E. Brzoska, A. Gawrysiak, W. Streminska, J. Moraczewski, Z.
Polanski, G. Hoser, J. Kawiak, E.K. Machaj, Z. Pojda, M.A. Ciemerych (2012)
Restricted myogenic potential of mesenchymal stromal cells isolated from umbilical
cord. Cell Transplantation (w druku)
6. M. Zimowska, K.H. Olszynski, M. Swierczynska, W. Streminska, M.A. Ciemerych
(2012) Decrease of MMP-9 activity improves Soleus muscle regeneration Tissue Eng
(w druku)
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
hodowle in vitro
badania in vitro
komórki satelitowe
linie komórkowe np. C2C12
zarodkowe komórki macierzyste
TECHNIKI
hodowle in vitro 3D
badania in vivo
regeneracja mięśni szczurów i myszy
zarodkowe
komórki
macierzyste
(ES)
różnicujące
mioblasty
skrawki optyczne
lokalizacja aktyny i jąder komókowych (C2C12)
Fot. I. Grabowska
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
hodowle in vitro
TECHNIKI
hodowle in vitro 3D
zarodkowe
komórki
macierzyste
(ES)
różnicujące
mioblasty
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
różnicowanie komórek ES
kule zarodkowe utworzone z ekto-, endo i mezodermy
Fot. A. Czerwińska
lokalizacja aktyny i jąder komórkowych
(C2C12)
Fot. I. Grabowska
TECHNIKI
Fot. M. Przewoźniak
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
immunolokalizacja wybranych epitopów na
skrawkach histologicznych
badania histologiczne regenerujących mięśni
Fot. I. Grabowska
Fot. I. Grabowska
laminina, jądra kmórkowe, ludzkie jądra komórkowe
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
immunodetekcja
badanych białek
M-kadheryny i β-kateniny
TECHNIKI
immunoprecypitacja
Western blotting
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
cytometria przepływowa
MyoD i GFP
ADAM12 V‐CAM 1
CD9 M‐kadheryna
Fot. E. Wróbel
Fot. E. Wróbel
Fot. I. Grabowska
E. Brzóska
Fot. M. Przewoźniak
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
TECHNIKI
Badania poziomu mRNA - RT-PCR
Fot. E. Brzóska
dzień
0
3
5
7
9
11
0
Pax7
3
5
7
9
11
GAPDH
oraz Real Time PCR
Nadekspresja badanych białek (transfekcja)
48h
72h
Nadekspresja badanych białek (transfekcja)
144h
48h
72h
144h
komórki C2C12
transfekowane plazmidem
kodującym integrynę α3
Fot. E. Brzóska
komórki C2C12
transfekowane plazmidem
kodującym integrynę α3
Fot. E. Brzóska
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
zymografia
badania aktywności
metaloproteinaz (MMP)
in situ
TECHNIKI
przedmioty obowiązkowe:
Biologia komórki (M i D)
Kultury tkankowe zwierząt
zymografia
badania aktywności
metaloproteinaz (MMP)
w żelu
0
1
3
5
7
MMP-9
MMP-2
Fot. M. Zimowska
lokalizacja aktyny i aktywnej formy MMP2 i MMP9
(C2C12)
DYDAKTYKA
II lub IV semestr M.A. Ciemerych i M. Zimowska
II semestr E. Brzóska
przedmioty fakultatywne:
Histologia zwierząt
Hodowle komórek zwierzęcych
Komórki macierzyste w biologii i medycynie
14
Fot. M. Zimowska
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
I semestr M.A. Ciemerych i A. Czubaj
I semestr I. Grabowska
I semestr K. Archacka
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LICENCJATY
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LICENCJATY
Wymagania dla studentów wykonujących licencjat (pracę magisterską):
I, II rok
Biologia Komórki (Duża lub Mała)
Biologia Rozwoju (Duża lub Mała)
5-6 miejsc
III rok
Histologia zwierząt
Hodowle komórek zwierzęcych lub Kultury tkankowe zwierząt
Komórki macierzyste w biologii i medycynie
przedmioty zalecane:
Embriologia eksperymentalna ssaków
Genetyka Molekularna
Analiza biochemiczna
Ultrastruktura komórek – techniki i metody badań
oceny z : Biologii Komórki, Biologii Rozwoju, Zoologii i Biochemii
ćwiczenia i egzamin
przy nadmiarze kandydatów ranking wg średniej z ocen
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LICENCJATY
chętnych proszę o wpisanie się na listę lub przesłanie e-maila na adres:
[email protected]
ZAKŁAD CYTOLOGII, Instytut Zoologii
LICENCJATY