Wybrane parametry układu immunologicznego we krwi

Perinatologia, Neonatologia i Ginekologia, tom 3, zeszyt 1, 58-62, 2010
Wybrane parametry układu immunologicznego we krwi
pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie
BARBARA KRÓLAK-OLEJNIK1, BOŻENA ECHOLC2,
BOGDAN MAZUR2, JUSTYNA NOWAKOWSKA3
Streszczenie
Celem pracy było ustalenie, w jakim stopniu czas i sposób rozwiązania ciąży wywołuje zmiany odsetka i liczby limfocytów CD3+ i ich
subpopulacji CD4+, CD8+, CD25+, limfocytów CD19+ i ich subpopulacji CD5+, CD23+ oraz komórek NK. Przebadano 65 noworodków
zdrowych urodzonych w latach 1998-2003 w Klinice Perinatologii i Ginekologii Śląskiej Akademii Medycznej w Zabrzu. Uwzględniając
czas trwania ciąży oraz sposób jej rozwiązania, podzielono dzieci na następujące grupy. Grupa 32 noworodków urodzonych przedwcześnie, w tym: (II a) 6 noworodków urodzonych siłami natury, (II b) 26 noworodków urodzonych cięciem cesarskim, w tym (II be)
18 ze wskazań elektywnych, (II bn) 8 ze wskazań nagłych. 33 noworodki urodzone o czasie stanowiły grupę kontrolną. Stwierdzono
istotnie statystycznie wyższy średni odsetek limfocytów CD8+ i komórek NK u noworodków urodzonych przedwcześnie siłami natury
w porównaniu z noworodkami urodzonymi przedwcześnie cięciem cesarskim.Wykazano istotnie statystycznie niższą średnią liczbę
limfocytów CD3+, CD4+ i CD25+ u noworodków urodzonych przedwcześnie elektywnym cięciem cesarskim w porównaniu z noworodkami urodzonymi przedwcześnie drogą cięcia cesarskiego ze wskazań nagłych. U noworodków urodzonych przedwcześnie średni
odsetek limfocytów T cytotoksyczno-supresorowych i komórek NK może wykazywać zależność od sposobu rozwiązania ciąży
u ich matek. Cięcie cesarskie wykonane u matki z nagłych wskazań może wiązać się ze zwiększeniem średniej liczby limfocytów
T, limfocytów T pomocniczych, limfocytów T aktywowanych u jej noworodka urodzonego przedwcześnie.
Słowa kluczowe: noworodek, krew pępowinowa, ciąża, limfocyty T, limfocyty B
Wstęp
Materiał i metody
Różnorodne perinatalne czynniki związane z niefizjologicznym przebiegiem ciąży i porodu u matki oraz morfologiczna niedojrzałość mogą zaburzać adaptację noworodka
do życia pozamacicznego. Wśród tych czynników dominują problemy związane z ekonomiczną sytuacją matki
(głównie niedożywienie, nadużywanie alkoholu, tytoniu
lub narkotyków), z jej ogólnym stanem zdrowia przed zajściem w ciążę (cukrzyca, kolagenozy, niedokrwistość, choroby zakaźne i odzwierzęce) oraz w czasie ciąży (głównie
nadciśnienie i krwawienia) [1, 2]. Powikłania związane
z nieprawidłowym przebiegiem porodu zwłaszcza poród
przedwczesny lub operacje położnicze takie jak cięcie cesarskie mają istotne znaczenie dla procesów adaptacyjnych noworodka. Poród przedwczesny należy do najistotniejszych problemów współczesnej perinatologii. W Polsce
ich odsetek wynosi około 7-8% ogólnej liczby porodów
i jest przyczyną znacznej zachorowalności i umieralności
okołoporodowej noworodków [3]. Głównym czynnikiem
wyzwalającym poród przedwczesny jest zakażenie. Celem
pracy było ustalenie, w jakim stopniu czas i sposób rozwiązania ciąży wywołuje zmiany odsetka i liczby limfocytów
CD3+ i ich subpopulacji CD4+, CD8+, CD25+, limfocytów
CD19+ i ich subpopulacji CD5+, CD23+ oraz komórek NK.
Przebadano 65 noworodków zdrowych urodzonych
w latach 1998-2003 w Klinice Perinatologii i Ginekologii Śląskiej Akademii Medycznej w Zabrzu. Uwzględniając czas
trwania ciąży oraz sposób jej rozwiązania, podzielono
dzieci na następujące grupy:
Grupa I – 33 noworodki urodzone o czasie, w tym:
• I a – 10 noworodków urodzonych siłami natury;
• I b – 23 noworodki urodzone cięciem cesarskim,
w tym:
– I be – 15 ze wskazań elektywnych,
– I bn – 8 ze wskazań nagłych,
Grupa II – 32 noworodki urodzone przedwcześnie,
w tym:
• II a – 6 noworodków urodzonych siłami natury;
• II b – 26 noworodków urodzonych cięciem cesarskim, w tym:
– II be – 18 ze wskazań elektywnych,
– II bn – 8 ze wskazań nagłych.
Ocenę stopnia dojrzałości noworodka przeprowadzono w pierwszych 12. godzinach życia w oparciu o skalę
Ballard uwzględniającą kryteria morfologiczne i neurologiczne [4] oraz siatki centylowe opracowane dla noworodków śląskich [5].
1
Katedra i Oddział Kliniczny Ginekologii, Perinatologii i Neonatologii, Śląski Uniwersytet Medyczny w Katowicach
2
Katedra i Zakład Mikrobiologii i Immunologii, Śląski Uniwersytet Medyczny w Katowicach
3
Studium Doktoranckie w Zabrzu, Śląski Uniwersytet Medyczny w Katowicach
Wybrane parametry układu immunologicznego we krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie
•
•
•
•
•
Badania immunologiczne obejmowały jednorazową
ocenę w krwi pępowinowej odsetka i liczby limfocytów
CD3+ i ich subpopulacji CD4+, CD8+, CD25+ oraz stosunku
CD4+/CD8+, limfocytów CD19+ i ich subpopulacji CD5+,
CD23+ oraz komórek NK.
W badaniach zastosowano metodę znakowania krwi
pępowinowej z następczą lizą krwinek czerwonych. Krew
pępowinową pobieraną w ilości 1 ml opracowywano do 4
godzin od jej pobrania. Krew pępowinową inkubowano
przez 30 minut z odpowiednimi przeciwciałami monoklonalnymi firmy Becton-Dickinson sprzężonymi z fluorochromami: izotiocyjaninem fluoresceiny (FITC), fikoerytyną
(PE) oraz PerCP-em, a następnie przez 10 minut z płynem
lizującym FACSLysis (Becton-Dickinson) w celu usunięcia
erytrocytów. Po dwukrotnym przepłukaniu buforem PBS,
znakowane komórki wprowadzono do cytometru przepływowego FACScan firmy Becton-Dickinson, rejestrując
10 000 przepływających komórek. Analizę parametrów
morfologicznych i fluorescencji badanych komórek przeprowadzono przy użyciu programu komputerowego Cell
Quest. Oznaczenia przeprowadzono w Pracowni Immunologii Śląskiego Centrum Pediatrii w Zabrzu.
Wyniki badań podano w % i G/l.
Wyniki
W pracy analizowano wartości badanych wskaźników
immunologicznych u noworodków urodzonych przedwcześnie w zależności od sposobu ukończenia ciąży u ich
matek. Porównanie między noworodkami urodzonymi
przedwcześnie siłami natury a urodzonymi cięciem cesarskim wykazało, że noworodki urodzone przedwcześnie siłami natury mają istotnie statystycznie wyższy (p = 0,02580)
36
średnia
średnia ± błąd std
średnia ± odch. std
34
32
30
CD 8 (%)
•
Z badań wyłączono noworodki:
z nieprawidłową m.c. w stosunku do wieku płodowego
(< 10 lub > 90 centyla);
z wrodzonymi wadami rozwojowymi;
matek z przewlekłymi schorzeniami, takimi jak choroby układu endokrynologicznego, cukrzyca, nadciśnienie, przewlekłe stany zapalne;
matek nosicielek wirusa HIV, HBV, HCV;
matek młodocianych (<16. roku życia);
matek nadużywających alkoholu i palących papierosy.
średni odsetek limfocytów CD8+ (26,17 ± 7,78%), w porównaniu ze średnią wartością (19,62 ± 5,79%) u noworodków urodzonych przedwcześnie drogą cięcia cesarskiego (ryc. 1). Odsetek komórek NK w grupie noworodków urodzonych przedwcześnie siłami natury osiągnął
średnią wartość 27,17 ± 12,38% i był istotnie statystycznie
wyższy (p = 0,0003) w porównaniu ze średnią wartością
(11,81 ± 7,07%) w grupie noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim (ryc. 2).
28
26
24
22
20
18
16
14
12
Grupa II a
Grupa II b
Ryc. 1. Porównanie wartości średnich odsetka limfocytów CD8+
we krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie
siłami natury i cięciem cesarskim
45
średnia
średnia ± błąd std
średnia ± odch. std
40
35
30
NK (%)
Kryteria włączenia noworodków do badań:
• noworodki urodzone z prawidłową m.c. w stosunku do
wieku płodowego;
• pochodzące z ciąż o przebiegu prawidłowym;
• noworodki z ciąż o przebiegu prawidłowym, urodzone
przedwcześnie, drogą cięcia cesarskiego ze wskazań
elektywnych (stan po cięciu cesarskim, stan po odpłynięciu płynu owodniowego, stan po leczeniu niepłodności, wskazania okulistyczne);
• noworodki z ciąż o prawidłowym przebiegu, urodzone
przedwcześnie drogą cięcia cesarskiego ze wskazań
nagłych (odklejanie łożyska, nieprawidłowy zapis kardiotokogramu, wypadnięcie pępowiny i części płodu).
59
25
20
15
10
5
0
Grupa II a
Grupa II b
Ryc. 2. Porównanie wartości średnich odsetka komórek NK we
krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie
siłami natury i cięciem cesarskim
Natomiast porównanie między noworodkami urodzonymi przedwcześnie cesarskim cięciem ze wskazań elektywnych a cesarskim cięciem wykonanym z nagłych wskazań wykazało, że średnia liczba limfocytów CD3+ (2,69
± 1,43 G/l) w grupie noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań elektywnych była istotnie statystycznie niższa (p = 0,01) w porównaniu ze średnią wartością (4,92 ± 2,92 G/l) u noworodków urodzonych
przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań nagłych
(ryc. 3). Wykazano, że u noworodków urodzonych przedwcześnie elektywnym cięciem cesarskim średnia liczba
limfocytów CD4+ wynosiła 2,02 ± 1,22 G/l i była istotnie
statystycznie niższa w porównaniu ze średnią wartością
(3,87 ± 2,74 G/l) u noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań nagłych (ryc. 4).
60
B. Królak-Olejnik, B. Echolc, B. Mazur, J. Nowakowska
8
7
Nie stwierdzono istotnych różnic w średnich wartościach
pozostałych parametrów immunologicznych pomiędzy
badanymi grupami.
średnia
średnia ± błąd std
średnia ± odch. std
CD 3 (G/I)
6
5
4
3
2
1
Grupa II be
Grupa II bn
Ryc. 3. Porównanie wartości średnich liczb bezwzględnych
limfocytów CD3+ we krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań elektywnych
i nagłych
7
6
średnia
średnia ± błąd std
średnia ± odch. std
CD 4 (G/l)
5
4
3
2
1
0
Grupa II be
Grupa II bn
Ryc. 4. Porównanie wartości średnich liczb bezwzględnych limfocytów CD4+ we krwi pępowinowej noworodków urodzonych
przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań elektywnych
i nagłych
Natomiast średnia liczba limfocytów CD25+ w grupie
noworodków urodzonych przedwcześnie elektywnym cięciem cesarskim wynosiła 0,41 ± 0,23 G/l i była statystycznie
niższa (p = 0,04) w porównaniu ze średnią wartością
(0,76 ± 0,62 G/l) w grupie noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań nagłych (ryc. 5).
1,6
1,4
średnia
średnia ± błąd std
średnia ± odch. std
CD3/CD 25 (G/l)
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
Grupa II be
Grupa II bn
Ryc. 5. Porównanie wartości średnich liczb bezwzględnych limfocytów CD3+/CD25+ we krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań elektywnych i nagłych
Dyskusja
Odporność noworodka zależy również od wydolności
łożyska, przebiegu ciąży i czasu jej trwania [6]. Powikłania
porodu, sposób rozwiązania ciąży, okołoporodowe czynniki zagrożenia niedotlenieniem lub zakażeniem, zaburzenia wzrastania wewnątrzmacicznego płodu oraz choroby
ogólnoustrojowe matki mogą osłabiać możliwości obronne
noworodka. Dotyczy to przede wszystkim zmian w dystrybucji limfocytów T i B i ich subpopulacji oraz naturalnych
komórek cytotoksycznych. Jest to powodem według Lewisa i Wilsona [7] ciężkiego przebiegu zakażeń ze skłonnością do uogólniania i złego rokowania w przebiegu leczenia.
Pittard i wsp. [8] wykazali, że stres poporodowy, związany
z powikłaniami porodu, obniża ogólną liczbę limfocytów
z markerem CD4+. W badaniach wykazano istotny wzrost
średniej liczby limfocytów CD4+ u noworodków urodzonych przedwcześnie cięciem cesarskim ze wskazań nagłych w stosunku do noworodków urodzonych przedwcześnie elektywnym cięciem cesarskim. Przypuszcza się,
że noworodki urodzone przedwcześnie z porodów niefizjologicznych posiadają zdolność reagowania na czynnik
infekcyjny wzrostem ilościowym subpopulacji CD4+, co
być może chroni je przed wystąpieniem zakażenia, mimo
narażenia na infekcję. Kotiranto-Ainamo i wsp. [9] stwierdzili, że powodem istotnie zmienionej dystrybucji limfocytów T powodującej zmniejszenie liczby limfocytów CD4+
jest gestoza u matki. Natomiast Karpe i wsp. [1] wykazali
u noworodków urodzonych przedwcześnie przez matki
z przedwczesnym odpłynięciem płynu owodniowego i u noworodków urodzonych elektywnym cięciem cesarskim
zwiększenie odsetka limfocytów CD4+.
Limfocyty CD8+ odpowiedzialne są za zdolności cytotoksyczne i supresorowe limfocytów T, umożliwiają reakcję cytolizy komórek uszkodzonych lub zainfekowanych.
Pietruczuk i wsp. [10] wykazali wzrost liczby limfocytów
CD8+ we krwi noworodków eutroficznych urodzonych
przedwcześnie. Autorzy sugerują, że przesunięcie w obrębie limfocytów cytotoksycznych może powodować nadmierną supresję i może być przyczyną wzmożonej tolerancji immunologicznej prowadzącej w konsekwencji do
blokowania prawidłowej reaktywności immunologicznej.
Zdaniem Chabra i wsp. [11] liczba limfocytów CD8+, podobnie jak całkowita liczba krwinek białych i subpopulacji
CD4+, uwarunkowana jest wiekiem płodowym noworodka
urodzonego przedwcześnie, im jest on bardziej niedojrzały, tym posiada mniejszą liczbę tych komórek. Według
Ballow i wsp. [12] liczba komórek CD8+ na niskim poziomie utrzymuje się przez pierwszy miesiąc życia i jest
istotnie mniejsza niż w kolejnych 3-6 miesiącach. Dynamiczne zmiany ilościowe w fenotypie limfocytów T u bar-
Wybrane parametry układu immunologicznego we krwi pępowinowej noworodków urodzonych przedwcześnie
dzo małych wcześniaków rozpoczynają się od 2. miesiąca
życia. Zaobserwowane zmiany wynikają z ilościowych
zmian komórek immunologicznie kompetentnych przebiegających równolegle z procesem ontogenetycznym, jaki ma
miejsce w trzecim trymestrze ciąży u noworodków
donoszonych. W badaniach wykazano wzrost odsetka
limfocytów CD8+ u noworodków urodzonych przedwcześnie siłami natury w porównaniu z noworodkami urodzonymi cięciem cesarskim. Podobne wyniki uzyskała KrólakOlejnik i wsp. [6], badając subpopulacje limfocytów krwi
pępowinowej noworodków urodzonych o czasie. Autorzy
ci odnotowali wzrost odsetka limfocytów CD8+ u noworodków urodzonych siłami natury w stosunku do urodzonych drogą cięcia cesarskiego ze wskazań elektywnych.
Poród naturalny jest czynnikiem aktywującym zmiany
w liczbie i składzie komórek immunokompetentnych, które
nie są obserwowane we krwi pępowinowej noworodków
urodzonych elektywnym cięciem cesarskim. Można przypuszczać, że wzrost odsetka limfocytów we krwi pępowinowej u noworodków urodzonych siłami może być
wynikiem czynników wywołujących poród naturalny.
Badania dotyczące liczby komórek CD25+ u noworodków są nieliczne. Parkman-Newton i wsp. [13] wykazali, że
noworodki urodzone przedwcześnie posiadają od urodzenia kompetentny układ dla IL-2. Zola i wsp. [14] potwierdzili więcej tych komórek u noworodków w wieku od 0-16.
miesiąca życia z ostrym zakażeniem w porównaniu z noworodkami zdrowymi. Według Hodge i wsp. [15] oznaczanie
cząsteczki CD25+ razem z CD69, CD45RA i CD45RO stanowi
najbardziej czuły i specyficzny marker w przebiegu zakażeń u noworodków. Behrendt i wsp. [16] potwierdzili
istotnie większą pulę CD25+ u eutroficznych noworodków
donoszonych w przebiegu posocznicy gronkowcowej
w porównaniu ze zdrowymi noworodkami, wskazując
jednocześnie na przydatność oznaczania tej subpopulacji
w ocenie zmian immunologicznych w przebiegu ciężkiego
zakażenia. Podobne wyniki uzyskali Godula-Stuglik i wsp.
[17], wskazując, że w przebiegu ciężkich zakażeń (posocznica bakteryjna i zapalenie płuc) u noworodków donoszonych zwiększa się liczba limfocytów CD25+. W przeprowadzonych badaniach wykazano istotnie wyższą liczbę limfocytów CD25+ u noworodków urodzonych przedwcześnie
cięciem cesarskim ze wskazań nagłych. Obserwacje te potwierdzają, że samo zagrożenie perinatalne jest ważnym immunomodulatorem układu odpornościowego noworodka.
Stres porodowy, niedotlenienie powodują wzrost stężenia
kortyzolu i beta-endorfin we krwi, co stymuluje mechanizmy
obronne. Wzrost liczby tych limfocytów może być jednym
z ważnych elementów obrony noworodka przed rozwojem
ciężkiego zakażenia.
Komórki NK uważane są za ważny element wrodzonej
odporności, ponieważ nie wymagają specyficznej stymulacji antygenowej i prezentują pierwszą linię obrony immunologicznej. U osób dorosłych zmniejszenie liczby tych
komórek w obwodowej krwi żylnej może świadczyć o nad-
61
miernej aktywacji i intensywnym napływie komórek NK
do tkanek objętych procesem zapalnym. U zdrowych
noworodków odsetek tych komórek jest niższy niż u dzieci starszych i dorosłych. Sancho i wsp. [18] proponują
uwzględnienie dwóch form noworodkowych komórek NK
różniących się odpowiedzią na interleukinę 2. Autorzy ci
wykazali, że populacja naturalnych komórek cytotoksycznych przechodzi dwa kolejne etapy dojrzewania, czego
efektem jest powstanie dwóch linii komórkowych o odmiennej aktywności. Jedna ma wybitnie obniżoną aktywność w porównaniu z komórkami NK osób dorosłych,
natomiast druga posiada właściwości podobne do obserwowanych u ludzi z dojrzałym układem immunologicznym. Obecnie el-Sameea i wsp. [19] uważają oznaczanie
cytotoksyczności komórek NK za ważny marker diagnostyczny wczesnego zakażenia, bardziej czuły i specyficzny
od oznaczanego białka C-reaktywnego i IL-8. W badaniach
własnych wykazano istotnie wyższy odsetek komórek NK
u noworodków urodzonych przedwcześnie siłami natury
w porównaniu z noworodkami urodzonymi cięciem cesarskim. Mazur i wsp. [20] stwierdzili, że choroby nieinfekcyjne matki, powikłania ciąży oraz cięcie cesarskie wykonane
w znieczuleniu ogólnym zwiększają odsetek i liczbę komórek NK we krwi żylnej chorego noworodka. Stan zdrowia
matki ma istotny wpływ na czynność układu immunologicznego. Również Mazur i wsp. [21] sprawdzali, czy czynniki ryzyka wynikające z przebiegu ciąży i porodu wpływają na odsetek i liczbę komórek NK we krwi pępowinowej. Wykazali najniższe wartości odsetka i liczby komórek
NK u noworodków urodzonych przedwcześnie drogą
cięcia cesarskiego.
Wnioski
1) U noworodków urodzonych przedwcześnie średni odsetek limfocytów T cytotoksyczno-supresorowych i komórek NK może wykazywać zależność od sposobu
rozwiązania ciąży.
2) Cięcie cesarskie wykonane u matki z nagłych wskazań
może wiązać się ze zwiększeniem średniej liczby limfocytów T, limfocytów T pomocniczych, limfocytów T
aktywowanych u noworodka urodzonego przedwcześnie.
Piśmiennictwo
[1] Karpe J., Behrendt J., Mazur B. i wsp. (2005) Wpływ perina-
talnych czynników ryzyka na limfocyty B (CD19+) i T (CD3+)
oraz subpopulacji CD4+, CD8+ i HLA-DR+ u zdrowych donoszonych noworodków. Post. Neonatol. 1 (7): 72-76.
[2] Bręborowicz G.H. (2000) Ciąża wysokiego ryzyka. Poznań,
Ośrodek Wydawnictw Naukowych.
[3] Zaręba-Szczudlik, Romejko E., Ahmed S. (2006) Poród przedwczesny – poród siłami natury czy cięcie cesarskie? Ginekol. Pol. 77: suppl. II: 229-236.
[4] Gomella T.L. (1993) Neonatologia. Katowice: Śląska Akademia Medyczna.
62
B. Królak-Olejnik, B. Echolc, B. Mazur, J. Nowakowska
[5] Baumert M., Osuch-Jaczewska R., Paprotny M. (1993) Wskaź-
niki biologicznego rozwoju noworodków śląskich urodzonych między 30 a 42 tygodniem ciąży. Wiad. Lek. 66: 123-126.
[6] Królak–Olejnik B., Mazur B. (2000) Sposób i czas rozwiązania
ciąży a subpopulacje limfocytów krwi pępowinowej noworodków. Gin. Pol. 71 (9): 566-570.
[7] Lewis D.B., Wilson Ch.B. (2001) Developmental Immunology
and Role of Host Defenses in Fetal and Neonatal Susceptibility to Infection [W:] Infectious Diseases of the Fetus and
Newborn Infant (red.) Remington J.S., Klein J.O., W.B. Sanders Comp, wyd. V.
[8] Pittard W.B., Schleich D.M., Geddes K.M., Sorensen R.U.
(1989) Newborn lymphocyte subpopulations: the influence
of labor. Am. J. Obstet. Gynecol. 160 (1): 151-154.
[9] Kotiranta-Ainamo A., Apajasalo M., Pohjavuori M. i wsp.
(1999) Mononuclear cell subpopulations in preterm and full-
term neonates: independent effects of gestational age neonatal infection maternal preclampsia, maternal betamethason
therapy and mode of delivery. Clin. Exp. Immunol. 115:
309-314.
[10] Pietruczuk M., Dąbrowska M., Jaworski S., Wasiluk A. (2000)
Ekspresja receptorów powierzchniowych na limfocytach
kwi pępowinowej wcześniaków. Gin. Pol. 71: 75-84.
[11] Chabra S., Cottrill C., Rayenes M.K. i wsp. (1998) Lymphocyte subsets in cord blood of preterm infants: effect of antenatal steroids. Biol. Neonate 74 (3): 200-207.
[12] Ballow M., Cates K.L., Rowe J.C. i wsp. (1987) Peripheral
blood T-cell subpopulations in the very low birth weight
(less than 1500 g) infant. Am. J. Hematol. 24 (1): 85-92.
[13] Parkman-Newton C.A., Borzy M.S., Bakke A.C. (1990) Elevated interleukin-2 production by cord blood mononuclear
cells from premature newborns. J. Clin. Lab. Immunol. 31
(3): 111-114.
[14] Zola H., Ridings J., Elliott S. i wsp. (1998) Interleukin-2 receptor regulation and IL-2 function in the human infant.
Hum. Immunol. 59 (10): 615-624.
[15] Hodge G., Hodge S., Han P., Haslam R. (2004) Multiple leukocyte activation markers to detect neonatal infection. Clin.
Exp. Immunol. 135 (1):125-129.
[16] Behrendt J., Karpe J., Mazur B., Stojewska M. i wsp. (2002)
Zmiany ilościowe CD3+, CD4+, CD8+ i HLA-DR+ oraz komórek CD25+ u eutroficznych noworodków donoszonych z posocznicą gronkowcową. Przegl. Lek. 59: 50-53.
[17] Godula-Stuglik U., Mazur B., Behrendt J. i wsp. (2001) Peripheral blood cells with expression of the interleukin-2 receptor (CD25+) in severely infected full-term neonates. Acta
Pediatr. 90 (7): 819-820.
[18] Sancho L., de la Hera A., Casas J. (1991) Two different matu-
rational stages of natural killer lymphocytes in human newborn infants. J. Pediatr. 119 (3): 446-454.
[19] el-Sameea E.R., Metwally S.S., Mashhour E. i wsp. (2004)
Evolution of natural killer cells as diagnostic markers of
early onset neonatal sepsis: comparison with C-reactive protein and inerleukin-8. Egypt J. Immunol. 11 (1): 91-102.
[20] Mazur B., Godula-Stuglik U., Halkiewicz M., Stojewska M.
(2000) Wpływ zakażeń na liczbę naturalnych komórek cyto-
toksycznych u noworodków donoszonych z perinatalnymi
czynnikami ryzyka. Pediatr. Pol. 6: 482-486.
[21] Georgeson G.D., Szony B.J., Streitman K. i wsp. (2001). Natural killer cell cytotoxicity is deficient in newborn with
sepsis and recurrent infection. Eur. J. Pediatr. 160: 478-482.
J
Barbara Królak-Olejnik
Katedra i Oddział Kliniczny Ginekologii,
Perinatologii i Neonatologii
Śląska Akademia Medyczna
Bytom, ul. Batorego 15
Chosen parameters of immunologic systems in cord blood of premature neonates
The aim of the study was to establish to what degree, time and way of delivery caused changes in percentage and number of CD3
lymphocytes and their subpopulations CD4+, CD8+, CD25+, CD19+ lymphocytes and their subpopulations CD5+, CD23+, and NK cells.
The study included 65 healthy neonates born in the years 1998-2003 at the Perinatology and Gynecology Department of Medical
University of Silesia in Zabrze. Considering the time of pregnancy and the method of delivery, children were divided in the following
groups. Group of 32 neonates born prematurely, which included (II a) 6 neonates born naturally (II b) 26 neonates born by cesarean
section, in which: (II be) 18 were born with elective indications (II bn) 8 with emergency indications. Control group was 33 born in
term neonates. In the current study the cord blood leukocyte staining followed by red cell lysis method was applied. We have found
higher mean percentage of CD8+ lymphocytes and NK cells in the neonates born naturally prematurely in comparison with neonates
born prematurely by cesarean section, which was statistically significant. We have also found statistically significant lower mean
number of CD3+, CD4+ and CD25+ lymphocytes in neonates born with elective cesarean section in comparison with neonates born
prematurely by cesarean section with emergency indications. In the neonates born prematurely the mean percentage of T cytotoxic
and suppressor lymphocytes and NK cells can express a relationship between natural delivery and cesarean section. Cesarean section carried out in mothers due to emergency indications can be related with an increased mean number of T lymphocytes, Th lymphocytes, activated T lymphocytes in a prematurely born neonate.
Key words: neonate, cord blood, pregnancy, T lymphocytes, B lymphocytes