Rola wybranych komórek
Transkrypt
Rola wybranych komórek
I M M U N O L O G I A Rola wybranych komórek w zapaleniu alergicznym Role of some cells in allergic inflammation Summary Asthma is a pathologic condition where an underlying chronic inflammation plays a crucial role. Mast cells have been long recognized as principal cells in the early asthmatic response. In recent years evidence accumulates, that they are also important both in late phase reactions and remodeling. Wide spectrum of inflammatory mediators released by these cells contributes to inflammation enhancement and remodeling induction. Eosinophils, once the only leaders in asthmatic (eosinophilic) inflammation, are now believed to play an important role, but influence seems somehow limited. Recent findings, concerning the role of neutrophils, may suggest that there are two distinct phenotypes in asthma, showing potential new indications for therapeutic modifications. Finally, Th2 lymphocytes are considered main orchestrates of allergic inflammation. Input os several other cell types as well as their interactions is also discussed in this paper. Dr hab. n. med. Andrzej M. Fal - prof. nadzw. Lek. med. Agnieszka Styrc Katedra i Klinika Chorób Wewnêtrznych i Alergologii AM we Wroc³awiu Kierownik: Dr hab. n. med. Bernard Panaszekprof. nadzw. ............................................... Astma jest stanem patologicznym u pod³o¿a którego le¿y proces zapalny. Mastocyty przez d³ugi czas by³y postrzegane jako g³ówne komórki wczesnej odpowiedzi alergicznej. Badania ostatnich lat pokazuj¹, ¿e s¹ one równie¿ zaanga¿owane w fazê póŸn¹ reakcji oraz w proces remodelingu. Szerokie spektrum mediatorów zapalnych uwalnianych przez te komórki prowadzi do nasilenia procesu zapalnego w fazie póŸnej jak i samego remodelingu. Do tej pory wydawa³o siê, ¿e g³ówn¹ komórk¹ zapalenia astmatycznego jest eozynofil. Niedawne doniesienia dotycz¹ce roli neutofili w astmie sugeruj¹, ¿e mamy do czynienia z dwoma odmiennymi fenotypami w tej jednostce, co sugeruje modyfikacje terapii astmy. Ostatecznie limfocyty Th2 s¹ rozwa¿ane jako g³ówny instrument zapalenia alergicznego. W tym artykule zosta³y omówione równie¿ inne komórki tego zapalenia i ich wzajemne oddzia³ywanie. C zêstoœæ wystêpowania chorób atopowych roœnie na ca³ym œwiecie, szacuje siê, ¿e w Polsce cierpi na nie ok. 16% osób doros³ych i 19% dzieci1. Najczêstsz¹ manifestacj¹ kliniczn¹ alergii jest sezonowy alergiczny nie¿yt nosa i spojówek2. Inne postaci alergii to: astma atopowa, ca³oroczny nie¿yt nosa i spojówek, atopowe zapalenie skóry. Patomechanizm chorób alergicznych jest z³o¿ony, wiadomo jednak, ¿e u ich pod³o¿a le¿y tocz¹cy siê w tkankach proces zapalny zapocz¹tkowany przez kontakt z alergenem. Zapalenie alergiczne jest procesem wielokomórkowym, w którym decyduj¹c¹ rolê odgrywaj¹ limfocyty Th2, mastocyty, eozynofile, neutrofile, makrofagi, bazofile i komórki nab³onka. Mastocyty Mastocyty s¹ centralnymi komórkami efektorowymi odpowiedzialnymi za zapocz¹tkowanie reakcji alergicznej3. Lokalizuj¹ siê g³ównie w miejscach, w których organizm ma kontakt ze œrodowiskiem zewnêtrznym, w takich narz¹dach jak skóra, jelita, b³ony œluzowe nosa i spojówek oraz dróg oddechowych, a tak¿e w przestrzeni oko³onaczyniowej3,4. Badania immunohistochemicz- ne pozwoli³y na wyodrêbnienie 2 g³ównych subpopulacji mastocytów. Komórki tuczne tryptazododatnie (MCT) obecne s¹ w b³onie œluzowej oskrzeli, œcianie pêcherzyków p³ucnych, b³onie œluzowej jelit i skórze, podczas gdy komórki tuczne tryptazo- i chymazododatnie (MCTC) zlokalizowane s¹ w oskrzelach, skórze i b³onie podœluzowej jelit4,5. Aktywacja mastocytów mo¿e odbywaæ siê drog¹ IgE-zale¿n¹ i IgE-niezale¿n¹ (przez ró¿ne czynniki dzia³aj¹ce w ich œrodowisku, takie jak sk³adniki dope³niacza, mikroorganizmy i produkty ich rozpadu, chemokiny czy kompleksy immunologiczne). Wczesna faza reakcji alergicznej Droga IgE-zale¿na inicjuje wczesn¹ fazê reakcji alergicznej. Zapocz¹tkowuje j¹ zwi¹zanie cz¹steczki alergenu przez IgE, która ³¹czy siê z mastocytem za pomoc¹ receptora o wysokim powinowactwie do IgE (FcRI) obecnego na powierzchni komórek tucznych4,6. W czasie kilku do kilkudziesiêciu sekund po aktywacji mastocyta dochodzi do uwolnienia preformowanych i syntetyzowanych de novo mediatorów odpowiedzialnych za rozwój reakcji zapalnej. S³owa kluczowe : astma, zapalenie alergiczne, eozynofil, mastocyt, neutrofil, limfocyt Th2 Key words : asthma, allergic inflammation, eosinophil, mast cell, neutrophil, Th2 cell A L E R G I A 4 ( 2 6 ) / 2 0 0 5 11 I M M U N O L O G I A S¹ to magazynowane w ziarnistoœciach mastocytarnych aminy biogenne (histamina), glikozaminoglikany (GAG), proteazy (tryptaza, chymaza, karboksypeptydaza), peroksydaza, czynnik aktywuj¹cy p³ytki (PAF), dysmutaza ponadtlenkowa (SOD) oraz syntetyzowane de novo metabolity kwasu arachidonowego (prostaglandyny, leukotrieny) i szereg prozapalnych cytokin, immunomoduluj¹cych przebieg odpowiedzi alergicznej (TNF , IL-3,-4,-5,-6,-8,-10,-13, CSF, GM-CSF)7,8. Efektem ich dzia³ania jest miêdzy innymi rozszerzenie naczyñ krwionoœnych i zwiêkszenie ich przepuszczalnoœci oraz skurcz miêœni g³adkichreakcje odpowiedzialne za objawy obrzêku naczynioruchowego, pokrzywki, napadu astmy, alergii pokarmowych czy alergicznego nie¿ytu nosa i spojówek. Rola mastocyta w natychmiastowych reakcjach nadwra¿liwoœci jest niekwestionowana. PóŸna faza reakcji alergicznej Przez wiele lat kontrowersje budzi³a natomiast rola tych komórek w procesach póŸnej fazy reakcji alergicznej. Dziœ wiadomo ju¿, ¿e funkcja mastocyta nie ogranicza siê tylko do ostrej reakcji alergicznej. Wydzielane przez mastocyty mediatory pe³ni¹ równie¿ kluczow¹ rolê w zapocz¹tkowaniu przewlek³ego procesu zapalnego, decyduj¹c o sk³adzie nacieku zapalnego oraz nap³ywie innych komórek do miejsca zapalenia10. • Tryptaza np. wykazuje w³aœciwoœci proteolityczne cz¹steczki, trawi¹c elementy zrêbu tkanki ³¹cznej, co wp³ywa na rozprzestrzenianie siê mediatorów i akumulacjê komórek w miejscu objêtym zapaleniem. • Chymaza uczestniczy miêdzy innymi w aktywacji prozapalnej interleukiny 18,9. • Czynnik aktywuj¹cy p³ytki dzia³a chemotaktycznie i aktywuj¹co na neutrofile, eozynofile i monocyty11,12. • Uwalniane przez mastocyt cytokiny (TNF- , IL-4,-5,-13,GM CSF) indukuj¹ ekspresjê cz¹stek adhezyjnych na komórkach œródb³onka naczyñ krwionoœnych, fibroblastach oraz komórkach nab³onka oskrzeli, odpowiadaj¹c za przyleganie do nich komórek zapalnych. • IL-5 zwiêksza ponadto aktywnoœæ chemotaktyczn¹ eozynofilów, jest odpowiedzialna za ich wzrost i ró¿nicowanie siê, a • GM CSF (granulocyte-macrofage colony stimulating factor) opóŸnia apoptozê eozynofilów. • Mastocyty s¹ równie¿ Ÿród³em limfotaksyny, która wywo³uje bezpoœredni efekt chemotaktyczny wobec limfocytów CD4+ oraz wzmaga uwalnianie LTB4, indukuj¹cego rekrutacjê limfocytów CD8+ do miejsc zapalenia13,14. Wspomniana wy¿ej tryptaza ma silne dzia³anie profibrotyczne, stymuluj¹c proliferacjê fibroblastów, komórek œródb³onka naczyñ krwionoœnych i miêœni g³adkich dróg oddechowych5,15-19. W efekcie dochodzi do pogrubienia b³ony podstawnej, zw³óknienia podnab³onkowego, przerostu i hiperplazji miocytów. Pogrubienie b³ony podstawnej w drogach oddechowych bêd¹ce nastêpstwem aktywacji 12 A L E R G I A 4 ( 2 6 ) / 2 0 0 5 fibroblastów jest jednym z g³ównych elementów odpowiedzialnych za remodeling i nieodwracaln¹ obturacjê oskrzeli w astmie oskrzelowej20-22. Reasumuj¹c, mastocyty zaanga¿owane s¹ nie tylko we wczesn¹ fazê odpowiedzi alergicznej, ale odgrywaj¹ te¿ wa¿n¹ rolê w inicjowaniu i podtrzymywaniu przewlek³ego zapalenia alergicznego. Ró¿norodnoœæ funkcji pe³nionych przez mastocytarne mediatory i kooperacja tych komórek z wieloma innymi uczestnicz¹cymi w procesie zapalnym czyni¹ mastocyty centralnymi komórkami efektorowymi odpowiedzi immunologicznej. Eozynofile Jednymi z najwa¿niejszych komórek póŸnej reakcji alergicznej bior¹cych udzia³ w promocji przewlek³ego procesu zapalnego s¹ eozynofile23. Przyci¹gane przez mastocytarne mediatory pojawiaj¹ siê w tkankach natychmiast po inicjacji reakcji zapalnej. Powstanie nacieku eozynofilowego powi¹zane jest z aktywacj¹ co najmniej trzech kolejnych etapów ¿ycia komórki: powstawania, migracji do tkanek obwodowych (z aktywacj¹) i wyd³u¿enie prze¿ycia. Ró¿nicowanie eozynofilów z prekursorów w szpiku kostnym odbywa siê pod wp³ywem IL-3, GM-CSF (granulocyte-monocyte colony-stimulating factor) oraz IL-5. IL-5 wraz z eotaksyn¹ odpowiada równie¿ za kolejny etap - uwalnianie eozynofilów ze szpiku do krwi obwodowej. IL-4 i IL-13 poprzez zwiêkszenie ekspresji cz¹steczek adhezyjnych: VCAM-1 (vascular cell adhesion molecule) i selektyny P na komórkach œródb³onka zapewnia preferencyjn¹ migracjê eozynofilów w miejsce zapalenia. Aktywacja eozynofilów odbywa siê w wyniku interakcji komórek z cytokinami, mediatorami lipidowymi, sk³adnikami dope³niacza i 2-integrynami. Aktywowane eozynofile wywieraj¹ dzia³anie prozapalne poprzez mediatory powstaj¹ce w trakcie degranulacji (LTC4, PAF, enzymy degraduj¹ce-elastaza, kolagenaza, wolne rodniki tlenowe) jak i przez udzia³ bia³ek magazynowanych w komórce. ¯yj¹ zwykle od 2-5 dni, jednak okres ten mo¿e zostaæ wyd³u¿ony do kilku tygodni przez czynniki hamuj¹ce ich apoptozê (IL-3,-5,GMCSF). Granulocyt kwasoch³onny zawdziêcza swoj¹ nazwê obecnoœci ok. 200 barwi¹cych siê eozyn¹ ziarnistoœci zawieraj¹cych przede wszystkim wysoce zasadowe bia³ka, do których nale¿¹: • MBP - g³ówne bia³ko zasadowe, stanowi¹ce ok. 55% bia³ka w ziarnistoœciach wtórnych komórki, jest wybitnie cytotoksyczne w stosunku do komórek ssaków oraz prostych organizmów, powoduje uszkodzenie nab³onka oddechowego, prowadz¹c do ods³oniêcia zakoñczeñ nerwowych i zwiêkszaj¹c reaktywnoœæ oskrzeli, dodatkowo w obecnoœci jonów wapnia powoduje uwalnianie histaminy z bazofilów • EPO - peroksydaza eozynofilowa, jej aktywnoœæ obserwowana jest w obecnoœci nadtlenku wodoru (jego Ÿród³o stanowi¹ makrofagi) i jonów halogenkowych. Uk³ad EPO+H2O2+anion halogenkowy ma zdolnoœæ inaktywowania eikoza- I M M U N O L O G I A • • • • noidów, degranulowania mastocytów oraz uszkadzania innych komórek ECP - eozynofilowe bia³ko kationowe, znacznie bardziej cytotoksyczne ni¿ MBP, dzia³a prokoagulacyjnie i stymuluje degranulacjê mastocytów. Ma zdolnoœæ do bezpoœredniego uszkadzania komórek nab³onka oddechowego i upoœledza ruch rzêsek oprócz bia³ek kationowych, eozynofile maj¹ te¿ zdolnoœæ do wytwarzania innych mediatorów o silnym dzia³aniu prozapalnym, takich jak: czynnik aktywuj¹cy p³ytki (PAF) - wykazuj¹cy w³aœciwoœci chemotaktyczne dla p³ytek, eozynofilów i makrofagów oraz zwiêkszaj¹cy przepuszczalnoœæ naczyñ krwionoœnych i adhezjê eozynofilów do komórek miêœni g³adkich leukotrieny - przyczyniaj¹ce siê do skurczu oskrzeli, zwiêkszaj¹ce wydzielanie œluzu i przepuszczalnoœæ naczyñ wolne rodniki tlenowe-dzia³aj¹ce toksycznie na b³ony komórkowe23. Efektem dzia³ania tych mediatorów jest postêpuj¹ce niszczenie struktury tkanek i podtrzymywanie przewlek³ego stanu zapalnego w miejscach objêtych zapaleniem. Dominuj¹ca rola eozynofilów w rozwoju przewlek³ego zapalenia w astmie zosta³a potwierdzona w wielu badaniach24,25. W ostatnich latach wzros³a liczba obserwacji dokumentuj¹cych dodatni¹ liniow¹ korelacjê pomiêdzy poziomem ECP w surowicy krwi a reaktywnoœci¹ oskrzeli 26,27u astmatyków oraz intensywnoœci¹ reakcji u pacjentów z py³kowic¹28. Wykazano równie¿, ¿e poziom ECP jest czu³ym wskaŸnikiem intensywnoœci procesu przebiegaj¹cego w póŸnej fazie reakcji astmatycznej (LAR) 29.Udowodniono, ¿e poziom ten jest znamiennie wy¿szy u osób prezentuj¹cych LAR ni¿ u tych, którzy tej fazy reakcji nie rozwijaj¹. Wykazano tak¿e, ¿e bezpoœrednio po prowokacji alergenowej lub po wysi³ku u osób z astm¹ wysi³kow¹ dochodzi do przejœciowego spadku poziomu ECP, co mo¿e siê wi¹zaæ z nie okreœlonym jeszcze jego udzia³em we wczesnej odpowiedzi alergicznej 30. Neutrofil Kolejn¹ komórk¹ zaanga¿owan¹ w proces zapalenia alergicznego jest neutrofil. Pierwsze wzmianki dotycz¹ce roli granulocytów obojêtnoch³onnych w patogenezie zapalenia dróg oddechowych w astmie siêgaj¹ koñca lat 80-tych. Martin i wsp.31 jako pierwsi zwrócili uwagê na wzrost liczby neutrofilów w astmie nocnej. Kolejne badania potwierdzi³y obecnoœæ nacieków granulocytarnych w drogach oddechowych pacjentów, którzy zmarli z powodu napadu astmy32 Badania plwociny, pop³uczyn pêcherzykowooskrzelowych oraz bioptatów oskrzeli pacjentów z astm¹ ³agodn¹ i ciê¿k¹ wykaza³y znamienny wzrost liczby neutrofilów w ciê¿kiej, sterydozale¿nej astmie. Zaobserwowano, ¿e progresji choroby towarzyszy zwiêkszenie liczby neutrofilów w drogach oddechowych, a stopieñ nacieczenia neutrofilowego koreluje ujemnie ze stopniem odwracalnoœci obturacji25,33. Zapalenie neutrofilowe wi¹¿e siê z gorsz¹ odpowiedzi¹ na kortykosteroidoterapiê33. Jest to zwi¹zane najprawdopodobniej z hamuj¹cym wp³ywem kortykosteroidów na apoptozê neutrofilów. Wykazano ponadto, ¿e w nacieczonych neutrofilami oskrzelach pacjentów z ciê¿k¹ astm¹ wystêpuje równie¿ zwiêkszony odsetek eozynofilów, co sugeruje udzia³ neutrofilów w promo-waniu zapalenia eozynofilowego25. Rola neutroflów w zapaleniu alergicznym zwi¹zana jest ze zdolno-œci¹ do wytwarzania wielu prozapalnych mediatorów. • Mieloperoksydaza (MPO), bêd¹ca markerem aktywnoœci prozapalnej neutrofila, wchodzi w sk³ad uk³adu nadtlenek wodoru - MPO-jon halogenkowy i generuje powstanie kwasu podchlorawego. Jest to jeden z najsilniejszych czynników uszkadzaj¹cych komórki. Same neutrofile maj¹ równie¿ zdolnoœæ wytwarzania wolnych rodników tlenowych. • Elastaza magazynowana w ziarnistoœciach azuroch³onnych i wydzielana do œrodowiska po aktywacji neutrofila degraduje w³ókna elastynowe. • Katepsyna G i kolagenaza maj¹ zdolnoœæ do depolimeryzacji w³ókien kolagenowych. • Wydzielane przez neutrofile leukotrieny (LTB4), PAF i IL-8 dzia³aj¹ chemotaktycznie na inne komórki zapalne. • Neutrofile s¹ równie¿ Ÿród³em metaloproteinaz macierzy (m.in. MMP-9), które s¹ enzymami proteolitycznymi wobec w³ókien kolagenu i elastyny. Odgrywaj¹ one znacz¹c¹ rolê w procesie przebudowy dróg oddechowych obserwowanej w trakcie progresji astmy20. Komórki nab³onka Wa¿n¹ rolê w procesie zapalenia alergicznego pe³ni¹ komórki nab³onka, które poprzez wydzielane mediatory uczestnicz¹ aktywnie we wszystkich fazach reakcji alergicznej. • Komórki nab³onka uczestnicz¹ w adhezji i zatrzymywaniu efektorowych komórek zapalnych w miejscu zapalenia35,36. • Bezpoœrednia aktywacja przez alergeny jest mo¿liwa dziêki wystêpowaniu na powierzchni komórek nab³onka receptorów o niskim powinowactwie dla IgE37. • Komórki nab³onkowe s¹ tak¿e Ÿród³em prostaglandyny PGE2, leukotrienu B4 oraz rozszerzaj¹cego miêœnie g³adkie oskrzeli tlenku azotu, wytwarzaj¹ prozapalne cytokiny: IL-1, IL-6 IL-8, RANTES i GM-CSF38. Mediatory te wp³ywaj¹ na wzrost, ró¿nicowanie, proliferacjê i aktywacjê neutrofilów, eozynofilów, mastocytów, makrofagów i limfocytów. • W odpowiedzi na uszkodzenie komórki nab³onka uwalniaj¹ czynniki wzrostu PDGF (Plateletderived growth factor), FGF (fibroblast growth factor ), endotelinê 1, TGF , które powoduj¹ zgrubienie b³ony podstawnej i stymuluj¹ procesy w³óknienia w b³onie podœluzowej20. Limfocyty Th2 Centraln¹ rolê w koordynacji poszczególnych A L E R G I A 4 ( 2 6 ) / 2 0 0 5 13 I M M U N O L O G I A etapów zapalenia alergicznego pe³ni limfocyt Th239. Komórka ta porównywana jest do dyrygenta steruj¹cego funkcj¹ efektorow¹ "swoistej orkiestry alergicznej", któr¹ stanowi¹ limfocyty B syntetyzuj¹ce immunoglobuliny klasy E oraz mastocyty i eozynofile. G³ównym czynnikiem stymuluj¹cym dojrzewanie tego typu limfocytów jest wytwarzana przez same limfocyty Th2 oraz mastocyty IL-4, która aktywuje niezbêdny do ich rozwoju czynnik transkrypcyjny STAT6 (signal transducer and activator of transcription)41. Limfocyty uczestnicz¹ w ka¿dym etapie odpowiedzi immunologicznej. Po dostaniu siê alergenu do organizmu i jego przetworzeniu przez komórki prezentuj¹ce antygen dochodzi do stymulacji limfocytów Th2 wywo³anej kontaktem alergen-komórka prezentuj¹ca antygen-limfocyt Th2. Aktywowany limfocyt Th2 przedostaje siê nastêpnie do okolicznych wêz³ów ch³onnych i kooperuje z limfocytem B, stymuluj¹c syntezê swoistych immunoglobulin klasy IgE. Limfocyt Th2 jest Ÿród³em szeregu prozapalnych, immunoreguluj¹cych cytokin. S¹ to: ILl-4, IL-5,-10 i IL-13. IL-4, zwana równie¿ czynnikiem stymuluj¹cym limfocyty B, pobudza proliferacjê limfocytów B i indukuje syntezê przeciwcia³ IgE. Istnieje dodatnia korelacja miêdzy wydzielaniem IL-4 a stê¿eniem IgE we krwi. Dzia³aj¹c na komórki œródb³onka, IL-4 wzmaga ekspresjê cz¹stek adhezyjnych, u³atwiaj¹c przenikanie innych komórek zapalnych (eozynofilów, bazofilów, neutrofilów) do miejsc zapalenia42. Zwiêksza ona równie¿ wytwarzanie eotaksyny przez komórki nab³onkowe dróg oddechowych, przez co wp³ywa chemotaktycznie na eozynofile. Podobny zakres funkcji ma IL-5, która oddzia³ywuje g³ównie na eozynofile: indukuje ich wzrost i ró¿nicowanie, hamuj¹c apoptozê i stymuluj¹c degranulacjê. Interleukina 10 z kolei stymuluje proliferacjê i ró¿nicowanie prekursorów komórek tucznych, a IL-13 dzia³a g³ównie na monocyty i limfocyty B. Poznanie zale¿noœci miêdzy wydzielanymi przez limfocyty Th2 cytokinami a aktywacj¹ i rekrutacj¹ eozynofilów i mastocytów do miejsc zapalenia zwróci³o uwagê badaczy na istotn¹ rolê tych komórek w rozwoju zapalenia dróg oddechowych w astmie oskrzelowej40,43. Mia³by siê on wyra¿aæ pobudzaj¹cym wp³ywem limfocytów Th2 i wytwarzanych przez nie mediatorów na syntezê IgE, dojrzewanie i aktywacjê mastocytów oraz tworzenie nacieków eozynofilowych w nab³onku oddechowym, co prowadzi³oby w efekcie do uszkodzenia nab³onka i nadreaktywnoœci oskrzeli. Badania bioptatów oskrzeli i pop³uczyn pêcherzykowo-oskrzelowych u pacjentów z astm¹ potwierdzi³y te przypuszczenia. Wykazano istnienie dodatniej korelacji miêdzy liczb¹ aktywowanych limfocytów Th2 a stopniem ciê¿koœci astmy i nadreaktywnoœci¹ oskrzeli. Mimo ogromnego postêpu wiedzy, jaki dokona³ siê w ostatnich latach w dziedzinie alergologii i immunologii klinicznej, mechanizmy zwi¹zane z rozwojem zapalenia alergicznego nie s¹ do koñca poznane. Nieznane s¹ wszystkie procesy kontroluj¹ce i moduluj¹ce przebieg odpowiedzi zapalnej. Poznanie ich umo¿liwi lepsze zrozumienie patogenezy chorób alergicznych i stworzy byæ mo¿e w przysz³oœci nowe mo¿liwoœci prewencji i leczenia tych chorób, a s¹ to korzyœci nie do przecenienia. ! Piœmiennictwo 1. Ma³olepszy , Liebhart J i wsp.: Wystêpowanie chorób alergicznych w Polsce. Alergia, Astma, Immunologia 2000; 5 supl. 2, 2:163-169, 2. Bousquet J, Van Cauwenberge P, Khaltaev N; Aria Workshop Group; World Health Organization.Allergic rhinitis and its impact on asthma. J Allergy Clin Immunol 2001 Nov;108(5):S147-334, 3. Church MK, Levi-Schaffer F.: The human mast cell. J Allergy Clin Immunol 1997;99:155-60 4. Krishnaswamy G, Kelley J, Johnson D i wsp.: The human mast cell: functions in physiology and disease. Front Biosci 2001;6:D1109-1127, 5. Brightling CE, Bradding P, Symon FA, et al.: Mast-cell infiltration of airway smooth muscle in asthma. N Engl J Med. 2002;346:1699-705, 6. Metzger H: The high affinity receptor for IgE, Fcepsilon RI. Novartis Found Symp 2004;257:51-9, 7. Pawankar R.: Mast cells in allergic airway disease and chronic rhinosinusitis.Chem Immunol Allergy. 2005;87:111-29., 8. Holgate ST, Kay AB: Mast cells, mediators and asthma. Clin Allergy 1985;15:221-234, 9. Bloemen PG, Henricks PA, Nijkamp FP: Cell adhesion molecules and asthma. Clin Exp Allergy 1997;27:128-41, 10. Williams CM, Galli SJ: The diverse potential effector and immunoregulatory roles of mast cells in allergic disease. J Allergy Clin Immunol 2000;105:847-59, 11. Alfaro V: Role of histamine and platelet-activating factor in allergic rhinitis.J Physiol Biochem. 2004 Jun;60(2):101-11, 12. Nilsson G, Metcalfe DD, Taub DD.Demonstration that platelet-activating factor is capable of activating mast cells and inducing a chemotactic response.Immunology. 2000 Feb;99(2):314-9, 13. Mekori YA, Melcalfe DD.: Mast cell-T cellinteractions. J Allergy Clin Immunol 1999;104:517-23, 14. Ott VL, Cambier JC, Kappler J, et al.: Mast cell-dependent migration of effector CD8+ T cells through production of leukotriene B4. Nat Immunol;4:974-81, 15. Gruber BL, Kew RR, Jelaska A, et al.: Human mast cells activate fibroblasts: tryptase is a fibrogenic factor stimulating collagen messenger ribonucleic acid and fibroblast chemotaxis. J Immunol 1997;158:2310-17, 16. Abe M, Kurosawa M, Ishikawa O, et al.: Effect of mast cell-derived mediators and mast cell-related neutral proteases on human dermal fibroblast proliferation and type I collagen production. J Allergy Clin Immunol.2000;106:78-84, 17. Caughey GH. Mast cell tryptase: hoisted by its own petard? J Clin Invest 1996;97:895-6, 18. Ruoss SJ, Hartmann T, Caughey GH, et al.: Mast cell tryptase is mitogen for cultured fibroblasts. J Clin Invest 1991;88:493-9, 19. Page S, Ammit AJ, Black JL, et al.: Human mast cell and airway smooth muscle cell interactions: implications for asthma. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2001;281:1313-23, 20. Elias JA, Zhu Z, Chupp G, et al.: Airway remodeling in asthma J Clin Invest 1999;104:1001-6, 21. Roche WR: Subepithelial fibrosis in the bronchi of asthmatics. Lancet 1989;1(8637):520-24, 22. Cherta A .: Airways remodelling is a distinctive feature of asthma and is related to severity of disease. Chest 1997;11:852-57, 23. Ishihara K, Hong J, Zee O:The role of eosinophils in allergic inflammation Nippon Yakurigaku Zasshi. 2005 May;125(5):265-70., 24. Kay AB:The role of eosinophils in the pathogenesis of asthma.Trends Mol Med. 2005 Apr;11(4):148-52, 25. Kikuchi S, Nagata M, Kikuchi I:Association between neutrophilic and eosinophilic inflammation in patients with severe persistent asthma.Int Arch Allergy Immunol. 2005;137 Suppl 1:7-11, 26. Barck C, Lundahl J, Halden G.:Total eosinophil cationic protein levels in induced sputum as a marker of changes in eosinophilic inflammation in a patient with allergic asthma.Ann Allergy Asthma Immunol. 2005 Jul;95(1):86-92., 27. Obase Y, Shimoda Y, Mitsuta K:Correlation between airway hyperresponsiveness and airway inflammation in a young adult population: eosinophil, ECP, and cytokine levels in induced sputum.Ann Allergy Asthma Immunol. 2001 Mar;86(3):304-10., 28. Marcucci F, Sensi LG, Migalli C: Eosinophil cationic protein and specific IgE in serum and nasal mucosa of patients with grass-pollen-allergic rhinitis and asthma. Allergy. 2001 Mar;56(3):231-6., 29. Wrzyszcz M, Ma³olepszy J, Wolañczyk-Mêdrala A: Concentration of eosinophil cationic protein in blood serum during early and late asthmatic reaction Pneumonol Alergol Pol. 1995;63(3-4):162-6, 30. Onadeko BO, Khadadah ME,Ezeamnzie Ci: Changes in blood levels of eosinophil cationic protein and tryptase after exercise challenge in adolescents with exercise-induced asthma.East Afr Med J. 2004 Jan;81(1):27-33., 31. Martin RJ, Cicutto LC, Smith HR Airways inflammation in nocturnal asthma.Am Rev Respir Dis. 1991 Feb;143(2):351-7., 32. Sur S, Crotty TB, Kephart GM Sudden-onset fatal asthma. A distinct entity with few eosinophils and relatively more neutrophils in the airway submucosa?, Am Rev Respir Dis. 1993 Sep;148(3):713-9., 33. Wenzel SE, Szefler SJ, Leung DY Bronchoscopic evaluation of severe asthma. Persistent inflammation associated with high dose glucocorticoids. Am J Respir Crit Care Med. 1997 Sep;156(3 Pt 1):737-43. 34. Kamath AV, Pavord ID, Ruparelia PR Is the neutrophil the key effector cell in severe asthma?Thorax. 2005 Jul;60(7):529-30., 35. Campbell AM, Chanez P, Vignola AM: Functional characteristics of bronchial epithelium obtained by brushing from asthmatic and normal subjects.Am Rev Respir Dis. 1993 Mar;147(3):529-34., 36. Vignola AM ,Campbell AM, Chanez P: HLA-DR and ICAM-1 expression on bronchial epithelial cells in asthma and chronic bronchitis.Am Rev Respir Dis. 1993 Sep;148(3):689-94., 37. Campbell AM, Vignola AM Chanez P: Low-affinity receptor for IgE on human bronchial epithelial cells in asthma. Immunology. 1994 Aug;82(4):506-8. 38. Kenney JS, Baker C, Welch MR:Synthesis of interleukin-1 alpha, interleukin-6, and interleukin-8 by cultured human nasal epithelial cells.J Allergy Clin Immunol. 1994 Jun;93(6):1060-7., 39. Agrawal DK,Bharadway A:Allergic airway inflammation.Curr Allergy Asthma Rep. 2005 Mar;5(2):142-8. 40. Ngoc PL, Gold DR: Cytokines, allergy, and asthma.Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2005 Apr;5(2):161-6. 41. Romagnani S 1994. Regulation of the development of type 2 T-helper cells in allergy. Curr Opin Immunol 6: 838-846. 42. Basten A, Beeson PB 1970. Mechanism of eosinophilia. II. Role of the lymphocyte. J Exp Med 131: 1288-1305. 43. Robinson DS, Hamid Q, Ying S, Tsicopoulos A, Barkans J, Bentley AM, Corrigan CJ, Durham SR, Kay AB 1992. Predominant Th2-like bronchoalveolar T-lymphocyte population in atopic asthma. New England J Medicine 326: 298304. 14 A L E R G I A 4 ( 2 6 ) / 2 0 0 5