Baird Parker Agar + RPF (1321 3220 3226 131)
Transkrypt
Baird Parker Agar + RPF (1321 3220 3226 131)
BAIRD PARKER + RPF ZGODNIE Z PN ISO 6888-2:2001 Przeznaczenie: wykrywanie i oznaczanie ilości Staphylococcus aureus w pożywieniu. Stosować tylko do diagnostyki in vitro. Produkt do użytku profesjonalnego. 1. Właściwości: podłoże służy do wykrywania obecności Staphylococcus aureus i oceny ilościowej tego mikroorganizmu w pożywieniu. Chlorek litu oraz 1% roztwór tellurynu potasu są czynnikami selektywnymi hamującymi wzrost innych organizmów niż Staphylococcus sp. Różnicowanie koagulozo–dodatnich gronkowców odbywa się dzięki obecności tellurynu potasu oraz fibrynogenu i plazmy króliczej. Gronkowce koagulazo-dodatnie mają mętną strefę wokół kolonii. Zdolność redukcji tellurynu potasu jest cechą charakterystyczną gronkowców koagulozo-dodatnich, co powoduje zaczernienie kolonii. 2. Skład w g/l wody destylowanej: Hydrolizat kazeinowy.............................10,0 g Wyciąg mięsny...........................................5,0 g Ekstrakt drożdżowy.................................1,0 g Chlorek litu................................................5,0 g Glicyna..................................................... 12,0 g Pirogronian sodu ................................... 10,0 g Agar .......................................................... 17,0 g Suplementy w g/l podłoża: Telluryn potasu.............................................0,025 g Plazma królicza………………………….…0,025 g Fibrynogen…………………...…...................3,75 g Inhibitor trypsyny……………………….…0,025 g 3. Przygotowanie suplementu: 60,0 g suchego podłoża dodać do 1 litra wody destylowanej. Podgrzewać często mieszając, doprowadzić do wrzenia i gotować przez 1 min. do całkowitego rozpuszczenia. Wyjaławiać w autoklawie w temp. 121°C przez 15 min. Suplement RPF należy przygotować poprzez dodanie 10 ml sterylnej dejonizowanej wody. Dobrze wymieszać. Tak przygotowany suplement należy dodać aseptycznie* do 90ml podłoża bazowego. Roztwór delikatnie wymieszać, w sposób ograniczający pienienie pożywki. * komora laminarna – dotyczy rozpuszczenia suplementu oraz przygotowania podłoża gotowego. 5. Materiał do badań: posiew materiałów biologicznych, w których spodziewana jest obecność ziarniaków z rodzaju Staphyloccocus. 6. Sposób wykonania: postępować zgodnie z zaleceniami PN ISO 6888-2. 7. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych, policzyć ilość kolonii typowych dla Staphyloccocus aureus. Gronkowce koagulozo - dodatnie powodują powstanie czarnych do szarych błyszczących, wypukłych kolonii, z całymi brzegami i mętną strefą. Gronkowce koagulozo - ujemne rosną słabo lub wcale. Jeśli nastąpi wzrost kolonie są czarne, strefy zmętnienia brak. Wzrost większości pozostałych mikroorganizmów jest zahamowany lub silnie ograniczony. W przypadku wzrostu kolonie są jasne do ciemnobrązowych bez stref zmętnienia. Kolonie Proteus mogą początkowo przypominać kolonie gronkowców koagulazo - dodatnich, ale po ponad 24 godz. zaczynają się rozpełzać. Kolonie pozostają brązowe. 8. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Enterococcus faecalis ATCC 29212 Escherichia coli ATCC 25922 Proteus mirabilis ATCC 12453 Stapylococcus aureus ATCC 25923 Stapylococcus epidermidis ATCC 12228 Wzrost Reakcja (+) słaby kolonie szaroczarne, bez strefy zmętnienia (–) --------(+) kolonie brązowe (+) kolonie czarno-szare ze strefą zmętnienia (+) słaby kolonie jasnoszare 9. Ograniczenia. W celu postawienia ostatecznej diagnozy należy przeprowadzić dodatkowe testy identyfikacyjne. 10. Przechowywanie: gotowe płytki z podłożem należy przechowywać w temp. 6 – 12˚C do upływu terminu ważności, butelki w temp. 6-25°C. Suche podłoże powinno być szczelnie zamknięte w opakowaniu i przechowywane w suchym, chłodnym pomieszczeniu. 11. Postępowanie ze zużytymi podłożami: hodowle należy zniszczyć przez sterylizację w autoklawie lub postępować zgodnie z obowiązującymi procedurami w zależności od typu laboratorium. 12. Środki ostrożności: ze względu na zawartość półproduktów pochodzenia zwierzęcego należy stosować się do zasad postępowania jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. 13. Postacie handlowe: nr kat. 1321 gotowe płytki z podłożem (1x10 sztuk); nr kat. 3220 butelki z podłożem bazowym (100, 200, 500 ml); nr kat. 3226 zestaw: podłoże bazowe (90 ml) + suplement 10ml; nr kat. 131 podłoże nie uwodnione (500 g). BAIRD PARKER AGAR + RPF Strona 1 14. Termin ważności: podłoża suche – 3 lata; podłoże w butelkach – 1 rok; na płytkach – 60 dni od daty produkcji; Liofilizowany suplement – 12 miesięcy. 15. Piśmiennictwo: 1. Baird-Parker, A. C. 1962. An improved diagnostic and selective medium for isolating coagulase-positive staphylococci. J. Appl. Bacteriol. 25:12-19. 2. Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of food., 3rd ed. American Public Health Association, Washington, D. C. 3. Marshall, R. T. (ed.). 1993. Standard methods for the microbiological examination of diary products, 16th ed. American Public Health Association, Washington, D. C. 16. Data ostatniej aktualizacji: 20.01.2015 r. Graso Oddział produkcyjny 83-211 Jabłowo, ul. Leśna 1 Owidz Dział Obsługi Klienta: (58) 562 30 21, fax: (58) 56 279 87 [email protected]; www.podloza.pl, www.grasobiotech.pl BAIRD PARKER AGAR + RPF Strona 2