Æwiczenie 5

Kierunek: TECHNOLOGIA ZYWNOŚCI I ŻYWIENIE CZOWIEKA
IV rok studiów, studia niestacjonarne
Ćwiczenia: GOSPODARKA ENERGETYCZNA, WODNA I ŚCIEKOWA
MIKROBIOLOGIA
Ćwiczenie 3.
Temat: Badania mikrobiologiczne w sanitarnej ocenie wody
czas trwania: 1, 5 godz.
Część teoretyczna
1) Naturalne wody mineralne oraz naturalne wody źródlane
2) Bakterie jako wskaźniki sanitarne
3) Oznaczanie NLP (miana) bakterii grupy coli metodą fermentacyjną probówkową
4) Drobnoustroje chorobotwórcze dla człowieka obecne w wodzie i ściekach
Część praktyczna
1) Pobieranie próbek wody wodociągowej
2) Oznaczanie liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych
3) Oznaczanie NLP (miana) bakterii grupy coli metodą fermentacyjną probówkową ─
badania wstępne
4) Oznaczenie paciorkowców kałowych (enteokoków)
Materiał: woda wodociągowa i woda źródlana;
1) Pobieranie próbek wody wodociągowej:
– wylot korka dokładnie wymyć, wytrzeć czystym ręcznikiem lub ścierką,
dokładnie opalić płomieniem palnika;
– spuszczać wodę w ciągu 1 minuty, przy możliwie największym przepływie,
przy którym woda nie rozpryskuje się;
– po upływie tego czasu, nie przerywając strumienia, pobrać próbkę wody do
jałowych butelek, napełniając je do ¾ pojemności i zamknąć korkiem
(wszystkie czynności wykonać z zachowaniem warunków aseptycznych);
– butelki zaopatrzyć w etykiety uwzględniając: date, godzinę, miejsce pobrania
próbki i nazwisko pobierającego;
– prawidłowo opisaną etykietę zamieścić w sprawozdaniu;
…………………………………….
……………………………………..
……………………………………..
1
Kierunek: TECHNOLOGIA ZYWNOŚCI I ŻYWIENIE CZOWIEKA
IV rok studiów, studia niestacjonarne
Ćwiczenia: GOSPODARKA ENERGETYCZNA, WODNA I ŚCIEKOWA
MIKROBIOLOGIA
2) Oznaczanie liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych
1.
2.
3.
4.
Wykonanie oznaczenia:
Oznaczenie wykonać metodą płytkową Kocha, stosując posiew głębinowy na podłoże
agarowe odżywcze (MPA). Posiew wody wodociągowej oraz wody z basenu
kąpielowego wykonać z prób nierozcieńczonych (1 cm3) oraz z rozcieńczeń 10−1.
Inkubację bakterii psychrofilnych prowadzić w temp. 20˚C w ciągu 72+/−2 godzin, a
mezofilnych w temp. 37˚C przez 24+/−2 godzin
Po okresie inkubacji policzyć wyrosłe kolonie. Do określenia liczby kolonii, przy
posiewie wody powierzchniowej i ścieków, wybrać płytki, na których wyrosło od 30
do 300 kolonii. W razie stosowania rozcieńczeń próbki, należy liczbę kolonii
pomnożyć przez odwrotność rozcieńczenia.
Wyniki badań wpisać do tabeli 1.
Wynik oznaczenia podać jako liczbę bakterii psychrofilnych oraz liczbę
bakterii mezofilnych w 1 cm3 wody.
Tabela 1. Zestawienie analizy bakteriologicznej wody do celów sanitarnych − liczba bakterii
psychrofilnych i mezofilnych.
Badana próba:
Oznaczenie
Warunki hodowli
podłoże temp. i czas
hodowli
Liczba kolonii w ilości
badanej próby (cm3)
rozcieńczenie
Liczba kolonii
w 1 cm3
Ogólna psychrofilnych
liczba
bakterii mezofilych
Wnioski:
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
2
Kierunek: TECHNOLOGIA ZYWNOŚCI I ŻYWIENIE CZOWIEKA
IV rok studiów, studia niestacjonarne
Ćwiczenia: GOSPODARKA ENERGETYCZNA, WODNA I ŚCIEKOWA
MIKROBIOLOGIA
3. Oznaczanie NLP (miana) bakterii grupy coli metodą fermentacyjną probówkową
Wykonanie oznaczeń:
Etap I − Badania wstępne:
1. Wykonać posiew odpowiedniej objętości wody na podłoże laktozowe z
purpurą bromokrezolową;
2. Posiane próby inkubować w temp. 37˚C w ciągu 24−48 godz.;
3. Wyniki badań wpisać do tabeli 2.
badania
wstępne
Etap I
Tabela 2. Zestawienie wyników analizy bakteriologicznej wody do celów sanitarnych −
NPL w 100 cm3 oraz miano coli oznaczone metodą fermentacyjną probówkową.
Badana próba:
Liczba probówek
Oznaczenie
Warunki hodowli
NPL
Miano
w
coli
podłoże
inkubacja (butelek)
wykazujących dodatni 100 cm3
w temp.
wynik badania przy
37˚C
posiewie (cm3)
(godz.)
24−48
laktozowe z
purpurą
bromokrezolową
Wnioski:
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
4.Oznaczanie paciorkowców kałowych (enterokoków)
Wykonanie oznaczenia:
1. Zaszczepić badanym materiałem (ezą) bulion do wykrywania
enterokoków.
2. Inkubować probówki w cieplarce w 45˚C 48 godz.
3. Dokonać obserwacji hodowli. W przypadku obecności enterokoków
następuje zakwaszenie pożywki i zmian jej barwy na kolor żółty.
3