Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być
Transkrypt
Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być
0103004732122COINV7.0 LDHI2 Dehydrogenaza mleczanowa zgodna z IFCC, wersja 2. - Probówka pierwotna Enzymy Informacja o odczynnikach 03004732 122 Lactate Dehydrogenase acc. to IFCC ver.2 300 testów ID systemowe 07 6607 0 10759350 190 12149435 122 12149443 122 10171743 122 10171735 122 10171778 122 10171760 122 05117003 190 05947626 190 05117216 190 05947774 190 Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL) Precinorm U plus (10 × 3 mL) Precipath U plus (10 × 3 mL) Precinorm U (20 × 5 mL) Precinorm U (4 × 5 mL) Precipath U (20 × 5 mL) Precipath U (4 × 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 1 (20 × 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 1 (4 × 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 2 (20 × 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 2 (4 × 5 mL) ID systemowe 07 3718 6 ID systemowe 07 7999 7 ID systemowe 07 8000 6 ID systemowe 07 7997 0 ID systemowe 07 7997 0 ID systemowe 07 7998 9 ID systemowe 07 7998 9 ID systemowe 07 7469 3 ID systemowe 07 7469 3 ID systemowe 07 7470 7 ID systemowe 07 7470 7 Polski Informacja o aplikacjach Test LDIP2, ID testu 0‑507. Zastosowanie Test in vitro do ilościowego oznaczania aktywności katalitycznej LDH (EC 1.1.1.27; L‑mleczanu: NAD+ oksydoreduktaza) w surowicy i osoczu w systemach COBAS INTEGRA. Aplikacja przeznaczona dla użytkowników uzyskujących nieprawidłowe wyniki dehydrogenazy mleczanowej spowodowane gradientem aktywności enzymu w osoczu w probówkach pierwotnych. Podsumowanie1,2,3,4 Dehydrogenaza mleczanowa (LDH) jest enzymem szeroko rozpowszechnionym w tkankach organizmu, szczególnie w sercu, wątrobie, mięśniach i nerkach. W oparciu o ruchliwość elektroforetyczną z LDH surowicy wyodrębniono pięć izoenzymów. Każdy z izoenzymów jest tetramerem złożonym z dwóch różnych podjednostek. W oparciu o budowę łańcucha polipeptydowego wyróżnia się podjednostkę sercową i mięśniową. Istnieją dwa homotetramery: LDH‑1 (sercowy) i LDH‑5 (mięśniowy), oraz trzy izoenzymy heterotetrameryczne. Podwyższoną aktywność LDH obserwuje się w różnych stanach chorobowych. Najwyższy poziom występuje u pacjentów z niedokrwistością megaloblastyczną, rozsianym nowotworem i we wstrząsie. Średni wzrost występuje w schorzeniach mięśni, zespole nerczycowym i marskości. Łagodny wzrost aktywności LDH odnotowano w przypadku zawału mięśnia sercowego lub płuc, białaczki, niedokrwistości hemolitycznej i niewirusowego zapalenia wątroby. Niniejsza metoda jest zgodna z zaleceniami Międzynarodowej Federacji Chemii Klinicznej (International Federation of Clinical Chemistry - IFCC).5 Zasada pomiaru Próba UV Dehydrogenaza mleczanowa katalizuje utworzenie pirogronianu z L‑mleczanu; podczas tego procesu NAD+ ulega redukcji do NADH. LDH L‑mleczan + NAD+ pirogronian + NADH + H+ Ilość powstałego NADH jest wprost proporcjonalna do aktywności katalitycznej LDH. Oznaczenie jest wykonane poprzez pomiar wzrostu absorbancji przy długości 340 nm. Odczynniki - roztwory robocze R1 N‑Metylo‑D‑glukamina: 400 mmol/L, pH 9.4 (37 ℃); mleczan litu: 62 mmol/L; stabilizatory; konserwanty SR NAD: 62 mmol/L; stabilizatory; konserwanty Analizatory, w których mogą być używane odczynniki cobas c pack COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Zalecenia i środki ostrożności Należy przestrzegać wszelkich zaleceń oraz środków ostrożności zawartych w rozdziale 1, "Wstęp". Zestaw zawiera składniki sklasyfikowane zgodnie z Wytyczną (UE) nr 1272/2008, w następujący sposób: chlorek hydroksyloamoniaku EUH 208 Może powodować wystąpienie reakcji alergicznej. Oznakowanie wyrobu dotyczące bezpieczeństwa wg. wytycznych EU GHS. Postępowanie z odczynnikami Gotowy do użycia Przechowywanie i trwałość W temp. 2‑8 °C Do daty ważności na etykiecie cobas c pack System COBAS INTEGRA 400 plus W analizatorze w temperaturze 10‑15 °C 12 tyg. System COBAS INTEGRA 800 W analizatorze w temp. 8 °C 12 tyg. Pobieranie i przygotowanie materiału W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie przeznaczone do tego probówki lub pojemniki. Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów biologicznych wymienionych poniżej. Surowica (wolna od hemolizy) Osocze (wolne od hemolizy): Osocze krwi pobranej na heparynę (Li-, Nalub NH4+-) Nie stosować innych antykoagulantów. Osocze może być zanieczyszczone płytkami krwi, które charakteryzują się wysoką aktywnością dehydrogenazy mleczanowej i dlatego należy unikać stosowania osocza.6,7 Oddzielić surowicę lub osocze od krwinek i niezwłocznie oznaczyć.8 Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle przestrzegać zaleceń ich producenta. Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub obecnością strątów. R1 jest w pozycji B, a SR jest w pozycji C. 2016-02, V 7.0 Polski 1/4 LDIP2 0103004732122COINV7.0 LDHI2 Dehydrogenaza mleczanowa zgodna z IFCC, wersja 2. - Probówka pierwotna Stabilność:9 Enzymy 7 dni w temp. 15‑25 °C. SR 20 µL Próbkę można przechowywać przez 4 dni w temp. 2‑8 °C lub 6 tyg. w temp. ‑20 °C. W wypadku połączenia z niektórymi chorobami (np. hapatopatie, choroby mięśni szkieletowych, guzy złośliwe) następuje wzrost porcji izoenzymów LDH‑4 i LDH‑5; są one niestabilne w schłodzonych lub zamrożonych próbkach; może to prowadzić do uzyskania nieprawidłowych wartości LDH w próbkach pobranych od pacjentów chorych na powyższe choroby. Całkowita objętość 150 µL 10 µL Kalibracja Kalibrator Calibrator f.a.s. Jako kalibratora zerowego należy użyć wody dejonizowanej. Tryb kalibracji Regresja liniowa Powtórzenie kalibracji Zalecana w duplikacie Częstotliwość kalibracji Dla każdej serii oraz zgodnie z procedurami kontroli jakości Materiały dostarczone w zestawie Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach. Spójność pomiarowa: Metoda wystandaryzowana manualnie wobec oryginalnej formuły IFCC (2002). Oznaczenie W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora, uwzględniając typ aparatu. Kontrola jakości Zakresy referencyjne Precinorm U, Precinorm U plus lub PreciControl ClinChem Multi 1 Zakresy wartości nieprawidłowych Precipath U, Precipath U plus lub PreciControl ClinChem Multi 2 Definicja testu COBAS INTEGRA 400 plus Częstotliwość kontroli Zalecana co 24 godz. Rodzaj pomiaru Absorbancja Sekwencja kontroli Definiowana przez użytkownika Model kalkulacyjny absorbancji Kinetyczna Kontrola po kalibracji Zalecana Rodzaj reakcji D‑R1‑S‑SR Kierunek reakcji Rosnący Długość fali A/B 340/659 nm Odczyt pierwszy/ostatni 48/64 Współczynnik rozcieńczenia wstępnego 5 Jednostka U/L Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części "Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni materiał kontrolny. Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym zakresem. Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi. Aplikacja dla surowicy i osocza Parametry pipetowania Rozcieńczalnik (H2O) R1 100 µL Próbka 20 µL SR 20 µL Całkowita objętość 150 µL 10 µL Definicja testu COBAS INTEGRA 800 Rodzaj pomiaru Absorbancja Model kalkulacyjny absorbancji Kinetyczna Rodzaj reakcji D‑R1‑S‑SR Kierunek reakcji Rosnący Długość fali A/B 340/659 nm Odczyt pierwszy/ostatni 70/98 Współczynnik rozcieńczenia wstępnego 5 Jednostka U/L Parametry pipetowania Rozcieńczalnik (H2O) R1 100 µL Próbka 20 µL LDIP2 Wyliczenie Analizatory COBAS INTEGRA automatycznie obliczają aktywność oznaczanej substancji dla każdej próbki. Więcej informacji zawarto w rozdziale "Dane Analityczne" na stronie internetowej Online Help (analizatory COBAS INTEGRA 400 plus/800). Współczynnik przeliczeniowy: U/L × 0.0167 = μkat/L Ograniczenia - substancje interferujące Kryterium: Odzysk w granicach ± 10 % wartości początkowej. Surowica/osocze Żółtaczka:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika I wynoszącego 60 dla przybliżonego stężenia związanej i niezwiązanej bilirubiny (przeciętne stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej: 1026 µmol/L lub 60 mg/dL). Hemoliza:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H wynoszącego 10 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 6 µmol/L lub 10 mg/dL). Lipemia (Intralipid):10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika L wynoszącego 2000. Istnieje słaba zależność pomiędzy indeksem L (odnosi się do zmętnienia) a stężeniem triglicerydów. Leki: Brak interferencji z najczęściej używanymi lekami w stężeniu terapeutycznym.11,12 W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM (makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.13 Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o pacjencie. WYMAGANA CZYNNOŚĆ Programowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorach COBAS INTEGRA obowiązkowe jest stosowanie specjalnych cykli mycia. 2/4 2016-02, V 7.0 Polski 0103004732122COINV7.0 LDHI2 Dehydrogenaza mleczanowa zgodna z IFCC, wersja 2. - Probówka pierwotna Dalsze instrukcje oraz najnowsza wersja Dodatkowych Cykli Mycia, zob. ulotka metodyczna odczynnika CLEAN. Tam, gdzie to konieczne, przed podaniem wyników testu należy wprowadzić mający na celu uniknięcie efektu przeniesienia specjalny program dodatkowego cyklu mycia. Granice i zakresy Zakres pomiarowy 10‑1000 U/L (0.167‑16.7 µkat/L) Próbki o wartościach przekraczających liniowość reakcji należy rozcieńczać automatycznie przy użyciu funkcji Rerun. Rozcieńczenie próbek za pomocą funkcji Rerun wynosi 1:10. Wyniki próbek rozcieńczonych za pomocą funkcji Ponów są automatycznie mnożone przez współczynnik 10. Dolna granica pomiaru Dolna granica wykrywalności: 10 U/L (0.167 µkat/L) Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie oznaczanej substancji, które można odróżnić od zera. Oblicza się je jako 3 odchylenia standardowe powyżej próbki zerowej (wzorzec zerowy + 3 OS, powtarzalność n = 21). Wartości oczekiwane Zgodnie z IFCC mierzone w temp. 37 °C:14 Kobiety 135‑214 U/L (2.25‑3.55 µkat/L) Mężczyźni 135‑225 U/L (2.25‑3.75 µkat/L) Dzieci (2‑15 lat) 120‑300 U/L (2.00‑5.00 µkat/L) Noworodki (4‑20 dni) 225‑600 U/L (3.75‑10.0 µkat/L) do 250 U/L (do 4.2 µkat/L) Wartości uzgodnione:15 Mężczyźni i kobiety W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości referencyjnych. Szczegółowe dane o teście Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów COBAS INTEGRA podano poniżej. Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić. Precyzja Precyzję oznaczono w oparciu o próbki materiału pochodzące od ludzi i próbki kontrolne zgodnie typowy zakres pomiarowy z przyjętym protokołem wewnętrznym przy powtarzalności (n = 21) i precyzji pośredniej (1 próbki w oznaczeniu, 1 ozn. na dzień, przez 10 dni). Uzyskano następujące wyniki: Powtarzalność Średnia WZ Precyzja pośrednia Średnia WZ Poziom 1 Poziom 2 153 U/L (2.6 µkat/L) 250 U/L (4.2 µkat/L) 0.9 % 0.3 % Poziom 1 Poziom 2 180 U/L (3.0 µkat/L) 394 U/L (6.6 µkat/L) 2.2 % 1.2 % Porównanie metod Wartości LDH w surowicy ludzkiej i osoczu oznaczone w analizatorze COBAS INTEGRA 700 z użyciem odczynnika COBAS INTEGRA Lactate Dehydrogenase acc. IFCC ver.2 (LDHI2) i odczynnika LDIP2 (y) porównano z wartościami uzyskanymi przy użyciu podobnego odczynnika w analizatorze Roche/Hitachi 917 (x), oraz poprzedniego odczynnika (LDHI) w analizatorze COBAS INTEGRA 700 (x). Ilość próbek (n) = 69 Analizator Roche/Hitachi 917 Passing/Bablok16 2016-02, V 7.0 Polski Regresja liniowa Enzymy y = 1.045x - 4.95 U/L y = 1.012x + 5.74 U/L т = 0.972 r = 0.998 OS (md 95) = 18.6 Sy.x = 11.7 Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 68 i 1465 U/L (1.14 i 24.5 µkat/L). Analizator COBAS INTEGRA 700 Passing/Bablok16 Regresja liniowa y = 1.035x - 4.26 U/L y = 1.021x - 1.58 U/L т = 0.984 r = 1.000 OS (md 95) = 8.12 Sy.x = 4.44 Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 68 i 1433 U/L (1.14 i 24.0 µkat/L). Literatura 1 Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 4th ed. Marburg: Die Medizinische Verlagsgesellschaft 1992. 2 Moss DW, Henderson AR, Kachmar JF. Enzymes. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders 1987;346-421. 3 Zimmerman HJ, Henry JB In: Henry JB, ed. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 17th ed.Philadelphia, PA: WB Saunders 1984;251-282. 4 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995;251-282. 5 Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C – Part 3. Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Concentrations of Lactate Dehydrogenase. Clin Chem Lab Med 2002;40(6):643-648. 6 Bais R, Philcox M. Approved recommendations of IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 8. IFCC method for lactate dehydrogenase. International Federation of Clinical Chemistry (IFCC). Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32(8):639-655. 7 Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. Pa: WB Saunders Co 1999;669. 8 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995;384-385. 9 Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2. Jan. 2002. 10 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 11 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386. 12 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385. 13 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 14 Lorentz K, Röhle G. Einführung der neuen Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentration bei 37 °C. Klin Chem Mitt 1995;26:290-293. 15 Thomas L, Müller M, Schumann G, et al Consensus of DGKL and VDGH for interim reference intervals on enzymes in serum. J Lab Med 2005; 29(5):301-308. 16 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego, oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa się. 3/4 LDIP2 0103004732122COINV7.0 LDHI2 Dehydrogenaza mleczanowa zgodna z IFCC, wersja 2. - Probówka pierwotna Enzymy Symbole Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche Diagnostics używa następujących symboli i znaków. Zawartość zestawu Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu Globalny handlowy numer identyfikacyjny GTIN Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie. © 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com LDIP2 4/4 2016-02, V 7.0 Polski