Załącznik nr 1 - Instytut Biochemii i Biofizyki PAN

Załącznik nr 1 - Instytut Biochemii i Biofizyki PAN

Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawińskiego 5a 02-106 Warszawa |Tel. +48 22 592 21 45 |Fax +48 22 529 21 90 | [email protected] |www.ibb.waw.pl
Załącznik nr 1
UBM PN 11 15
Zamawiający:
Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawińskiego 5a, 02-106 Warszawa
Tel. 22 – 592-21-45
Fax. 22 – 529 21 90
http://www.ibb.waw.pl
[email protected]
SZCZEGÓŁOWY OPIS PROCEDUR DOŚWIADCZALNYCH
1. Usługa badawcza polegać będzie na domięśniowej immunizacji (w mięsień czterogłowy lub dwugłowy
uda) samic myszy szczepu Balb/c. Pierwsza dawka szczepionki powinna być podana w 6 tygodniu życia
myszy. W celu uzyskania jak najlepszej odpowiedzi immunologicznej testowane będą różne dawki
preparatu oraz schematy podania. W doświadczeniu będzie wykorzystanych 200 myszy. W trakcie
prowadzenia doświadczenia konieczne jest podzielenie zwierząt na grupy eksperymentalne liczące do
10 osobników. Zwierzęta powinny być trzymane w plastikowych indywidualnie wentylowanych (IVC)
klatkach z wyściółką z drobno zmielonych trocin przy temperaturze otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ±
5% z wolnym dostępem do wody i paszy, w systemie sztucznej doby przy 12-godzinnym oświetleniu.
Przewiduje się od 2 do 3 szczepień w dwutygodniowych odstępach co łącznie daje sumę od 400 do 600
szczepień. Krew pobierana będzie przyżyciowo z koniuszka serca tydzień lub dwa tygodnie po każdej
immunizacji. Konieczne jest pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby po zwirowaniu było
możliwe uzyskanie min. 30 ul surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Ogółem przewiduje się od
600 do 800 pobrań krwi. Po skończonym doświadczeniu konieczne jest pobranie narządów do badań, w
związku z tym wykonawca powinien posiadać salę chirurgiczną spełniającą odpowiednie warunki
sanitarne. Ze względu na charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których będą
wykonywane eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz.
2. Usługa badawcza polegać będzie na podskórnej i śródskórnej immunizacji zwierząt. Doświadczenia
przeprowadzone będą na 6-tygodniowych samicach myszy szczepu Balb/c. W celu uzyskania jak
najwyższej odpowiedzi oraz sprawdzenia najdogodniejszej formy immunizacji różne warianty antygenu
będą podawane w różnych dawkach i w obecności dwóch różnych adiuwantów. W eksperymencie
przewiduje się wykorzystanie 170 myszy. W trakcie prowadzenia doświadczenia konieczne jest
podzielenie zwierząt na grupy eksperymentalne liczące 10 osobników. Zwierzęta powinny być trzymane
po 4-5 sztuk w plastikowych indywidualnie wentylowanych (IVC) klatkach z wyściółką z drobno
zmielonych trocin przy temperaturze otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ± 5% z wolnym dostępem do
wody i paszy, w systemie sztucznej doby przy 12-godzinnym oświetleniu. Przewiduje się od 2 do 3
szczepień w 3-tygodniowych odstępach co łącznie daje sumę od 340 do 510 szczepień. W
eksperymencie planuje się pobranie krwi kontrolnej dwa tygodnie po każdej immunizacji. To daje 170 x
3 = 510 pobrań. Dodatkowo dla najlepszego antygenu planuje się badanie kinetyki odpowiedzi
immunologicznej a więc 10 myszy będzie miało pobieraną krew co tydzień (po podaniu drugiej i trzeciej
dawki antygenu) co daje jeszcze 4 dodatkowe pobrania. W sumie liczba przewidywanych pobrań wynosi
514. Krew pobierana będzie przyżyciowo z koniuszka serca tydzień lub dwa tygodnie po każdej
immunizacji. Konieczne jest pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby po zwirowaniu było
możliwe uzyskanie min. 30 ul surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Ogółem przewiduje się od
500 do 700 pobrań krwi. Po skończonym doświadczeniu konieczne jest pobranie narządów do badań, w
związku z tym wykonawca powinien posiadać salę operacyjną spełniającą odpowiednie warunki
sanitarne. Ze względu na charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których będą
wykonywane eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz.
3. Usługa badawcza polegać będzie na doustnej immunizacji samic myszy szczepu Balb/c poprzez
dożołądkowe podanie preparatów bakteryjnych (sondą). Pierwsza dawka szczepionki powinna być
Strona | 1
Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawińskiego 5a 02-106 Warszawa |Tel. +48 22 592 21 45 |Fax +48 22 529 21 90 | [email protected] |www.ibb.waw.pl
Załącznik nr 1
UBM PN 11 15
podana w 6 tygodniu życia myszy. W celu uzyskania jak najlepszej odpowiedzi testowane będą różne
preparaty bakteryjne oraz schematy podania. W doświadczeniu będzie wykorzystanych łącznie 150
myszy. W trakcie prowadzenia doświadczenia konieczne jest podzielenie zwierząt na grupy
eksperymentalne liczące do 10 osobników. Zwierzęta powinny być trzymane w plastikowych
indywidualnie wentylowanych (IVC) klatkach z wyściółką z drobno zmielonych trocin przy temperaturze
otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ± 5% z wolnym dostępem do wody i paszy, w systemie sztucznej
doby przy 12-godzinnym oświetleniu. Przewiduje się od 5 do 7 szczepień w 2-3 tygodniowych odstępach
co łącznie daje sumę od 750 do 1050 szczepień W eksperymencie planuje się pobranie krwi kontrolnej
przed podaniem pierwszej dawki antygenu a następnie dwa tygodnie po każdej immunizacji. Ogółem
przewiduje się od 900 pobrań krwi Konieczne jest pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby
po zwirowaniu było możliwe uzyskanie min. 30 ul surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Z
jednoczesnym pobraniem krwi, przewiduje się również pobieranie odchodów mysich do dalszych
doświadczeń. Ze względu na charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których
będą wykonywane eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz. Po
zakończeniu doświadczenia zwierzęta poddane zostaną humanitarnej eutanazji poprzez
przedawkowanie CO2.
Strona | 2