M42 Microgen Salmonella lateks

M42 MICROGEN® Salmonella
PRZEZNACZENIE TESTU
®
MICROGEN Salmonella jest szybkim testem aglutynacji lateksowej przeznaczonym do potwierdzenia
identyfikacji prawdopodobnych kolonii Salmonella z agarowych podłoŜy wybiórczych, hodowanych na stałych
podłoŜach wybiórczych z próbek ludzkiego kału lub z Ŝywności. Zestaw jest przeznaczony jedynie do
profesjonalnego uŜytku.
ZASADA TESTU
Cząsteczki lateksowe pokryte są poliwalentnymi przeciwciałami przeciw szerokiemu zakresowi antygenów
Salmonella. Kiedy zmiesza się je z zawiesiną szczepu Salmonella, cząsteczki lateksowe aglutynują w szybkim tempie
tworząc widoczne grudki. MICROGEN® Salmonella wykrywa > 99% ruchliwych gatunków Salmonella, a
wczesne badania wykazały takŜe, Ŝe moŜna wykryć konkretne nieruchliwe gatunki.
SKŁAD TESTU
M42a Odczynnik lateksowy Salmonella: 2,5 ml
Cząsteczki lateksowe pokryte króliczymi przeciwciałami przeciw antygenom Salmonella. Utrwalone 0,099%
azydkiem sodowym (niebieska nakrętka).
M42b Kontrola dodatnia: 2,5 ml
Inaktywowany preparat antygenów Salmonella utrwalony 0,099% azydkiem sodowym (czarna nakrętka).
M40 0,85% izotoniczny roztwór soli: 5,0 ml
Utrwalony 0,099% azydkiem sodowym (biała nakrętka).
Instrukcja uŜycia
Jednorazowe karty reakcyjne
Jednorazowe patyczki do mieszania
DODATKOWE MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE WCHODZĄCE W SKŁAD TESTU
• ezy bateriologiczne
ŚRODKI OSTROśNOŚCI
Bezpieczeństwo:
1. Odczynniki dostarczone w zestawie słuŜą jedynie do diagnostyki in vitro.
2. Azydek sodowy uŜywany jako konserwant w zestawie odczynników moŜe reagować z ołowianą
i miedzianą armaturą, tworząc potencjalnie wybuchowe azydki metali. Utylizować zalewając duŜą
objętością wody, aby zapobiec osadzaniu się azydków.
3. Odpowiednie środki ostroŜności naleŜy podjąć podczas pracy i usuwania potencjalnych organizmów
patogennych. OdkaŜać materiał zakaźny podchlorynem sodowym w końcowym stęŜeniu 3% przez 30
min. Płynne ścieki zawierające kwas powinno się neutralizować przed dalszą obróbką.
4. Kontrola dodatnia została inaktywowana podczas procesu produkcji. Jednak powinno się z nią
obchodzić jak z materiałem potencjalnie zakaźnym.
Środki proceduralne:
®
1. MICROGEN Salmonella powinien być uŜywany zgodnie z dołączoną instrukcją.
2. Pozwolić wszystkim odczynnikom na osiągnięcie temperatury pokojowej przed uŜyciem.
3. Nie rozcieńczać Ŝadnego odczynnika z zestawu.
4. Nie mieszać odczynników z róŜnych partii i zestawów.
5. Nie zamraŜać Ŝadnych odczynników.
6. UwaŜać, Ŝeby zakraplacz z odczynnikiem lateksowym nie dotknął próbek bakteryjnych.
7. Zachować ostroŜność podczas zapisywania wyników aglutynacji. Reakcje, które są zbyt silne lub
„włókniste” mogą nie być prawdziwą aglutynacją.
8. Przed uŜyciem upewnić się, Ŝe karta reakcyjna jest czysta i sucha.
M42 MICROGEN® Salmonella
Strona 1
PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAśNOŚCI
®
MICROGEN Salmonella powinien być przechowywany w temp. 2 - 8°C, kiedy nie jest uŜywany. Zestawu nie
naleŜy uŜywać po upływie daty waŜności wydrukowanej na naklejce na kartonie.
PRÓBKI
Testem MICROGEN™ Salmonella moŜna badać kolonie rosnące na płytkach z agarem wybiórczym.
PROCEDURA WYKONAWCZA
Kontrola jakości:
NaleŜy za kaŜdym razem, kiedy uŜywa się zestaw, wykonać następujące sprawdziany:
1. Kontrola odczynnika: dodać 1 kroplę lateksu MICROGEN Salmonella (M42a) do 1 kropli roztworu soli
M40 na tym samym polu na karcie reakcyjnej. Wymieszać i rozprowadzić płyn na całej wewnętrznej
powierzchni zaznaczonego pola jednorazowym patyczkiem. Obracać kartę delikatnie przez 2 minuty
i obserwować, czy wystąpi aglutynacja. JeŜeli widać jakąkolwiek aglutynację, albo lateks, albo sól
fizjologiczna są zanieczyszczone i powinny być wyrzucone.
2. Kontrola dodatnia: dodać jedną kroplę kontroli dodatniej (M42b) do 1 pola karty reakcyjnej. Dodać
1 kroplę lateksu MICROGEN Salmonella (M42a) na to samo pole i wymieszać. Nie pozwolić, Ŝeby
zakraplacz od lateksu dotknął kontrolę dodatnią. Obracać delikatnie kartę. Po 2 minutach powinna
być widoczna aglutynacja, wskazująca na wynik dodatni. JeŜeli nie widać aglutynacji, powinno się uŜyć
świeŜy zestaw.
Sposób wykonania testu:
1. Nanieść 1 kroplę soli fizjologicznej (M40) na pole reakcyjne na karcie reakcyjnej.
2. Przy pomocy ezy pobrać kolonię z wybiórczej płytki agarowej i zawiesić w kropli soli na karcie
reakcyjnej, aby otrzymać gęstą, jednorodną zawiesinę. Zawiesinę powinno się wykonywać jedynie
z kolonii, których morfologia przypomina Salmonella spp.
3. Obracać delikatnie kartę przez 2 minuty i obserwować, czy zachodzi aglutynacja lub wykłaczanie. JeŜeli
zawiesina pozostaje jednorodna, przejść do punktu 4 (zob. Ograniczenia Testu punkt 1). JeŜeli zawiesina
jest „włóknista” lub „ziarnista”, próbki nie moŜna badać testem MICROGEN Salmonella, poniewaŜ
moŜe on dawać fałszywie dodatnią aglutynację, kiedy doda się lateks. W tym przypadku naleŜy uŜyć
alternatywna metodę badawczą.
4. Wymieszać lateks MICROGEN Salmonella przez delikatne odwracanie buteleczki i dodać 1 kroplę obok
zawiesiny bakteryjnej. Nie pozwolić, Ŝeby zakraplacz z lateksem dotknął zawiesinę bakteryjną.
5. Wymieszać zawiesinę czystym patyczkiem i obrócić delikatnie kartę 2 lub 3 razy. Nadmierne obracanie
karty nie jest konieczne. Obserwować oznaki aglutynacji podczas maksymalnie 2 minut.
6. Po odczytaniu wyrzucić uŜyte karty i patyczki do mieszania do odpowiedniego środka dezynfekcyjnego.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
Aglutynacja w ciągu 2 minut jest wynikiem dodatnim i wskazuje na obecność Salmonella w próbce. Brak
aglutynacji wskazuje, Ŝe Salmonella jest nieobecna w badanym posiewie.
OGRANICZENIA TESTU
1. Wyniki powinny być interpretowane w połączeniu ze wszystkimi dostępnymi informacjami klinicznymi
i laboratoryjnym.
2. Wiadomo, Ŝe szorstkie szczepy Salmonella powodują nieswoistą aglutynację w samej soli i dlatego nie
®
mogą być sprawdzane testem MICROGEN Salmonella
3. MICROGEN® Salmonella lla moŜe nie wykrywać pewnych nieruchliwych szczepów Salmonella.
4. Pewne szczepy oksydazo – dodatnie mogą dawać reakcje fałszywie dodatnie.
5. Stare muzealne hodowle Enterobacteriaceae na skosach z agarem odŜywczym mogą powodować nieswoistą
aglutynację, podczas gdy stare hodowle Salmonella mogą dawać fałszywie ujemne wyniki. Do badania
naleŜy uŜywać tylko świeŜe przesiewy.
6. Identyfikacja przy pomocy testu MICROGEN® Salmonella jest identyfikacją wstępną i wszystkie
dodatnie wyniki powinny zostać potwierdzone przez dalsze testy identyfikacyjne i pełne typowanie
serologiczne czystej hodowli.
M42 MICROGEN® Salmonella
Strona 2
®
Porównano MICROGEN Salmonella z dobrze scharakteryzowanym dostępnym w sprzedaŜy testem aglutynacji
lateksowej dla Salmonella. Przy pomocy obu testów przebadano 126 szczepów Salmonella spp. oraz 58
potencjalnie reagujących krzyŜowo bakterii.
®
Komercyjny
dodatnie
test
ujemne
lateksowy
ogółem
Czułość:
Swoistość:
Zgodność:
MICROGEN Salmonella
dodatnie
ujemne
135**
1*
ogółem
136
0
48***
48
135
49
184
135/136 = 99,3%
48/48 = 100%
183/184= 99,5%
*1 próbka dawała ujemny wynik MICROGEN® Salmonella, ale wynik był niepewny w teście komercyjnym.
Próbka była później zidentyfikowana jako Salmonella bergen.
**Spośród 135 szczepów w tej grupie, 11 reagowało krzyŜowo w obu testach. Były to szczepy C. diversus (1),
A. baumanii (2), P. stuartii (1), B.cereus (2), S. aureus (4) i Strep. spp. (1).
Jednak wszystkie te szczepy albo nie rosły na podłoŜach wybiórczych, albo wykazywały bardzo nietypową
morfologię na tych podłoŜach. W przypadku B. cereus, aglutynacja była atypowa (włóknista).
***1 szczep S. dublin był ujemny w obu testach.
ODTWARZALNOŚĆ
Powtarzalność wewnątrz serii ustalono, badając czułość i swoistość produktu z jednej serii dla seryjnych
rozcieńczeń antygenu referencyjnego, dodatniej kontroli z zestawu oraz panelu 34 próbek bakteryjnych. RóŜne
osoby wykonały testy przy 3 róŜnych okazjach. Miana końcowe otrzymane dla referencyjnych/kontrolnych
antygenów i wyniki jakościowe dla panelu były identyczne we wszystkich trzech oznaczeniach
Odtwarzalność między seriami ustalano, badając czułość i swoistość 3 serii produktu wobec seryjnych
rozcieńczeń antygenu referencyjnego i kontroli dodatnich z zestawów oraz panelu 34 próbek bakteryjnych.
ZróŜnicowanie końcowych rozcieńczeń było minimalne między 3 seriami (1 podwójne rozcieńczenie),
a jakościowe wyniki dla panelu zgadzały się w 100%.
GRASO Biotech
Krąg 4A. 83-200 Starogard Gdański
Dział Obsługi Klienta: 058 562 30 21, 058 562 56 61 do 64 wew. 30,
[email protected]; www.podloza.pl, www.grasobiotech.pl
M42 MICROGEN® Salmonella
Strona 3