VENTANA anti-CD10 (SP67) Rabbit Monoclonal Primary
Transkrypt
VENTANA anti-CD10 (SP67) Rabbit Monoclonal Primary
DOSTARCZANY ODCZYNNIK VENTANA anti-CD10 (SP67) Rabbit Monoclonal Primary Antibody VENTANA anti-CD10 (SP67) zawiera odczynnik w ilości wystarczającej na 50 testów. Jeden dozownik przeciwciała VENTANA anti-CD10 (SP67) o pojemności 5 ml zawiera około 24,5 μg króliczego przeciwciała monoklonalnego. 790-4506 Przeciwciało jest rozcieńczone w buforowanym fosforanowo roztworze soli, zawierającym białko nośnikowe i 0,05% ProClin 300 jako konserwant. 05857856001 Całkowite stężenie białka w odczynniku wynosi około 3 mg/ml. Stężenie swoistego przeciwciała wynosi około 4,9 μg/ml. Nie jest znana żadna nieswoista reaktywność 50 przeciwciał zawartych w tym produkcie. VENTANA anti-CD10 (SP67) jest rekombinowanym przeciwciałem monoklonalnym, otrzymywanym jako oczyszczony supernatant z hodowli komórkowej. PRZEZNACZENIE Należy zapoznać się z treścią właściwej ulotki firmy VENTANA dołączonej do opakowania Przeciwciało VENTANA antizestawu do detekcji, aby uzyskać szczegółowy opis następujących kwestii: (1) Zasady CD10 (SP67) Rabbit Monoclonal przeprowadzania procedury, (2) Potrzebne materiały i odczynniki niedołączone do Primary Antibody jest skierowane zestawu, (3) Pobieranie próbek i przygotowanie do analizy, (4) Procedury kontroli jakości, przeciwko cząsteczce CD10, (5) Rozwiązywanie problemów, (6) Interpretacja wyników i (7) Ogólne ograniczenia. określanej też jako powszechny MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIEDOSTARCZANE antygen ostrej białaczki limfoblastycznej (common acute Nie dołączono odczynników do barwienia, takich jak zestawy do detekcji firmy lymphoblastic leukemia antigen, VENTANA, ani elementów pomocniczych, takich jak pozytywne i negatywne CALLA). Cząsteczka ta ulega kontrolne preparaty tkankowe. ekspresji na komórkach Nie wszystkie produkty przedstawione w ulotce dołączonej do opakowania są Rysunek 1. Przeciwciało VENTANA antilimfoidalnych we wczesnym dostępne we wszystkich rejonach geograficznych. Należy skonsultować się CD10 (SP67) wykazujące błonowy i/lub stadium różnicowania oraz z lokalnym przedstawicielem odpowiedzialnym za wsparcie techniczne. cytoplazmatyczny wzorzec barwienia w różnych tkankach w tkance chłoniaka. nielimfoidalnych, na przykład PRZECHOWYWANIE na komórkach mięśniowoPo otrzymaniu preparat nieużywany przechowywać w temperaturze 2–8°C. Nie zamrażać. nabłonkowych sutka, w kanalikach żółciowych, na fibroblastach, w rąbku szczoteczkowym W celu zapewnienia właściwego dozowania odczynnika i trwałości przeciwciała, w kanalikach nerkowych oraz w nabłonku jelita cienkiego. Przeciwciało to charakteryzuje po każdym użyciu należy założyć zatyczkę i niezwłocznie umieścić dozownik błonowy i/lub cytoplazmatyczny wzór barwienia. Może być ono stosowane pomocniczo w lodówce w pozycji pionowej. w rozpoznawaniu chłoniaka Burkitta (Burkitt’s lymphoma) i chłoniaka grudkowego Na każdym dozowniku przeciwciała podana jest data ważności. Prawidłowo zarodkowego oraz w klasyfikacji niektórych typów raka, na przykład raka przechowywany odczynnik zachowuje trwałość do daty określonej na etykiecie. nerkowokomórkowego. Przeciwciało jest przeznaczone do jakościowego barwienia Nie należy stosować odczynnika po upływie terminu ważności. skrawków tkankowych utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie. Wynik powinien zostać zinterpretowany przez wykwalifikowanego histopatologa w oparciu PRZYGOTOWANIE PRÓBKI o badania histopatologiczne, odpowiednie dane kliniczne i badania kontrolne. Do stosowania z tym podstawowym przeciwciałem nadają się rutynowo przygotowane To przeciwciało jest przeznaczone do stosowania w diagnostyce in vitro (IVD). tkanki, utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie, pod warunkiem stosowania zestawów do detekcji firmy VENTANA i zautomatyzowanych urządzeń serii VENTANA PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIA BenchMark IHC/ISH. Zalecanym środkiem do utrwalania tkanek jest 10% obojętna, VENTANA anti-CD10 (SP67) to rekombinowane, monoklonalne przeciwciało królicze. zbuforowana formalina.7 Preparaty należy niezwłocznie wybarwić, ponieważ Antygen CD10, znany też jako powszechny antygen ostrej białaczki limfoblastycznej antygenowość ciętych skrawków tkanek może z czasem ulegać osłabieniu. (common acute lymphoblastic leukemia antigen, CALLA), jest integralną glikoproteiną Przy badaniu nieznanych preparatów zaleca się jednoczesne przeprowadzanie kontroli błonową o masie od 90 do 110 kD.1 Cząsteczka CD10 została początkowo uznana za pozytywnej i negatywnej. marker ostrych białaczek limfoblastycznych (acute lymphoblastica leukemias, ALL), jednak w rzeczywistości jest to obojętna metaloendopeptydaza, powodująca OSTRZEŻENIA I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI rozszczepienie różnych peptydów aktywnych biologicznie.2,3 CD10 ulega ekspresji 1. Do stosowania w diagnostyce in vitro (IVD). w różnego rodzaju prawidłowych tkankach, w tym na komórkach limfoidalnych na 2. Wyłącznie do zastosowania profesjonalnego. wczesnych stadiach różnicowania, a także w różnych białaczkach i chłoniakach.4 3. W tym preparacie jako konserwant zastosowano ProClin 300. Został on uznany Wykrywanie antygenu CD10 jest przydatne w określaniu podtypu chłoniaków złośliwych, za środek drażniący i jego kontakt ze skórą może powodować uczulenie. Podczas w tym chłoniaka limfoblastycznego z prekursorowych komórek B, chłoniaka grudkowego pracy z produktem należy stosować środki ostrożności w uzasadnionym stopniu. z komórek ośrodka rozmnażania oraz chłoniaka Burkitta (Burkitt’s lymphoma), Unikać kontaktu odczynników z oczami, skórą i błonami śluzowymi. Stosować 5 w których często stwierdza się ekspresję CD10. Ponadto cząsteczka CD10 może odzież i rękawice ochronne. być wykorzystywana jako część panelu markerów w sytuacji podejrzenia raka 4. Materiały pochodzenia ludzkiego lub zwierzęcego należy traktować jak materiały jasnokomórkowego lub raka brodawkowatego nerki, ponieważ niemal we wszystkich niebezpieczne biologicznie i usuwać z zachowaniem właściwych środków 6 przypadkach tych nowotworów dochodzi do silnej ekspresji CD10. ostrożności. ZASADY PRZEPROWADZANIA PROCEDURY 5. Unikać kontaktu odczynników z oczami i błonami śluzowymi. W przypadku kontaktu odczynników z wrażliwymi miejscami spłukiwać obfitą ilością wody. VENTANA anti-CD10 (SP67) to królicze przeciwciało monoklonalne wytwarzane 6. Skażenie mikrobiologiczne odczynników może skutkować otrzymaniem przeciwko syntetycznemu peptydowi odpowiadającemu ludzkiemu białku CD10. nieprawidłowych wyników. Przeciwciało VENTANA anti-CD10 (SP67) wiąże się z białkiem CD10 w zatopionych 7. W celu uzyskania informacji na temat zalecanej metody utylizacji produktu należy w parafinie skrawkach tkanki i wykazuje schemat barwienia błonowego i/lub skontaktować się z władzami lokalnymi i/lub krajowymi. cytoplazmatycznego. Przeciwciało można wykryć za pomocą zestawu do detekcji OptiView DAB IHC Detection Kit (Cat. No. 760-700/06396500001) lub ultraView 8. Dodatkowe informacje na temat bezpieczeństwa można znaleźć w Karcie charakterystyki produktu oraz w Przewodniku po symbolach i zwrotach dotyczących Universal DAB Detection Kit (Cat. No. 760-500/05269806001). Dodatkowe informacje zagrożeń na stronie www.ventana.com. są dostępne w ulotce dołączonej do opakowania zestawów OptiView DAB IHC Detection Kit lub ultraView Universal DAB Detection Kit. 2016-09-12 FT0700-410m 1/4 1008496PL Rev F PROCEDURA BARWIENIA Przeciwciała podstawowe firmy VENTANA zostały opracowane w celu stosowania w urządzeniach BenchMark IHC/ISH razem z zestawami do detekcji i akcesoriami firmy VENTANA. Opis zalecanego protokołu wybarwiania zawierają Tabela 1 i Tabela 2. Te przeciwciała zostały zoptymalizowane do określonego czasu inkubacji, jednak użytkownik jest zobowiązany do walidacji wyników uzyskanych z zastosowaniem tego odczynnika. Parametry procedur zautomatyzowanych mogą być wyświetlane, drukowane i edytowane zgodnie z procedurą opisaną w Instrukcji obsługi urządzenia. Więcej informacji na temat procedury barwienia immunohistochemicznego znajduje się w ulotce dołączonej do opakowania odpowiedniego zestawu do detekcji firmy VENTANA. Tabela 1. Zalecane protokoły barwienia dla przeciwciała VENTANA anti-CD10 (SP67) z użyciem zestawu do detekcji OptiView DAB IHC oraz urządzenia BenchMark XT, BenchMark GX i BenchMark ULTRA. Rodzaj procedury Metoda Odparafinowanie Wybrana Cell Conditioning (odsłanianie antygenu) Cell Conditioning 1 Urządzenie BenchMark ULTRA 92 min Urządzenie BenchMark XT 92 min Urządzenie BenchMark GX 92 min Inhibitor peroksydazy przed przeciwciałem podstawowym Wybrana Przeciwciało (pierwotne) Urządzenie BenchMark ULTRA 28 min, 36°C Urządzenie BenchMark XT 12 min, 37°C Urządzenie BenchMark GX 32 min, 37°C Ze względu na zmienność utrwalania i obróbki tkanek, jak również zmienność między poszczególnymi urządzeniami i warunkami środowiska laboratoryjnego, konieczne może być wydłużenie lub skrócenie czasu inkubacji przeciwciała pierwotnego i kondycjonowania komórek (cell conditioning) lub ich wstępnej obróbki proteazą, zależnie od próbki, zastosowanej metody detekcji i preferencji użytkownika. Więcej informacji na temat zmiennych związanych z utrwalaniem można znaleźć w publikacji „Immunohistochemistry Principles and Advances”. 8 TKANKA DO DODATNIEJ PRÓBY KONTROLNEJ Zalecana pozytywna kontrola tkankowa to prawidłowy migdałek lub węzeł chłonny. Zarodkowe centralne komórki B powinny wykazywać umiarkowany, ale wyraźny wzór barwienia błonowego. Neutrofile i komórki śródbłonka powinny być również barwione pozytywnie. Komórki B strefy płaszcza i komórki nabłonka płaskiego powinny być negatywne. INTERPRETACJA WYBARWIENIA / OCZEKIWANE WYNIKI Wzór barwienia komórek dla przeciwciała VENTANA anti-CD10 (SP67) jest błonowy i/lub cytoplazmatyczny. SZCZEGÓLNE OGRANICZENIA System detekcji OptiView jest ogólnie bardziej czuły niż system detekcji ultraView. Użytkownik musi walidować wyniki uzyskane przy użyciu tego odczynnika oraz systemów detekcji. CHARAKTERYSTYKA ROBOCZA Przeprowadzono badania barwienia odczynnikiem pod kątem jego swoistości, czułości i powtarzalności, a wyniki zostały zamieszczone w Tabeli 3, Tabeli 4 oraz w części Powtarzalność. Swoistość Tabela 3. Swoistość przeciwciała VENTANA anti-CD10 (SP67) oceniano na podstawie badania próbek tkanek zdrowych, po ich utrwaleniu w formalinie i zatopieniu w parafiniea. Namnażanie ULTRA (8/8 min), XT (12/12 min), GX (8/8 min) Tkanki Liczba pozytywnych/ wszystkich przypadków Barwienie kontrastowe Hematoxylin II, 4 min Mózgb 0/3 Grasicab 0/3 Po barwieniu kontrastowym Bluing, 4 min Móżdżek 0/3 Szpik kostny 1/3 Gruczoł nadnerczyb 1/3 Mezotelium płuca 3/6 * Amplification Kit (REF 760-099) Tabela 2. Zalecane protokoły barwienia dla VENTANA anti-CD10 (SP67) ultraView Universal DAB IHC na urządzeniach BenchMark XT, BenchMark GX i BenchMark ULTRA. Rodzaj procedury Metoda Odparafinowanie Wybrana Cell Conditioning (odsłanianie antygenu) Cell Conditioning 1 Urządzenie BenchMark ULTRA 92 min Urządzenie BenchMark XT: przedłużona (90 min) Urządzenie BenchMark GX: przedłużona (90 min) Przeciwciało (pierwotne) Urządzenie BenchMark ULTRA 20 min, 36°C Urządzenie BenchMark XT 16 min, 37°C Urządzenie BenchMark GX 28 min, 37°C Namnażanie* ULTRA (królicze), XT, GX Barwienie kontrastowe Hematoxylin II, 4 min Po barwieniu kontrastowym Bluing, 4 min Tkanki Liczba pozytywnych/ wszystkich przypadków Jajnik 0/3 Płuco 3/3 Trzustkab 0/3 Serce 0/3 Węzeł chłonny 2/3 Przełyk 0/3 Przytarczyce 3/3 Żołądek 0/3 Przysadkab 0/3 Jelito cienkie 3/3 Jądroc 0/3 Okrężnicab 0/3 Tarczyca 0/3 Wątroba 3/3 Sutek 3/3 Ślinianka 3/3 Śledzionab 2/3 Nerka 3/3 Migdałek 3/3 Gruczoł krokowy 3/3 Endometrium 3/4 Szyjka macicyb 0/3 Mięśnie szkieletowe 4/4 Skóra 0/3 Nerw obwodowy 2/3 Pęcherz moczowy 3/3 * Amplification Kit (REF 760-080) 2016-09-12 FT0700-410m 2/4 1008496PL Rev F a przypadki pozytywne wykazują prawidłowe barwienie jednego lub więcej spośród następujących struktur: rąbek szczoteczkowy, komórki mięśniowo-nabłonkowe, płucne komórki pęcherzykowe, kanaliki żółciowe, kanaliki proksymalne, kłębuszek nerkowy, komórki gruczołu krokowego i limfocyty pochodzące z centrum zarodkowego Nowotwór b barwienie komórek śródbłonka i limfocytów (gruczołu krokowego) c ogniskowe barwienie jądrowe komórek spermatogenetycznych Czułość Tabela 4. Czułość przeciwciała VENTANA anti-CD10 (SP67) określono poprzez badanie utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie próbek tkanek nowotworowych. Nowotwór Liczba pozytywnych/ wszystkich przypadków Liczba pozytywnych/ wszystkich przypadków Glejak z martwicą 1/1 Oponiak atypowy 0/1 Wyściółczak złośliwy 0/1 Skąpodrzewiak 0/1 Surowiczy gruczolakorak jajnika 0/1 Gruczolakorak jajnika 0/1 Rak komórek wyspowych 1/1 Gruczolakorak trzustki 0/1 Nasieniak 0/1 Nasieniak ze skrzepliną guza naczyniowego (nieliczny) 0/1 Rak rdzeniowy tarczycy 0/1 Rak brodawkowaty tarczycy 1/1 Inwazyjny rak przewodowy 0/3 Niskozróżnicowany rak drobnokomórkowy płuca 0/1 Rak płaskonabłonkowy płuca 1/1 Gruczolakorak płuca 0/1 Rak neuroendokrynny przełyku 0/1 Gruczolakorak przełyku 0/1 Rak z komórek sygnetowatych żołądka 0/1 Gruczolakorak jelita cienkiego 0/1 Mięsak podścieliskowy jelita cienkiego 0/1 Gruczolakorak okrężnicy 0/1 Nowotwór z komórek śródmiąższowych otrzewnej 0/1 Gruczolakorak (odbytu) Gruczolakorak (stopień Gleasona: 3, punktacja Gleasona: 3+4) (gruczołu krokowego) 1/1 Mięśniak gładkokomórkowy macicy 0/1 Gruczolakorak macicy 0/1 Rak jasnokomórkowy macicy 0/1 Rak płaskonabłonkowy szyjki macicy 0/2 Mięśniakomięsak prążkowany zarodkowy 0/1 Czerniak złośliwy (odbytu) 0/1 Rak podstawnokomórkowy 0/1 Rak płaskonabłonkowy skóry 0/1 Międzybłoniak złośliwy 1/1 Rak przejściowokomórkowy pęcherza moczowego 1/1 Mięsak gładkokomórkowy o niskim stopniu złośliwości 0/1 Kostniakomięsak (nieliczne) 0/1 Mięśniakomięsak z komórek wrzecionowatych 0/1 Mięsak gładkokomórkowy o umiarkowanym stopniu złośliwości 0/1 Chłoniak rozlany z limfocytów B wielkokomórkowy 37/98 Chłoniak Hodgkina (ziarnica złośliwa) 0/3 Chłoniak z komórek B inaczej nieokreślony 4/30 Chłoniak strefy brzeżnej tkanki związanej ze śluzówką (MALT) 1/3 Chłoniak z komórek płaszcza 3/9 Chłoniak anaplastyczny wielkokomórkowy 0/1 Chłoniak limfocytowy z małych komórek 1/1 Chłoniak z limfocytów T 3/13 Rak brodawkowaty nerki 3/7 Gruczolakorak nerki 0/1 Rak nabłonka dróg moczowych 9/13 Onkocytoma 0/2 RCC barwnikooporny 1/8 0/1 Wariant eozynofilowy barwnikoopornego raka komórek nerkowych 1/1 Złośliwy guz podścieliskowy odbytu o umiarkowanej złośliwości 0/1 Rak kolczystokomórkowy nerki 2/4 Rak wątrobowokomórkowy 0/1 Rak rdzeniowy nerki 0/1 Wątrobiak zarodkowy 0/1 Niskozróżnicowany rak NOS 1/1 52/56 Nerczak płodowy 2/3 1/1 Chłoniak Burkitta 1/1 Rak jasnokomórkowy nerek Gruczolakorak (stopień Gleasona: 4, punktacja Gleasona: 4+5) 2016-09-12 FT0700-410m 3/4 1008496PL Rev F Powtarzalność Zakończone badania powtarzalności dla VENTANA anti-CD10 (SP67) wykazały: • Odtwarzalność wyników między partiami przeciwciał. • Odtwarzalność wyników w jednym badaniu i między badaniami z zastosowaniem urządzenia BenchMark XT. • Odtwarzalności wyników w obrębie platformy przy użyciu urządzeń BenchMark XT, BenchMark GX oraz BenchMark ULTRA. • Odtwarzalności wyników między platformami pomiędzy urządzeniami BenchMark XT, BenchMark GX i BenchMark ULTRA. Wyniki wszystkich badań mieściły się w zakresie dopuszczalnej normy. PIŚMIENNICTWO 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Shipp MA, Richardson NE, Sayre PH, et al. Molecular cloning of the common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) identifies a type II integral membrane protein. Proc Natl Acad Sci USA. 1988;85:4819-4823. Kaufmann O, Flath B, Spath-Schwable E, et al. Immunohistochemical detection of CD10 with monoclonal antibody 56C6 on paraffin sections. Am J Clin Pathol. 1999;111:117-122. Shipp MA, Vijayaraghavan J, Schmidt EV, et al. Common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) is active neutral endopeptidase 24.1 1 (“enkephaljnase”): direct evidence bycDNA transfection analysis. Proc Natl Acad Sci USA. 1989;86:297-301. Arber DA, Weiss LM. CD10: a review. Appl lrnnamohistock mism 1997;5:125-140. Chu P, Chang K, Weiss L, et al. Immunohistochemical Detection of CD10 in Paraffin Sections of Hematopoietic Neoplasms: A comparison with flow cytometry detection in 56 cases. Appl Immunohistochem & Molec Morphol. 2000;8:257-262. Avery A, Beckstead J, Renshaw A. Use of Antibodies to RCC and CD10 in the differential diagnosis of renal neoplasms. Am J Surg Pathol. 2000;24:203-210. Carson F, Hladik, C. Histotechnology A Self Instructional Text, 3rd edition. Hong Kong: American Society for Clinical Pathology Press; 2009. Roche PC, Hsi ED. Immunohistochemistry-Principles and Advances. Manual of Clinical Laboratory Immunology, 6th edition. In: NR Rose, ed. ASM Press; 2002. WŁASNOŚĆ INTELEKTUALNA BENCHMARK, OPTIVIEW, ULTRAVIEW, VENTANA oraz logo VENTANA są znakami towarowymi grupy Roche. Wszystkie pozostałe znaki towarowe stanowią własność odpowiednich właścicieli. © 2016 Ventana Medical Systems, Inc. DANE KONTAKTOWE Ventana Medical Systems, Inc. 1910 E. Innovation Park Drive Tucson, Arizona 85755 USA +1 520 887 2155 +1 800 227 2155 (USA) www.ventana.com Roche Diagnostics GmbH Sandhofer Strasse 116 D-68305 Mannheim Germany 2016-09-12 FT0700-410m 4/4 1008496PL Rev F