Metodyka - Alpha Diagnostics Sp. z oo

HDL-CHOLESTEROL
Odczynnik Strącający
Nr. kat.
150000
150001
Wielkość opakowania
2 x 100 mL + standard
2 x 250 mL + standard
PORCEDURA BADANIA
- Wytrącanie
Odmierzyć do mikrotubek
METODA
Strąceniowa, z kwasem fosforowolframowym.
ZASADA METODY
Frakcje o niskiej gęstości LDL i bardzo niskiej (VLDL) są
wytrącane przy użyciu kwasu fosorowolframowego i
jonów magnezu. Po odwirowaniu, w nadsączu pozostaje
jedynie frakcja HDL, którą oznacza się odczynnikiem do
oznaczania stężenia cholesterolu metodą enzymatyczną.
SKŁAD ODCZYNNIKA
Odczynnik R1:
Kwas fosforowolframowy
Chlorek magnezu
Standard
0,55 mmol/L
25 mmol/L
50 mg/dl
Dodatkowy odczynnik (wymagany, lecz nie
dostarczony):
Odczynnik do oznaczania CHOLESTEROLU
OSTRZEŻENIA
- Tylko do diagnostyki in vitro.
- Unikać zanieczyszczenia stosując czysty sprzęt
laboratoryjny (końcówki pipet, kuwety...).
Próbka
250 μl
Odczynnik strącający
500 μl
Dokładnie wymieszać. Inkubować 10 min w
temperaturze pokojowej. Wirować 10 minut z prędkością
4000 rpm lub 2 minuty w 10000 rpm.
Najdalej w ciągu 1 godziny oddzielić od osadu
przejrzysty supernatant, w którym oznaczyć stężenie
HDL zestawem do oznaczania cholesterolu.
- Oznaczanie Cholesterolu HDL
Długość fali
546 nm Hg (500 nm)
Kuweta
1 cm
Temperatura
20 - 37 ºC
Pomiar
względem próby ślepej
Odmierzyć do
Próba ślepa Standard Próbka
kuwet
Woda destylow.
100 μl
Standard
100 μl
Supernatant
100 μl
Odczynnik do
1000 μl
1000 μl
1000 μl
Cholesterolu
Dokładnie wymieszać. Inkubować 5 min w temperaturze
37 ºC lub 10 min w temperaturze pokojowej. Zmierzyć
absorbancję standardu i próbki względem próby ślepej.
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKA
Odczynnik R1 jest gotowy do użycia.
KALKULACJA
Wyniki obliczyć według następującej formuły:
Standard jest gotowy do użycia: Użyć bezpośrednio do
wykonania kalibracji.
Nie wykonywać wytrącania!!!
HDL Cholesterol =
(mg/dL)
STABILNOŚĆ I PRZECHOWYWANIE
Odczynnik i standard przechowywane w temp. 2-8ºC i
chronione przed światłem są stabilne do daty ważności
umieszczonej na nalepce.
POBIERANIE I PRZECHOWYWANIE MATERIAŁU
Próbki: Surowica wolna od hemolizy, osocze
heparynowe lub EDTA.
OCZEKIWANE WARTOŚCI
prawidłowe
standardowe
ryzyko
M
>55 mg/dL
35-55mg/dL
>0,55 g/L
0,35-0,55g/L
>1,4 mmol/L
0,9-1,4mmol/L
K
>65 mg/dL
45-65mg/dL
>0,65 g/L
0,45-0,65g/L
>1,7 mmol/L
1,2-1,7mmol/L
niebezpieczne
ryzyko
<35 mg/dL
<0,35 g/L
<0,9mol/L
<45 mg/dL
<0,45 g/L
<1,2mol/L
Uwaga: Zalecane jest, aby każde laboratorium ustaliło i
wyznaczyło własny zakres wartości referencyjnych. Podane
wartości są tylko wskazówką.
∆ Abs. próbki
x 50 x 3
∆ Abs. standardu
50 – stężenie standardu
3 – współczynnik rozcieńczenia próbki
KALIBRACJA & KONTROLA JAKOŚCI
Są konieczne. Do wykonania kalibracji należy użyć
standardu HDL znajdującego się w zestawie a kontrolę
wykonać na materiale kontrolnym normalnym i
patologicznym Alpha Diagnostics.
CHARAKTERYSTYKA TESTU (37°C)
- Liniowość
Odnieść się do danych zastosowanych dla Odczynnika
Cholesterolu.
- Czułość analityczna
Odnieść się do danych zastosowanych dla Odczynnika
Cholesterolu.
- Precyzja (n = 20)
W serii
Średnia
(U/L)
Próbka 1
15,3
Próbka 2
27,8
Próbka 3
22,6
Próbka 1
15,0
SD (U/L)
CV (%)
0,22
0,19
0,3
1,44
0,67
1,44
0,08
0,54
09/2012
Strona 1 z 2
HDL-CHOLESTEROL
Odczynnik Strącający
- Dokładność
Badania porównawcze zostały przeprowadzone pomiędzy
odczynnikiem Greiner a innym dostępnym na rynku na
31próbkach surowicy ludzkiej. Parametry krzywej regresji
są następujące:
y = 1,060 x – 0,328 mg/dL
r = 0,998
INTERFERENCJE
Należy odnieść się do literatury.
PIŚMIENNICTWO
SYMBOLE GRAFICZNE NA ETYKIETACH:
- zawartość
- numer katalogowy
- przed użyciem zapoznać się z instrukcją
- wyrób do diagnostyki in vitro
- temperatura przechowywania
- producent
- numer serii
- data ważności
UWAGA. Zapoznaj się z instrukcją użycia zestawu.
Dystrybutor:
Alpha Diagnostics Sp. z o.o.
ul. Stępińska 22/30, 00 -739 Warszawa
Tel. (22) 631 40 13; fax (22) 632 42 11
Magazyn; Produkcja; Kontrola Jakości; Serwis
ul. Stępińska 22/30, 00 -739 Warszawa
Tel. (22) 631 42 27; fax (22) 631 48 23
e-mail: [email protected]
www.alphadiag.com.pl
Data sporządzenia: PL 06.02.2013
Data aktualizacji: 17.10.2013
09/2012
Strona 2 z 2