Chipy DNA i ich zastosowania
Transkrypt
Chipy DNA i ich zastosowania
POST. MIKROBIOL., 2002, 41, Supl. 1, 13—18 http://www.pm.microbiology.pl CHIPY DNA I ICH ZASTOSOWANIA Zbigniew J. Leśnikowski, Edyta Paradowska, Marzena Przepiórkiewicz, Mirosława Studzińska, Agnieszka Olejniczak DNA chips and theirs applications Abstract: DNA chip technology is rapidly advancing and applications to diagnostics (mutation detection), gene discovery, gene expression and mapping have been convincingly demonstrated. Arraybased assays allow a range of characteristics, such as drug resistance, to be rapidly and simultaneously determined. Near instantaneous detection of pathogens from clinical material, combined with simultaneous prediction of their antimicrobial resistance profiles, would revolutionize the impact of microbiology on the management of infections. Wstęp Zjawisko hybrydyzacji kwasów nukleinowych leży u podstaw wielu stosowanych współcześnie metod diagnostyki molekularnej [1, 4, 8, 11]. Zdolność zasad nukleinowych do tworzenia specyficznych par zgodnie z regułą Watsona-Cricka: A-T i G-C dla DNA oraz AU i G-C dla RNA stanowi uniwersalny fundament technologii molekularnych opartych na tym zjawisku. Na tej samej zasadzie oparta jest również technologia chipów DNA [7]. Technologia chipów DNA umożliwia równoległą analizę (rozpoznanie) wielu tysięcy cząstek DNA tworząc nową jakość w takich dziedzinach jak diagnostyka medyczna, genetyka, poszukiwanie nowych leków, toksykologia i innych. W literaturze, poza określeniem „chipy DNA” (ang. DNA chip), które znajduje już sobie miejsce w polskim słownictwie naukowym i popularnym, używa się również takich określeń jak „mikrowiązki DNA” (ang. DNA microarray), czy też rzadziej „wiązki genów” (ang. gene array). Pierwszy chip DNA wyprodukowany został przez firmę Affymetrix z Kalifornii na początku lat 90-dziesiątych, obecnie na rynku znajduje się szereg firm oferujących zestaw urządzeń lub też ich elementy, do analizy DNA technologią chipów DNA. Struktura chipów DNA i zasada ich działania Chipy DNA są to upakowane z dużą gęstością na podłożu stałym sondy DNA o znanej częściowo lub całkowicie sekwencji zasad nukleinowych (Rys. 1). Jako podłoże stałe chipów wykorzystuje się najczęściej płytki szklane, krzemowe lub...