LSD - Roche
Transkrypt
LSD - Roche
0020763284122COINV6.0 LSD Abuscreen OnLine Lysergic Acid Diethylamide Narkotyki i nadużywanie leków Informacje o odczynnikach 20763284 122 20766356 122 Abuscreen OnLine Lysergic Acid Diethylamide (200 testw) Abuscreen OnLine LSD Calibration/Control Pack LSD Calibrator (1 × 5 mL) LSD Positive Control (2 × 4 mL) LSD Negative Control (2 × 4 mL) ID systemowe 07 6328 4 Analizatory, w których mogą być używane odczynniki cobas c pack COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Polski Odczynniki - roztwory robocze Informacja o aplikacjach Test LSD, ID testu 0‑328 Sample Diluent (SD) Bufor z dodatkiem substancji stabilizującej i 0.09 % roztworu azydku sodowego Microparticle Reagent (MP) Skoniugowane mikrocząstki pochodnej LSD w buforze z 0.09 % roztworem azydku sodowego Antibody Reagent (AB) Przeciwciało przeciwko LSD (kozie, poliklonalne) w buforze z 0.09 % roztworem azydku sodowego Zastosowanie Test Lysergic Acid Diethylamide (LSD) jest testem diagnostycznym in vitro do oznaczeń jakościowych LSD i jego metabolitów w moczu ludzkim w systemach COBAS INTEGRA w punkcie odcięcia 0.5 ng/mL. Test do oznaczania LSD dostarcza jedynie wyników wstępnych. W celu uzyskania potwierdzonego wyniku należy zastosować inną, bardziej swoistą metodę oznaczeń. Preferowaną metodą potwierdzenia jest chromatografia gazowa lub chromatografia cieczowa w połączeniu ze spektrometrią masową lub tandemową spektrometrią masową (GC/MS, GC/MS/MS, LC/MS lub LC/MS/MS).1,2 Wyniki testów na obecność narkotyków należy interpretować z uwzględnieniem klinicznego stanu pacjenta, szczególnie gdy wstępny wynik jest dodatni. Podsumowanie Dwuetyloamid kwasu lizergowego (LSD, lizergamid, Delysid) jest alkaloidem naturalnie wytwarzanym przez grzyb o nazwie buławinka czerwona (Claviceps Purpurea). Niemniej większość LSD będącego na rynku pochodzi z nielegalnej syntezy polegającej na reakcji kwasu lizergowego z dietyloaminą.3,4 LSD jest środkiem halucynogennym powodującym głębokie zmiany stanu świadomości, wyzwalającym reakcje psychotyczne z występowaniem halucynacji i powodującym inne zaburzenia percepcji charakteryzujące się podobieństwem do psychoz funkcjonalnych.4,5 Uważa się, że psychotomimetyczne działanie LSD powodowane jest jego antagonizmem w stosunku do działania serotoniny (5‑hydroksytryptaminy) w neuronach pnia mózgu.4,5,6 Z występujących czterech diastereomerów LSD właściwości psychotyczne ma tylko d‑LSD. d‑LSD jest jednym z najsilniejszych związków halucynogennych znanych ludzkości mającym jednocześnie bardzo niską toksyczność.3,5,6 Zazwyczaj LSD zażywane jest przez narkomanów w postaci soli winianowych w dawkach doustnych 25 - 250 µg3 Narkotyk podlega tak szybkiemu i prawie całkowitemu metabolizmowi, że tylko niezwykle mała część pobranej dawki wydalana jest z moczem w postaci niezmienionego LSD. W moczu osób zażywających narkotyk znajduje się za to wiele metabolitów, takich jak (podanych w kolejności zmniejszającego się stężenia) 2‑okso-3-hydroksyLSD, o-glukuronid LSD, 2‑okso-LSD, LSD, N‑dezmetylo-LSD (nor-LSD).1,2,3 Izo-LSD nie jest metabolitem LSD, ale jest najczęściej występującym zanieczyszczeniem w produkowanym nielegalnie LSD i w związku z tym jest często wykrywane w moczu i innych płynach jam ciała narkomanów1 Zasada pomiaru Kinetyczna interakcja mikrocząstek w roztworze (KIMS)7,8 oraz pomiar efektu interakcji jako zmian transmisji światła. Przy braku leku w próbce wolne przeciwciało wiąże się z koniugatem lekmikrocząstki, powodując tworzenie się agregatów mikrocząstek. Wraz z postępem reakcji agregacji w przypadku braku substancji badanej w próbce, wzrasta absorbancja. W przypadku, gdy oznaczana substancja jest obecna w próbce, konkuruje ona o wolne przeciwciało z jej pochodną, związaną z cząstką. Przeciwciało związane z badaną substancją pochodzącą z próbki przestaje pobudzać agregację mikrocząstek, a w rezultacie ustaje tworzenie sieci cząstek. Obecność substancji badanej w próbce zmniejsza wzrost absorbancji proporcjonalnie do jej stężenia w próbce. Zawartość substancji badanej określana jest względem wartości uzyskanej dla znanego, równego wartości odcięcia, stężenia tej substancji. 2016-12, V 6.0 Polski SD jest na pozycji A, MP jest na pozycji B, a AB jest na pozycji C. Kolejność pipetowania Analizator COBAS INTEGRA 400 plus R1 = AB R2 = SD R3 (SR) = MP Analizator COBAS INTEGRA 800 R1 = SD R2 = MP R3 (SR) = AB Zalecenia i środki ostrożności Należy przestrzegać wszelkich zaleceń oraz środków ostrożności zawartych w rozdziale 1, "Wstęp". Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie Postępowanie z odczynnikami Analizator COBAS INTEGRA 400 plus Wszystkie nowe (nie przekłute) kasety cobas c pack przed umieszczeniem w analizatorze należy wymieszać w mieszalniku do kaset przez 1 minutę. Wszystkie używane kasety cobas c pack muszą być wymieszane w ten sam sposób na początku każdego tygodnia (raz w tygodniu). Analizator COBAS INTEGRA 800 Gotowy do użycia. Po przekłuciu kasety cobas c pack analizator automatycznie miesza odczynnik przez 1 minutę i przez pół minuty w trybie rozpoczęcia dnia pracy. Przechowywanie i trwałość Czas przechowywania w temp. 2‑8 °C Do daty ważności na etykiecie cobas c pack Analizator COBAS INTEGRA 400 plus W analizatorze w temperaturze 10‑15 °C 55 dni Analizator COBAS INTEGRA 800 W analizatorze w temp. 8 °C 56 dni Nie zamrażać odczynników. Zamrożone odczynniki należy wyrzucić. Pobieranie i przygotowanie materiału Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów biologicznych wymienionych poniżej. Mocz: Mocz należy pobierać do czystych pojemników z ciemnego szkła lub nieprzezroczystych pojemników plastikowych. Świeże próbki moczu nie wymagają specjalnej obróbki, jednak należy zwracać uwagę, aby próbki 1/4 LSD 0020763284122COINV6.0 LSD Abuscreen OnLine Lysergic Acid Diethylamide pobierane za pomocą pipety były wolne od większych zanieczyszczeń. W celu zabezpieczenia LSD w próbkach moczu przed fotodekompozycją, próbki należy przechowywać w miejscu niedostępnym dla światła.1 Próbki należy przechowywać w prawidłowym, fizjologicznym zakresie pH 5‑8. Nie są wymagane żadne dodatki i konserwanty. Zaleca się przechowywanie próbek moczu w temperaturze 2‑8 °C i oznaczanie ich w ciągu 5 dni od momentu pobrania.9 W celu dłuższego przechowywania zaleca się zamrażanie próbek. Próbki bardzo mętne należy odwirować. Zafałszowywanie lub rozcieńczanie próbek powoduje uzyskanie błędnych wyników. W przypadku podejrzenia zafałszowania należy pobrać nową próbkę do oznaczeń. Dla próbek pobieranych zgodnie z obowiązkowymi zaleceniami dla federalnych programów badań na obecność narkotyków Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs.10 Materiały dostarczone w zestawie Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach. Oznaczenie W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora, uwzględniając typ aparatu. Narkotyki i nadużywanie leków Parametry pipetowania R1 65 µL Próbka 27 µL SR 50 µL R2 40 µL Objętość całkowita 182 µL Kalibracja Kalibrator Abuscreen OnLine LSD Calibration/Control Pack LSD Calibrator 0.5 ng/mL (LSDST, ID systemowe 07 3565 5) Tryb kalibracji Punkt odcięcia Powtórzenie kalibracji Zalecane potrójne Częstotliwość kalibracji Analizator COBAS INTEGRA 400 plus: Dla każdej serii oraz co 14 dni, jak również zgodnie z procedurami kontroli jakości Analizator COBAS INTEGRA 800: Dla każdej serii oraz co 7 dni, jak również zgodnie z procedurami kontroli jakości Aplikacja dla moczu Definicja testu COBAS INTEGRA 400 plus* Rodzaj pomiaru Absorbancja Model kalkulacyjny absorbancji Punkt końcowy Rodzaj reakcji R1-S-R2-SR (długi test) Kierunek reakcji Rosnący Początek reakcji SR Długość fali A 800 nm Zakres testu 0-1.9 ng/mL Krzywą kalibracji wyznacza się przy pomocy kalibratora Abuscreen OnLine LSD Calibrator. Krzywa kalibracji zapisywana jest w pamięci analizatora COBAS INTEGRA i wywoływana w trakcie późniejszych analiz. Spójność pomiarowa: Powyższa metoda została wystandaryzowana wobec pierwotnej metody referencyjnej (LC/MS/MS). Uwaga Oznaczenie kalibratora powinno być wykonane w ciągu 2 godz. od umieszczenia go w analizatorze. W wypadku stosowania konfiguracji definicji kalibracji wartość STD1 wynosi 0.000 ABS. Współczynnik rozcieńczenia Brak Kontrola jakości Odczyt pierwszy/ostatni 65/140 Jednostka Abs. Kontrola jakości LSD Positive Control (LSDPC, ID systemowe 07 6534 1) *W systemach COBAS INTEGRA jednostką laboratoryjną jest ABS, współczynnikiem jednostki laboratoryjnej jest 1, przesunięciem jednostki laboratoryjnej jest 0, a pozycją dziesiętną jest 3. LSD Negative Control (LSDNC, ID systemowe 07 6533 3) Parametry pipetowania R1 50 µL R2 66 µL Próbka 28 µL R3 (SR) 40 µL Objętość całkowita 184 µL Definicja testu COBAS INTEGRA 800* Rodzaj pomiaru Absorbancja Model kalkulacyjny absorbancji Punkt końcowy Rodzaj reakcji R1-S-SR-R2 (długi test) Kierunek reakcji Rosnący Początek reakcji R2 Długość fali A 629 nm Zakres testu 0-1.9 ng/mL Współczynnik rozcieńczenia Brak Odczyt pierwszy/ostatni 102/197 Jednostka Abs. *W systemach COBAS INTEGRA jednostką laboratoryjną jest ABS, współczynnikiem jednostki laboratoryjnej jest 1, przesunięciem jednostki laboratoryjnej jest 0, a pozycją dziesiętną jest 3. LSD Abuscreen OnLine LSD Calibration/Control Pack Sekwencja kontroli Definiowana przez użytkownika Kontrola po kalibracji Zalecana Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części "Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni materiał kontrolny. Stężenie środka w kontroli zostało zweryfikowane przez LC/MS/MS lub GC/MS. Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym zakresem. Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi. Uwaga Pomiar kontroli powinien być wykonany w ciągu 2 godz. od umieszczenia ich w analizatorze. Kalibratory i kontrole w zestawie Abuscreen OnLine LSD Calibration/Control Pack stanowią całość i nie można ich wymieniać z butelkami z innych zestawów. W przypadku zniesienia granic kontroli należy pamiętać o ich uaktualnieniu po każdej kalibracji. Należy aktualizować górny zakres LSDPC i dolny zakres LSDNC do wartości absorbancji LSD CAL. Alternatywnie kontrole można oznaczać jak próbki pacjentów. Kontrole powinny zawierać się w zakresie ujemnym lub dodatnim a wynik powinien zostać zapisany. 2/4 2016-12, V 6.0 Polski 0020763284122COINV6.0 LSD Abuscreen OnLine Lysergic Acid Diethylamide Narkotyki i nadużywanie leków Wyniki Systemy COBAS INTEGRA podają wyniki z następującymi znacznikami testów. Flaga COBAS INTEGRA Zakres wartości Brak flagi Ujemny < 0.5 ng/mL Dodatni Dodatni ≥ 0.5 ng/mL Wyniki podawane są w wartościach absorbancji w odniesnieniu do 0.5 ng/mL punktu odcięcia kalibratora. próbki jako dodatnie. Za pomocą metody Abuscreen RIA oznaczono 999 próbek jako ujemne i 1 próbkę jako wstępnie dodatnią (1.03 ng/mL). Wynik próbki, która w oznaczeniach obiema metodami była wstępnie dodatnia, potwierdzono metodą GC/MS (wartość GC/MS = 0.133 ng/mL). 39 próbek moczu, które metodą Abuscreen RIA dały wynik wstępnie dodatni, potwierdzony następnie dla LSD metodą GC/MS, oznaczono również w analizatorach COBAS INTEGRA 700. Wszystkie 39 próbek w teście COBAS INTEGRA LSD dało wynik dodatni w odniesieniu do punktu odcięcia 0.5 ng/mL. RIA Ograniczenia - substancje interferujące Informacje dotyczące substancji badanych na występowanie reakcji krzyżowych w teście znajdują się w części "Szczegółowe dane o teście". Istnieje prawdopodobieństwo, że także inne substancje i/lub czynniki (np. awarie techniczne lub błędy proceduralne) mogą zakłócić przebieg testu i spowodować uzyskanie błędnych wyników. Wynik wstępnie dodatni tego oznaczenia wskazuje na obecność w moczu LSD lub jego metabolitów. Nie oznacza stopnia zatrucia. Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o pacjencie. WYMAGANA CZYNNOŚĆ Programowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorach COBAS INTEGRA obowiązkowe jest stosowanie specjalnych cykli mycia. Dalsze instrukcje oraz najnowsza wersja Dodatkowych Cykli Mycia, zob. ulotka metodyczna odczynnika CLEAN. Tam, gdzie to konieczne, przed podaniem wyników testu należy wprowadzić mający na celu uniknięcie efektu przeniesienia specjalny program dodatkowego cyklu mycia. Analizator COBAS INTEGRA 700 − + 1 1 − 0 998 GC/MS Analizator COBAS INTEGRA 700 + − + 39 0 − 0 0 Swoistość analityczna Swoistość testu COBAS INTEGRA LSD badano drogą wyznaczania krzywych inhibicji dla każdego z wymienionych związków, co pozwoliło każdorazowo oszacować, jaka ich ilość mogłaby zastąpić 0.5 ng/mL LSD przyjętą za wartość odcięcia. Szczegółowe dane o teście Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów COBAS INTEGRA podano poniżej. Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić. Przybliżona ilość mogąca zastąpić 0.5 ng/mL LSD Przybliżony odsetek reakcji krzyżowych. Nor-LSD (N-dezmetylo-LSD) 1.8 28 2-Okso-3-hydroksy-LSD 4.4 11 Izo-LSD 11 4.5 N-(metylo-propylo) amid kwasu lizergowego 16 3.1 Maleinian metysergidu 3191 0.016 Maleinian ergonowiny 12500 0.004 15957 0.003 Związek Precyzja Precyzję wyznaczono przy użyciu próbek kontrolnych LSD w ramach protokołu wewnętrznego, oznaczanych w seriach po 20 powtórzeń raz dziennie przez 5 dni. Otrzymano następujące wyniki przy użyciu analizatora COBAS INTEGRA 700: Powtarzalność + Średnia OS WZ % Poziom 1 0.950 0.02 1.8 Poziom 2 0.900 0.03 3.0 Poziom 3 0.830 0.01 1.7 N-(hydroksy-etylo) amid kwasu lizergowego Średnia OS WZ % 2-Bromo-α-ergokryptyna 29070 0.0017 0.970 0.02 1.7 Winian ergotaminy 32468 0.0015 86207 0.0006 Precyzja pośrednia Poziom 1 Poziom 2 0.900 0.02 2.2 Kwas α-lizergowy Poziom 3 0.830 0.01 1.4 α-Tryptofan 116822 0.0004 Serotonina 211864 0.0002 α-Ergokryptyna 750000 0.00006 Dolny zakres wykrywalności testu 0.134 ng/mL Dolna granica wykrywalności testu COBAS INTEGRA do oznaczania LSD wyznaczono za pomocą wielokrotnego pomiaru 50 próbek 0 ng/mL moczu, które wcześniej uznano za wolne od LSD. Przy pomocy wyników absorbancji wyliczono następującą równowartość ng/mL. Linię regresji liniowej wygenerowano z wartości absorbancji moczu wolnego od LSD, 0.5 ng/mL punktu odcięcia kalibratora LSD i 1 ng/mL kontroli dodatniej LSD. Następnie w celu obliczenia równowartości stężenia LSD do równania podstawiono wartości absorbancji moczu wolnego od LSD. Dolna granica wykrywalności określona została średnią z 50 powtórzeń plus 2 odchylenia standardowe. Dokładność Z laboratorium uzyskano 1000 próbek moczu uznanych za ujemne. Próbki te zbadano na obecność LSD przy użyciu analizatora COBAS INTEGRA 700 oraz metody Abuscreen RIA dla LSD. W analizatorze COBAS INTEGRA 700, 998 próbek zostało oznaczone jako ujemne i 2 2016-12, V 6.0 Polski Interferencje powodowane przez leki Do porcji prawidłowego ludzkiego moczu dodano następujące związki w stężeniu ≥ 50000 ng/mL. Żaden z nich nie dał wyniku dodatniego. Paracetamol Imipramina Kwas acetylosalicylowy Izoproterenol Aminopiryna Ketamina Amitryptylina Lidokaina Amobarbital MDA d-Amfetamina MDMA dl-Amfetamina Melanina l-Amfetamina Meperydyna 3/4 LSD 0020763284122COINV6.0 LSD Abuscreen OnLine Lysergic Acid Diethylamide Ampicylina Metadon Kwas askorbinowy d-Metamfetamina Aspartam l-Metamfetamina Atropina Metakwalon Benzokaina Metylofenidat Benzoloekgonina Metyprylon (metabolit kokainy) Morfina Benzofetamina Nalokson Butabarbital Naltrekson Kofeina Naproksen Podchlorek wapnia Niacynamid Chlorodiazepoksyd Nordiazepam Chlorochina Noretyndron Chlorfeniramina l-Norpseudoefedryna Chloropromazyna Oksazepam Kokaina Penicylina G Kodeina Pentobarbital Dekstrometorfan Fencyklidyna Dekstropropoksyfen β-Fenetylamina Diazepam Fenobarbital Difenhydramina Fenotiazyna Difenylohydantoina Fenylobutazon Dopamina Fenylopropanolamina Doksylamina d-Fenylopropanolamina Ekgonina dl-Fenylopropanolamina Narkotyki i nadużywanie leków 3 Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications 2004. 4 Caldwell J, Sever P. The biochemical pharmacology of abused drugs: Amphetamine, Cocaine, and LSD. Clin Pharmacol Ther 1974;16(4):625-638. 5 Hardman JG, Limbird LE, Gilman A, eds. Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York, NY: McGraw Hill Pub Co. 2001. 6 Boakes RJ, Bradley PB, Briggs I, et al. Antagonism of 5-hydroxytryptamine by LSD-25 in the central nervous system: a possible neuronal basis for the actions of LSD-25. Br J Pharmacol 1970;40(2):202-218. 7 McNally AJ, Goc-Szkutnicka K, Li Z, et al. An OnLine immunoassay for LSD: comparison with GC-MS and the Abuscreen RIA. J Anal Toxicol 1996;20(6):404-408. 8 Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993 Nov;38(6):1326-41. 9 Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27:33. 10 Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73:71858-71907. W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego, oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa się. Symbole Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche Diagnostics używa następujących symboli i znaków. Zawartość zestawu Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu Globalny handlowy numer identyfikacyjny GTIN Ester metyloekgoniny Prokaina Efedryna Prometazyna Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie. d-Efedryna d-Pseudoefedryna © 2016, Roche Diagnostics l-Efedryna l-Pseudoefedryna Epinefryna Chinidyna Erytromycyna Chinina Estriol Sekobarbital Fenoprofen Sulindak Furosemid Tetracyklina Kwas gentyzynowy Kwas Δ9 THC-9-karboksylowy Glutetymid Tetrahydrozolina Eter gwajakologlicerolowy Trifluoperazyna Hydrochlorotiazyd Tyramina p-Hydroksyamfetamina Werapamil Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Dystrybucka w USA: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN US Customer Technical Support 1-800-428-2336 Ibuprofen Jakakolwiek modyfikacja ustawień analizatora wymaga walidacji przez laboratorium. Literatura 1 Reuschel SA, Eades D, Foltz RL. Recent advances in chromatographic and mass spectrometric methods for determination of LSD and its metabolites in physiological specimens. J Chromatogr B Biomed Sci Appl 1999;733(1-2):145-159. 2 Poch GK, Klette KL, Hallare DA, et al. Detection of metabolites of lysergic acid diethylamide (LSD) in human urine specimens: 2-oxo-3-hydroxy-LSD, a prevalent metabolite of LSD. J Chromatogr B Biomed Sci Appl 1999;724(1):23-33. LSD 4/4 2016-12, V 6.0 Polski