Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk

Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawioskiego 5a 02-106 Warszawa |Tel. +48 22 592 21 45 |Fax +48 22 529 21 90 | [email protected] |www.ibb.waw.pl
załącznik nr 1
UBM PN 01 14
Zamawiający:
Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawioskiego 5a, 02-106 Warszawa
Tel. 22 – 592-21-45
Fax. 22 – 529 21 90
http://www.ibb.waw.pl
[email protected]
SZCZEGÓŁOWY OPIS PROCEDUR DOŚWIADCZALNYCH
1. Usługa badawcza polegad będzie na domięśniowej immunizacji (w mięsieo czterogłowy lub dwugłowy
uda) samic myszy szczepu Balb/c. Pierwsza dawka szczepionki powinna byd podana w 6 tygodniu życia
myszy. W celu uzyskania jak najlepszej odpowiedzi immunologicznej testowane będą różne dawki
preparatu oraz schematy podania. W doświadczeniu będzie wykorzystanych 250 myszy. W trakcie
prowadzenia doświadczenia konieczne jest podzielenie zwierząt na grupy eksperymentalne liczące do
10 osobników. Zwierzęta powinny byd trzymane w plastikowych indywidualnie wentylowanych (IVC)
klatkach z wyściółką z drobno zmielonych trocin przy temperaturze otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ±
5% z wolnym dostępem do wody i paszy, w systemie sztucznej doby przy 12-godzinnym oświetleniu.
Przewiduje się od 2 do 3 szczepieo w dwutygodniowych odstępach co łącznie daje sumę od 500 do 750
szczepieo. Krew pobierana będzie przyżyciowo z koniuszka serca tydzieo lub dwa tygodnie po każdej
immunizacji. Konieczne jest pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby po zwirowaniu było
możliwe uzyskanie min. 30 ul surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Ogółem przewiduje się od
750 do 1000 pobrao krwi. Po skooczonym doświadczeniu konieczne jest pobranie narządów do badao,
w związku z tym wykonawca powinien posiadad salę chirurgiczną spełniającą odpowiednie warunki
sanitarne. Ze względu na charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których będą
wykonywane eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz.
2. Usługa badawcza polegad będzie na podskórnej i śródskórnej immunizacji zwierząt. Doświadczenia
przeprowadzone będą na 6-tygodniowych samicach myszy szczepu Balb/c. W celu uzyskania jak
najwyższej odpowiedzi oraz sprawdzenia najdogodniejszej formy immunizacji różne warianty antygenu
będą podawane w różnych dawkach i w obecności dwóch różnych adiuwantów. W eksperymencie
przewiduje się wykorzystanie 210 myszy. W trakcie prowadzenia doświadczenia konieczne jest
podzielenie zwierząt na grupy eksperymentalne liczące 10 osobników. Zwierzęta powinny byd trzymane
po 4-5 sztuk w plastikowych indywidualnie wentylowanych (IVC) klatkach z wyściółką z drobno
zmielonych trocin przy temperaturze otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ± 5% z wolnym dostępem do
wody i paszy, w systemie sztucznej doby przy 12-godzinnym oświetleniu. Przewiduje się od 2 do 3
szczepieo w 3-tygodniowych odstępach co łącznie daje sumę od 480 do 720 szczepieo. W
eksperymencie planuje się pobranie krwi kontrolnej na tydzieo przed podaniem pierwszej dawki
antygenu a następnie dwa tygodnie po każdej immunizacji. To daje 240 x 4 = 960 pobrao. Dodatkowo
dla najlepszego antygenu planuje się badanie kinetyki odpowiedzi immunologicznej a więc 10 myszy
będzie miało pobieraną krew co tydzieo (po podaniu drugiej i trzeciej dawki antygenu) co daje jeszcze 4
dodatkowe pobrania. W sumie liczba przewidywanych pobrao wynosi 964. Krew pobierana będzie
przyżyciowo z koniuszka serca tydzieo lub dwa tygodnie po każdej immunizacji. Konieczne jest
pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby po zwirowaniu było możliwe uzyskanie min. 30 ul
surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Ogółem przewiduje się od 630 do 840 pobrao krwi. Po
skooczonym doświadczeniu konieczne jest pobranie narządów do badao, w związku z tym wykonawca
powinien posiadad salę operacyjną spełniającą odpowiednie warunki sanitarne. Ze względu na
charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których będą wykonywane
eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz.
Strona | 1
Instytut Biochemii i Biofizyki Polskiej Akademii Nauk
ul. A. Pawioskiego 5a 02-106 Warszawa |Tel. +48 22 592 21 45 |Fax +48 22 529 21 90 | [email protected] |www.ibb.waw.pl
załącznik nr 1
UBM PN 01 14
3. Usługa badawcza polegad będzie na doustnej immunizacji samic myszy szczepu Balb/c poprzez
dożołądkowe podanie preparatów bakteryjnych (sondą). Pierwsza dawka szczepionki powinna byd
podana w 6 tygodniu życia myszy. W celu uzyskania jak najlepszej odpowiedzi testowane będą różne
preparaty bakteryjne oraz schematy podania. W doświadczeniu będzie wykorzystanych łącznie 150
myszy. W trakcie prowadzenia doświadczenia konieczne jest podzielenie zwierząt na grupy
eksperymentalne liczące do 10 osobników. Zwierzęta powinny byd trzymane w plastikowych
indywidualnie wentylowanych (IVC) klatkach z wyściółką z drobno zmielonych trocin przy temperaturze
otoczenia 22 ± 2°C i wilgotności 55 ± 5% z wolnym dostępem do wody i paszy, w systemie sztucznej
doby przy 12-godzinnym oświetleniu. Przewiduje się od 5 do 7 szczepieo w 2-3 tygodniowych odstępach
co łącznie daje sumę od 750 do 1050 szczepieo W eksperymencie planuje się pobranie krwi kontrolnej
przed podaniem pierwszej dawki antygenu a następnie dwa tygodnie po każdej immunizacji. Ogółem
przewiduje się od 900 pobrao krwi Konieczne jest pobranie odpowiedniej ilości krwi od myszy tak, aby
po zwirowaniu było możliwe uzyskanie min. 30 ul surowicy do dalszych testów (ELISA, test HI). Z
jednoczesnym pobraniem krwi, przewiduje się również pobieranie odchodów mysich do dalszych
doświadczeo. Ze względu na charakter doświadczenia wymagane jest aby pomieszczenia, w których
będą wykonywane eksperymenty było oddzielone od środowiska zewnętrznego za pomocą śluz. Po
zakooczeniu doświadczenia zwierzęta poddane zostaną humanitarnej eutanazji poprzez
przedawkowanie CO2.
.................................................................................
(data i czytelny podpis Wykonawcy)
Strona | 2