Oxygraph-2k Oroboros - Katedra Biochemii Klinicznej

PRACOWNIA BIOLOGII MOLEKULARNEJ I PATOGENÓW, ZAKŁAD BIOCHEMII KLINICZNEJ (+48 12 424-87-92)
Oxygraph-2k Oroboros
Elektroda tlenowrażliwa Oxygraph-2k Oroboros służy do oceny
aktywności mitochondriów. Na podstawie pomiarów stężenia tlenu
w medium, wyznaczane jest tempo oddychania komórkowego jako
pochodna stężenia tlenu w czasie. Zastosowanie wysokoczułej
respirometrii i odpowiedniego protokołu badań pozwala na analizę
rutynowego stanu oddechowego (fizjologicznego), stanu
sprzęgniętego mitochondriów (indukowanego oligomycyną) oraz
zdolność rozprzęgania oddychania (indukowanego rozprzęgaczem,
FCCP) w żywych komórkach. W celu badania mechanizmu
defektów mitochondrialnych stosowane są rozbudowane analizy
funkcji poszczególnych kompleksów oddechowych w izolowanych
mitochondriach lub komórkach permeabilizowanych.
Badanie tempa oddychania wewnątrzkomórkowego może również
stanowić
element szerszej oceny funkcji mitochondriów
analizowanej wspólnie z oceną stężenia ATP w komórkach
(oznaczenia metodą luminescencyjną w tej samej Pracowni) oraz
oceną potencjału wewnętrznej błony mitochondrialnej (oznaczenia
metodą fluorescencyjną, ilościowe i obrazowe).
PRZYKŁADY WYKORZYSTANIA
•
badanie procesu oddychania wewnątrzkomórkowego komórek
z hodowli in vitro, poddanych działaniu składników i suplementów diety
•
ocena toksycznego wpływu leków, narkotyków itp. na funkcje
mitochondriów komórek z hodowli in vitro
badanie funkcji mitochondriów komórek z hodowli in vitro w celu
•
poszukiwania potencjalnych mechanizmów działania różnych czynników
(np. ochronnych w chorobach neurodegeneracyjnych)
obserwacje zmiany profilu metabolicznego komórek i żywotności
•
podczas różnych stanów np. apoptozy lub różnicowania
•
badanie funkcji mitochondriów i wykrywanie defektów
mitochondrialnych w komórkach izolowanych od pacjentów, np.
w leukocytach
KATEDRA BIOCHEMII KLINICZNEJ UNIWERSYTET JAGIELLOŃSKI COLLEGIUM MEDICUM, 31-501 KRAKÓW, UL. KOPERNIKA 15A, TELEFON: +48 12 421 40 06