Biochemia
Transkrypt
Biochemia
Edward Bańkowski H 3 2 1 4 N N H H H H N 8 N 5 6 7 Biochemia H Podręcznik dla studentów studiów licencjackich i magisterskich Wrocław 2006 Spis treści Słowo wstępne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Redakcja i korekta: Stanis³awa Trela Projekt ok³adki: Andrzej Moczyd³owski Opracowanie typograficzne: Agnieszka Gutkowska Wykonanie rycin i wzorów: Jolanta Mikiciuk Opracowanie skorowidza: Monika Jacyszyn Dzie³o w ca³oœci jest chronione prawem autorskim. ¯adna z czêœci tej ksi¹¿ki nie mo¿e byæ w jakiejkolwiek formie publikowana bez uprzedniej zgody Wydawnictwa. Dotyczy to równie¿ sporz¹dzania fotokopii, mikrofilmów, t³umaczenia oraz przenoszenia danych do systemów komputerowych. ISBN-10: 83-60466-08-4 ISBN-13: 978-83-60466-08-7 © 2006 Copyright by MedPharm Polska Wydawnictwo MedPharm Polska Sp. z o.o. ul. Powstañców Œl¹skich 28–30 53-333 Wroc³aw www.medpharm.pl Przygotowanie do druku: Pracownia Sk³adu Komputerowego TYPO-GRAF Druk i oprawa: Wroc³awska Drukarnia Naukowa PAN im. S. Kulczyñskiego Sp. z o.o. 1 Właściwości materii ożywionej 1 2 Aminokwasy, peptydy i białka 3 ROZDZIAŁ ROZDZIAŁ 2.1 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4 2.1.5 2.1.6 2.1.7 2.1.8 2.1.9 2.2 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.3 2.3.1 2.4 2.4.1 2.4.2 2.4.3 2.5 2.5.1 2.5.2 2.6 2.7 2.8 2.9 2.9.1 2.9.2 2.10 Aminokwasy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura i systematyka aminokwasów białkowych . . . . . . . . . . . . . Aminokwasy rzadko występujące w białkach . . . . . . . . . . . . . . . . . Symbolika aminokwasów białkowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aminokwasy niebiałkowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Właściwości optyczne aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Amfoteryczne właściwości aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Równanie Hendersona-Hasselbalcha . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Właściwości buforujące aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biologiczne znaczenie aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Peptydy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wiązanie peptydowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Nazewnictwo peptydów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Peptydy pełniące funkcje biologiczne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Białka . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura pierwszorzędowa białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura drugorzędowa białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . α-Helisa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura β . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktury niepowtarzalne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura trzeciorzędowa białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wiązania stabilizujące strukturę trzeciorzędową . . . . . . . . . . . . . . . Przykłady struktur trzeciorzędowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Struktura czwartorzędowa białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Denaturacja białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Właściwości białek w roztworach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Izolacja białka z materiału biologicznego . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Ekstrakcja białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Oczyszczanie białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Funkcje biologiczne białek . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XV 3 3 7 8 9 9 10 10 11 13 14 14 16 17 19 20 24 24 26 26 27 27 29 29 30 31 32 33 33 35 VI 3.1 3.2 3.3 3.4 3.4.1 3.4.2 3.4.3 3.4.4 3.4.5 3.4.6 3.4.7 3.5 3.6 3.7 3.7.1 3.7.2 3.7.3 3.8 3.9 3.9.1 3.9.2 3.9.3 3.10 3.11 3.11.1 3.11.2 3.11.3 3.11.4 3.11.5 3.11.6 3.11.7 3.12 3.13 3.14 3.15 3.16 3.17 4 Spis treści ROZDZIAŁ 4.2 4.2.1 4.2.2 4.3 4.3.1 4.3.2 4.3.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.7.1 4.7.2 4.7.3 Enzymy i metabolizm 37 Procesy kataboliczne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Procesy anaboliczne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Ogólne informacje o enzymach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wspólne cechy reakcji enzymatycznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Niezmienność stałej równowagi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Zmiany energii swobodnej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Addytywność zmian energii swobodnej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Enzym obniża energię aktywacji . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Enzym nadaje reakcji jeden z możliwych kierunków . . . . . . . . . . . . Miejsce (centrum) aktywne enzymu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Enzym tworzy kompleks z substratem . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Znaczenie kompleksu – enzym : substrat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Mechanizm biokatalizy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Prędkość (szybkość) reakcji enzymatycznej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wpływ temperatury i pH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wpływ stężenia substratu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wpływ efektorów allosterycznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aktywność enzymu i sposób jej wyrażania . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inhibicja enzymów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inhibitory kompetycyjne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inhibitory niekompetycyjne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inhibicja mieszana . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Praktyczne znaczenie inhibitorów enzymatycznych . . . . . . . . . . . . . Regulacja aktywności enzymatycznej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aktywacja proteolityczna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja poprzez wiązanie i odłączanie białek regulacyjnych . . . . . . Regulacja poprzez fosforylację i defosforylację białka enzymatycznego Regulacja allosteryczna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja przez naturalne inhibitory . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja poprzez sprzężenie zwrotne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja poprzez tworzenie kompleksów wieloenzymatycznych . . Swoistość enzymów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Koenzymy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Izoenzymy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Systematyka enzymów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Międzynarodowy kod enzymatyczny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Zastosowanie enzymów w praktyce . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 37 38 39 39 39 41 42 42 43 44 45 46 46 47 47 50 50 51 51 52 53 54 55 55 56 57 57 57 58 58 58 59 61 63 66 66 Wytwarzanie energii w komórce 69 4.1 4.1.1 4.1.2 4.1.3 Przekazywanie energii . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rola wspólnych pośredników . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Związki fosforanowe o wysokiej energii . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inne związki bogate w energię . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70 70 72 73 5 ROZDZIAŁ Mitochondrium . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Błony mitochondrialne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Macierz mitochondrialna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Organizacja łańcucha transportu protonów i elektronów . . . . . . . . Elementy składowe łańcucha transportu elektronów . . . . . . . . . . . . Kompleksy oddechowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Inhibitory transportu elektronów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wyzwalanie energii podczas transportu elektronów . . . . . . . . . . . . Fosforylacja oksydacyjna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Utlenianie substratów niezależne od łańcucha oddechowego . . . . . Reaktywne formy tlenu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Hemoglobina i mioglobina generują RFT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Łańcuch oddechowy – źródłem RFT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biologiczne efekty działania RFT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74 74 75 76 76 79 80 80 81 82 83 84 84 85 Cukry proste. Budowa i metabolizm 87 5.1 5.1.1 5.1.2 5.2 5.3 5.3.1 5.3.2 5.3.3 5.3.4 5.4 5.4.1 5.4.2 5.5 5.6 5.6.1 5.6.2 5.6.3 5.7 5.8 5.8.1 5.8.2 5.8.3 5.8.4 5.9 5.9.1 5.9.2 5.9.3 5.9.4 Klasyfikacja i nazewnictwo cukrów prostych . . . . . . . . . . . . . . . . . . Monosacharydy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Izomeria monosacharydów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Utlenianie i redukcja cukrów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Glikoliza tlenowa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Faza zużywająca energię . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Faza generująca energię . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans energetyczny glikolizy tlenowej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja glikolizy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Glikoliza beztlenowa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przebieg glikolizy beztlenowej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans energetyczny glikolizy beztlenowej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Metaboliczne losy pirogronianu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Cykl kwasów trikarboksylowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Reakcje cyklu kwasów trikarboksylowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans cyklu kwasów trikarboksylowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja cyklu kwasów trikarboksylowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans energetyczny utleniania glukozy do CO2 i H2O . . . . . . . . . . . Glukoneogeneza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Reakcje glukoneogenezy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Substraty zużywane w glukoneogenezie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans glukoneogenezy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja glukoneogenezy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Szlak pentozofosforanowy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Faza oksydacyjna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Faza nieoksydacyjna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bilans szlaku pentozofosforanowego . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Funkcje NADPH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87 87 89 91 92 92 95 98 98 99 99 100 100 102 103 106 107 108 108 108 112 113 113 113 114 116 119 120 Spis treści 3 ROZDZIAŁ VII VIII IX 6 ROZDZIAŁ 7 Disacharydy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Budowa i powstawanie disacharydów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład disacharydów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Polisacharydy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Skrobia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Celuloza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Glikogen – budowa i funkcja . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza glikogenu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład glikogenu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Regulacja biosyntezy i rozkładu glikogenu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Choroby spichrzania glikogenu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 129 129 130 132 132 133 134 135 137 139 142 Lipidy. Budowa i metabolizm 145 7.1 7.2 7.2.1 7.2.2 7.3 7.3.1 7.3.2 Spis treści 121 121 122 122 122 122 123 125 125 126 127 128 7.5.2 7.5.3 7.6 7.6.1 7.6.2 7.7 7.7.1 7.7.2 7.8 7.8.1 7.8.2 7.8.3 7.8.4 7.9 7.9.1 7.9.2 7.9.3 7.10 7.10.1 7.10.2 Disacharydy i polisacharydy. Budowa i metabolizm 129 6.1 6.1.1 6.1.2 6.2 6.2.1 6.2.2 6.2.3 6.2.4 6.2.5 6.2.6 6.2.7 ROZDZIAŁ Metabolizm fruktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Włączanie fruktozy do glikolizy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Zaburzenia przemiany fruktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Metabolizm galaktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Powstawanie galaktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przetwarzanie galaktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Zaburzenia przemiany galaktozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Pochodne cukrów prostych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Glikozydy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Kwasy uronowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Kwas askorbinowy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aminoheksozy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7.3.3 7.3.4 7.4 7.5 7.5.1 Kwasy tłuszczowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Acyloglicerole . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Trawienie acylogliceroli pokarmowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład triacylogliceroli w komórkach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Utlenienie kwasów tłuszczowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . β-oksydacja nasyconych kwasów tłuszczowych o parzystej liczbie atomów węgla . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . β-oksydacja nasyconych kwasów tłuszczowych o nieparzystej liczbie atomów węgla . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . β-oksydacja kwasów tłuszczowych nienasyconych . . . . . . . . . . . . . ω-oksydacja kwasów tłuszczowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Utleniane glicerolu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza kwasów tłuszczowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przemieszczanie reszt acetylowych z mitochondrium do cytosolu . . 145 147 148 150 150 152 154 155 155 156 157 157 8 ROZDZIAŁ Karboksylacja acetylo~S-CoA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Powstawanie łańcucha kwasu tłuszczowego . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza triacylogliceroli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Powstawanie glicerolo-3-fosforanu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Estryfikacja glicerolu kwasami tłuszczowymi . . . . . . . . . . . . . . . . . . Ciała ketonowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza ciał ketonowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład ciał ketonowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Budowa i metabolizm fosfolipidów i sfingomielin . . . . . . . . . . . . . . . Glicerofosfolipidy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Sfingomieliny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza glicerofosfolipidów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład glicerofosfolipidów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Budowa i metabolizm steroidów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Budowa cholesterolu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza cholesterolu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przetwarzanie i wydalanie cholesterolu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Kwasy żółciowe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza kwasów żółciowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przekształcanie kwasów żółciowych przez bakterie jelitowe . . . . . . 158 159 164 164 165 166 167 169 169 172 173 174 177 178 178 179 183 183 184 184 Metabolizm aminokwasów 187 8.1 8.1.1 8.1.2 8.1.3 8.1.4 8.2 8.2.1 8.2.2 8.3 8.3.1 8.3.2 8.4 8.4.1 8.4.2 8.4.3 8.5 8.5.1 8.5.2 8.5.3 8.5.4 8.5.5 8.5.6 Źródła metaboliczne wolnych aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład białek pokarmowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład białek wewnątrzkomórkowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rozkład białek pozakomórkowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Biosynteza aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Metabolizm grup aminowych aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . Transaminacja . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Deaminacja . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Detoksykacja amoniaku . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Cykl mocznikowy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Wiązanie amoniaku przez glutaminian . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Metabolizm energetyczny szkieletów węglowodorowych aminokwasów . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przemiana aminokwasów glukogennych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przemiana aminokwasów ketogennych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Przemiana aminokwasów glukoketogennych . . . . . . . . . . . . . . . . . . Aminokwasy źródłem związków biologicznie czynnych . . . . . . . . . Z aminokwasów powstają aktywne fragmenty jednowęglowe . . . . . Z tyrozyny powstają hormony i neuroprzekaźniki . . . . . . . . . . . . . . Z tyrozyny powstają melaniny . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Z tryptofanu powstaje kwas nikotynowy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Cysteina przekształca się w taurynę . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Siarka cysteiny utlenia się do siarczanu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 187 189 189 191 192 193 193 195 196 196 200 201 202 202 203 205 206 206 207 208 209 209 Spis treści 5.10 5.10.1 5.10.2 5.11 5.11.1 5.11.2 5.11.3 5.12 5.12.1 5.12.2 5.12.3 5.12.4