cwiczenie III

PODSTAWY BIOTECHNOLOGII PRZEMYSŁOWEJ
KSZTAŁTOWANIE PROCESU BIOTECHNOLOGICZNEGO
I.
WPŁYW STĘŻENIA ALKOHOLU NA WZROST DROŻDŻY
PRACA W WARUNKACH JAŁOWYCH
1. Rozlać podłoże bazowe I (2g sacharozy, 1g ekstraktu drożdżowego, 1g
peptonu na 100 cm3 wody destylowanej) po 5 cm3 do 3 probówek.
2. Sporządzić rozcieńczenia alkoholu etylowego wg następującego schematu:
Końcowe stężenie alkoholu (%)
Podłoże GYEP (cm3)
Woda jałowa (cm3)
Etanol (cm3)
0
5
5
0,0
10
5
4,0
1,0
20
5
3,0
2,0
3. Zaszczepić przygotowane podłoża zawiesiną drożdży piekarskich (0,1 cm3),
dokładnie wymieszać zaczepione podłoże.
II.
WPŁYW pH PODŁOŻA HODOWLANEGO NA WZROST DROŻDŻY
PRACA W WARUNKACH JAŁOWYCH
1. W trzech probówkach umieścić po 5 cm3 przygotowanych wcześniej buforów
fosforanowych.
2. Dodać do każdej z probówek 5 cm3 podłoża bazowego I (2g sacharozy, 1g
ekstraktu drożdżowego, 1g peptonu na 100 cm3 wody destylowanej).
Dokładnie wymieszać podłoże.
3. Zaszczepić przygotowane podłoża zawiesiną drożdży piekarskich (0,1 cm3),
dokładnie wymieszać.
III.
WPŁYW SKŁADU PODŁOŻA HODOWLANEGO
DROŻDŻY
PRACA W WARUNKACH JAŁOWYCH
NA
WZROST
1. Rozlać po 5 cm3 podłoża bazowego II (0,25g (NH4)2HPO4 i 0,25g (NH4)2SO4
na 100 cm3 wody destylowanej) do 3 jałowych probówek.
2. Następnie dodać 5 cm3 roztworu laktozy (I próba), 5 cm3 roztworu fruktozy (II
próba) oraz 5 cm3 roztworu sacharozy (III próba).
3. Zaszczepić pożywki zawiesiną drożdży piekarskich (0,1 cm3), ponownie
dokładnie wymieszać.
IV.
WPŁYW ZAWARTOSCI GLUKOZY NA WZROST DROŻDŻY
PRACA W WARUNKACH JAŁOWYCH
1. Rozlać po 5 cm3 podłoża bazowego II (0,25g (NH4)2HPO4 i 0,25g (NH4)2SO4
na 100 cm3 wody destylowanej) do 3 jałowych probówek.
2. Następnie dodać do probówki nr 1 – 5 cm3 10% roztworu glukozy, do
probówki nr 2 – 5 cm3 20% roztworu glukozy oraz do probówki nr 3 – 5 cm3
30% roztworu glukozy.
3. Dokładnie wymieszać roztwory.
4. Zaszczepić pożywki zawiesiną drożdży piekarskich (0,1 cm3), ponownie
dokładnie wymieszać.
W ZAŁOŻONYCH HODOWLACH ORAZ PO INKUBACJI OZNACZYĆ:
1. Masę probówek.
2. Liczbę komórek w 1 cm3 hodowli drożdżowej w komorze Thoma.
3. Żywotność drożdży
- preparat barwiony wodnym roztworem błękitu metylenowego, komórki
martwe barwią się na niebiesko, żywe pozostają bezbarwne.
4. Odżywienie komórek
- preparat barwiony płynem Lugola, komórki zawierające glikogen barwią się na
ciemnobrunatny (brązowy kolor), pozostałe na jasnożółty.
Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w formie sprawozdania