Polyclonal Rabbit Anti-Human IgG/FITC Kod F0202

Polyclonal Rabbit
Anti-Human IgG/FITC
Kod F0202
Przeznaczenie
Do uŜytku diagnostycznego in vitro
Preparat F0202 stanowi preparat poliklonalnego przeciwciała króliczego przeciw ludzkim immunoglobulinom IgG,
przeznaczony do oznaczeń ludzkich immunoglobulin w tkankach. Preparat moŜe być takŜe wykorzystywany w
innych technikach immunofluorescencyjnych (1, 2). Wyniki powinna interpretować osoba o potwierdzonych
kwalifikacjach, w kontekście historii choroby pacjenta oraz wyników innych badań diagnostycznych.
Odczynnik
dostarczony
Koniugat przeciw ludzkim immunoglobulinom IgG, F0202, został wyprodukowany z oczyszczonej frakcji
immunoglobulin króliczej surowicy odpornościowej. Preparat F0202 dostarczany jest w postaci płynnej w buforze
fosforanowym zawierającym 15 mmol/l NaN3 pH 7,2.
StęŜenie białka w g/l: zob. etykieta na fiolce.
Miano przeciwciał: 400 mg/l (ilość mg antygenu dodawanych do 1 l przeciwciał, aby osiągnąć punkt równowagi).
Stosunek F/P: E495 nm/E278 nm = 0,65 ± 0,05 odpowiadający molowemu stosunkowi FITC/białko wynoszącemu 2,5.
Immunogen
IgG wyizolowane z połączonych normalnych próbek ludzkiej surowicy.
Swoistość
Preparat F0202 reaguje z łańcuchami γ ludzkiej immunoglobuliny IgG. Śladowe pozostałości zanieczyszczeń
usunięto innymi przeciwciałami stosując absorpcję w fazie stałej.
Przed koniugacją, swoistość przeciwciała oznaczano w sposób następujący:
Podczas stosowania 12,5 µl niekoniugowanego przeciwciała króliczego przeciw ludzkiej IgG, Dako Rabbit Anti—
Human IgG, nr kat. A0423, na 1 cm2 powierzchni Ŝelu, w immunoelektroforezie krzyŜowej wobec 2 µl ludzkiego
osocza, pojawia się jedynie łuk precypitacji IgG. Barwienie: barwnik Coomassie Brilliant Blue.
W pośrednim teście ELISA brak jest znaczącej reakcji z ludzkimi immunoglobulinami IgA i IgM. W
immunoenzymatycznym teście ELISA kanapkowym z dwoma przeciwciałami nie obserwuje się reakcji z ludzkim
osoczem pozbawionym IgG.
W badaniu immunofluorescencyjnym z wykorzystaniem normalnego, ludzkiego, utrwalanego formaliną, osadzonego
w parafinie migdała, poddanego wstępnej obróbce z zastosowaniem proteinazy Dako Proteinase K, nr kat. S3030,
F0202 w rozcieńczeniu 1:20 – 1:40 powoduje silne i swoiste barwienie komórek plazmatycznych zawierających IgG.
Środki ostroŜności
1. Do stosowania przez osoby przygotowane zawodowo.
2. Produkt zawiera azydek sodu (NaN3), odczynnik chemiczny silnie toksyczny w czystej postaci. W stęŜeniu
obecnym w produkcie, chociaŜ nie klasyfikowanym jako niebezpieczne, azydek sodu moŜe reagować z elementami
kanalizacji wykonanymi z ołowi i miedzi, tworząc silnie wybuchowe pochodne lub azydki tych metali. Przy usuwaniu
odpadów przepłukać odpływ duŜą ilością wody, aby uniknąć tworzenia się azydków.
3. Jak w przypadku kaŜdego materiału biologicznego, naleŜy stosować odpowiednie procedury.
Przechowywanie
Przechowywać w ciemności, w temperaturze 2 - 8°C. Nie u Ŝywać po upływie daty waŜności wskazanej na stemplu
na fiolce. Jeśli produkt był przechowywany w warunkach innych, niŜ zalecane, uŜytkownik musi sprawdzić jakość
produktu. Nie występują wyraźne oznaki wskazujące na niestabilność produktu. Z tego względu, jednocześnie z
oznaczaniem próbek badanych naleŜy przeprowadzać dodatnie i ujemne próby kontrolne.
Podczas przechowywania moŜe się czasami wytrącać niewielki osad, powodujący drobnoziarniste, nie swoiste
barwienie. Pełną jakość koniugatu moŜna przywrócić przeprowadzając jego filtrację (przez 0,22 µm filtr
acetylocelulozowy). Koniugatu nie naleŜy przechowywać w postaci rozcieńczonej. W przypadku uzyskiwania
nieoczekiwanych wyników barwienia, których nie moŜna wytłumaczyć zmianami w zakresie stosowanych procedur
laboratoryjnych i podejrzenia, Ŝe wina leŜy po stronie przeciwciała, naleŜy skontaktować się z naszym Serwisem
Technicznym.
Wskazówki dotyczące
rozcieńczania
Dla potrzeb technik immunofluorescencyjnych: 1:20 – 1:40 ludzkich komórek plazmatycznych.
Zaleca się rozcieńczenie 1:40 – 1:100 dla detekcji ludzkich przeciwciał IgG względem antygenu przeciwjądrowego
(ANA).
PowyŜsze informacje stanowią jedynie zalecenia. Optymalne warunki mogą zaleŜeć od rodzaju próbki i metody jej
przygotowania, powinny więc zostać określone indywidualnie w kaŜdym laboratorium.
W przypadku stosowania produktu do mroŜonych skrawków tkankowych pojawić się moŜe swoiste wybarwienie tła,
wynikające z obecności ludzkich immunoglobulin w tkance. Dokładne płukanie umoŜliwia ograniczenie tego zjawiska
do minimum.
Zaleca się przeprowadzanie odpowiedniej kontroli dodatniej i ujemnej jednocześnie z kaŜdym oznaczeniem, co
umoŜliwia kontrolę nad zastosowanym odczynnikiem i procedurą oznaczenia. NaleŜy pamiętać, Ŝe koniugaty
fluorochromowe są wraŜliwe na działanie światła. Z tego względu podczas procedury barwienia i do chwili
przeprowadzenia analizy próbki naleŜy chronić przed światłem.
Literatura
(120784-001)
Dako Denmark A/S
1.
Muda A.O., Feriozzi S., Rahmi S., Faraggiana T. Spatial arrangement of IgA and C3 as a prognostic indicator of
IgA nephropathy. J. Pathol 1995; 177:201-8.
2.
Woodrow D.F., Shore I., Moss J., Gower P., Phillips M. Immunoelectron microscopic studies of immune complex
deposits and basement membrane components in IgA nephropathy. J Pathol 1989; 157:47-57.
F0202/PL/MTH/01.01.03 str. 1/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Legenda
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
ZuŜyć przed
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Chronić przed światłem
dziennym
Producent
Sprawdzić w instrukcji
stosowania
Numer serii
(120784-001)
Dako Denmark A/S
F0202/PL/MTH/01.01.03 str. 2/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17