Multilayred TiN/Ti/a-C:H coatings for tribological application
Transkrypt
Multilayred TiN/Ti/a-C:H coatings for tribological application
Materiały konferencyjne BioMedTech SILESIA 2016 I BioMedTech SILESIA CONFERENCE 2016 JUNIOR - STRONA 362 Aleksandra Skubis1, Bartosz Sikora1, Małgorzata Kimsa2, Urszula Mazurek1. Zmiany ekspresji genu kodującego fosfatazę alkaliczną (ALP) w komórkach macierzystych poddanych działaniu deksametazonu, kwasu askorbinowego i β-glicerolofosforanu. 1Katedra i Zakład Biologii Molekularnej, Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej, Śląski Uniwersytet Medyczny w Katowicach, 2Katedra i Zakład Biochemii, Wydział Lekarski w Katowicach, Śląski Uniwersytet Medyczny w Katowicach. Opiekun pracy: prof. dr hab. Urszula Mazurek STRESZCZENIE Komórki mezenchymalne macierzyste tkanki tłuszczowej (ADSC ang. adipose derived stem cells) to komórki posiadające zdolność różnicowania w kierunku komórek mezodermy (adipocyty, chondrocyty i osteocyty), co wiąże się z wielkimi nadziejami w medycynie regeneracyjnej. Celem eksperymentu jest wydajny proces różnicowana komórek macierzystych w osteocyty. Możliwości jakie stwarzają zróżnicowane komórki ADSC to m.in. wykorzystanie ich w regeneracji uszkodzeń kości powstających w wyniku urazów mechanicznych oraz trudno gojących się złamań u osób z obniżonym potencjałem regeneracyjnym np. u osób z chorobami cywilizacyjnymi takimi jak otyłość, cukrzyca. Do wskaźników kościotworzenia należy białko ALP (ang. Bone Alkaline Phosphatase) – marker aktywności osteoblastów. Jest ono kodowane przez gen ALP, którego ekspresja była oceniana w komórkach macierzystych ADSC hodowanych z dodatkiem deksametazonu, kwasu askorbinowego (w dwóch różnych stężeniach) i β-glicerolofosforanu. Fosfataza alkaliczna białko, które bierze udział w tworzeniu osteoidu i mineralizacji. W doświadczeniu wykorzystano ludzkie mezenchymalne komórki macierzyste pochodzące z tkanki tłuszczowej (ADSC, ang. Adipose-Derived Stem Cells, PT-5006, Lonza, Szwajcaria). Hodowlę prowadzono przez 14 oraz 28 dni, a układ odniesienia stanowiły komórki macierzyste tkanki tłuszczowej hodowane przez taki sam okres czasu tylko w pożywce standardowej (DMEM, Lonza, Szwajcaria ) bez dodatków czynników różnicujących. Identyfikacja markerów była przeprowadzana z wykorzystaniem techniki ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją (Q RT-PCR, ang. quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction). Identyfikacja markera kościotworzenia ALP oraz ilościowa, a także jakościowa ocena złogów wapnia w komórkach różnicowanych pozwoli na określenie zmian molekularnych zachodzących na różnych etapach dyferencjacji w kierunku komórek tkanki kostnej oraz umożliwi zoptymalizowane warunków tego procesu w hodowlach in vitro.