Artisan™ Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit Nr kat. AR160

Artisan™
Alcian Blue
pH 2.5 Stain Kit
Nr kat. AR160
Przeznaczenie
Do stosowania w diagnostyce in vitro.
Zestaw Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit jest przeznaczony do zastosowań laboratoryjnych i słuŜy do wykrywania mucyn z nielicznymi grupami
siarczanowymi w preparatach tkankowych przy uŜyciu mikroskopii świetlnej.1-2 Do badań nadają się tkanki poddane rutynowej obróbce
wstępnej (zatapiane w parafinie). Preferowanym środkiem utrwalającym jest obojętna buforowana formalina. Interpretacja kliniczna
dodatniego lub ujemnego odczynu musi być uzupełniona przez ocenę morfologiczną, wykonanie odpowiednich prób kontrolnych i
interpretowana przez doświadczonego patologa w kontekście historii choroby pacjenta i innych badań diagnostycznych. Wszystkie
odczynniki wchodzące w skład zestawu Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit zostały optymalnie przygotowane do uŜycia w systemie Artisan Staining
System firmy Dako i nie wymagają mieszania ani rozcieńczania.
Streszczenie i informacje ogólne
Zestaw Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit słuŜy do wykrywania mucyn z nielicznymi grupami siarczanowymi. W pH 2,5 większość kwaśnych
mukopolisacharydów powoduje barwienie na niebiesko.2
Zasady procedury
Mucyny z grupami siarczanowymi nie są widoczne w preparatach barwionych hematoksyliną i eozyną obserwowanych w mikroskopii
świetlnej. UŜycie roztworów o róŜnych wartościach pH ułatwia rozróŜnienie kwaśnych mukopolisacharydów z grupami siarczanowymi i bez
tych grup. Silnie kwasowa sulfomucyna wykazuje słaby odczyn lub jego brak.2
Zestaw Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit jest zoptymalizowany pod kątem uŜycia w systemie Artisan Staining System. Po wszystkich etapach
barwienia następują etapy płukania. Po wybarwieniu preparaty są wyjmowane z aparatu, na krótko zanurzane w 100% alkoholu, zmywane
ksylenem lub substytutem ksylenu i zatapiane przy uŜyciu odpowiedniego środka do zatapiania. Wynik reakcji ocenia się w standardowej
mikroskopii świetlnej.
Dostarczane odczynniki
Zestaw Alcian Blue pH 2.5 Stain Kit składa się z trzech gotowych do uŜycia pakietów z dozownikami; kaŜdy pakiet zawiera:
Zestaw Alcian Blue, 1%, pH 2,5
Zestaw Alcian Blue i 3% kwas octowy w wodzie dejonizowanej
Nuclear Fast Red
Siarczan potasu i glinu, 0,1% Nuclear Fast Red w wodzie dejonizowanej
3% kwas octowy
Kwas octowy w wodzie dejonizowanej
Pakiety odczynników Alcian Blue 1% pH 2.5 i Nuclear Fast Red naleŜy wymieszać przed napełnianiem.
Firma Dako dostarcza te odczynniki w składzie optymalnym do stosowania zgodnie z instrukcjami wykonywania odczynu na
przygotowanych skrawkach tkankowych. Wszelkie odstępstwa od zalecanych procedur badania mogą spowodować, Ŝe deklaracje
dotyczące oczekiwanych wyników staną się niewaŜne.
Materiały wymagane, ale niedostarczane
1. Szkiełka mikroskopowe (zalecane Superfrost Plus™)
2. Artisan Staining System
3. Wash Solution (nr kat. AR102)
Środki ostroŜności
1. Odczynniki są przeznaczone dla przeszkolonych UŜytkowników.
2. Unikać zanieczyszczeń mikrobiologicznych odczynnika. W przeciwnym razie moŜe dojść do nasilenia nieswoistego barwienia.
3. Po wykonaniu przewidzianej liczby testów opakowania mogą zawierać resztki odczynników.
4. Stosowanie innych od opisanych parametrów czasu inkubacji lub temperatur moŜe powodować błędne wyniki badania. UŜytkownik
musi zweryfikować wszelkie odstępstwa w procedurze przewidzianej przez producenta.
5. Pakiety z odczynnikami, które nie są uŜywane w aparacie, naleŜy przechowywać w pozycji pionowej.
6. Pakiety z odczynnikami naleŜy przechowywać w miejscu nienaraŜonym na bezpośrednie działanie promieni słonecznych i z dala od
źródeł ciepła.
(127132-001)
P04001PL_01/AR160/2105.04 s. 1/3
7.
Jako zasadę naleŜy przyjąć zakaz pracy z produktem osobom w wieku poniŜej 18 lat. UŜytkownicy muszą być dokładnie przeszkoleni
w zakresie prawidłowych procedur roboczych, niebezpiecznych właściwości produktu i niezbędnych instrukcji bezpieczeństwa.
Dodatkowe informacje zawiera Karta Charakterystyki Substancji.
8. NaleŜy stosować właściwe wyposaŜenie ochronne, zabezpieczające przed kontaktem odczynnika ze skórą bądź oczami.
9. Niewykorzystany odczynnik naleŜy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i krajowymi.
10. Karta Charakterystyki Substancji Niebezpiecznej jest dostępna na Ŝądanie.
Uwaga
Nuclear Fast Red: 0.1-1% Nuclear Fast Red
H373
P260
P314
P501
MoŜe powodować uszkodzenie narządów poprzez długotrwałe lub naraŜenie powtarzane.
Nie wdychać par.
W przypadku złego samopoczucia zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza.
Zawartość i pojemnik usuwać zgodnie z lokalnymi, regionalnymi, krajowymi i międzynarodowymi przepisami.
Przechowywanie
Wszystkie odczynniki powinny być przechowywane w temperaturze oznaczonej na etykiecie. Nie naleŜy uŜywać po upływie terminu waŜności.
JeŜeli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niŜ podane na ulotce dołączanej do opakowania, UŜytkownik powinien je
zweryfikować. Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego produktu. Dlatego w celu weryfikacji naleŜy wykonywać
odczyny kontrolne na odpowiednich tkankach. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie moŜna wyjaśnić róŜnicami w procedurach
laboratoryjnych lub nieprawidłowymi warunkami przechowywania, naleŜy się skontaktować z działem wsparcia technicznego firmy Dako.
Procedura uŜycia w aparacie / wykonania odczynu
Uwagi wstępne
Szczegółowe instrukcje zawiera Artisan Operator’s Manual (Podręcznik uŜytkownika systemu Artisan).
Wstępne napełnianie dozowników w pakietach odczynników
Przed rozpoczęciem wykonywania odczynów naleŜy wstępnie napełnić dozowniki pakietów z odczynnikami i sprawdzić ich szczelność.
Wstępne napełnianie i sprawdzenie szczelności kaŜdego pakietu naleŜy przeprowadzić przed pierwszym uŜyciem nowego zestawu i przed
pierwszą serią odczynów w danym dniu.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Nad ręcznikiem papierowym, o ile jest dostępny, zdjąć czerwony lub czarny korek transportowy z zespołu dozownika w pakiecie
odczynników. NaleŜy w tym celu delikatnie pociągnąć korek w dół.
Aby napełnić dozownik nowego pakietu odczynników, chwycić pakiet w taki sposób, by zespół dozownika był skierowany w dół,
i 2–3 razy lekko puknąć w bok pakietu odczynników, aby uwolnić pęcherzyki powietrza, które mogły zgromadzić się w zespole dozownika.
Szybko, 3–4 razy całkowicie wcisnąć i zwolnić tłoczek, aŜ do uzyskania ciągłego strumienia; cały wylany płyn zbierać ręcznikiem
papierowym, tamponem pochłaniającym lub podobnym materiałem.
NaleŜy unikać rozlewania duŜych ilości odczynników podczas wstępnego napełniania. Mogłoby to spowodować utratę odczynnika,
a w konsekwencji wyczerpanie się płynu w pakiecie odczynników przed wykonaniem załoŜonej liczby testów.
Przed kaŜdym uŜyciem dozowniki pakietów odczynników moŜna wstępnie napełnić 1–2 razy, uzyskując stały strumień.
Trzymając pakiet odczynników jedną ręką, wsunąć prowadnicę montaŜową z tyłu pakietu do szczelin w statywie karuzelowym, pewnie
osadzając pakiet.
Procedura
1. Roztwór płuczący Wash Solution jest zasysany ze szkiełka.
2. Aplikowany jest kwas octowy 3%. Ten krok trwa 5 minut w temperaturze pokojowej.
3. Aplikowany jest zestaw Alcian Blue 1% o pH 2,5. Ten krok trwa 10 minut i odbywa się w temperaturze 37°C. Po nim nast ępuje
sześciokrotne płukanie roztworem płuczącym Wash Solution.
4. Aplikowany jest odczynnik Nuclear Fast Red. Ten krok trwa 10 minut i odbywa się w temperaturze pokojowej. Po nim następuje
sześciokrotne płukanie roztworem płuczącym Wash Solution.
5. Po zakończeniu wykonywania odczynu szkiełka są szybko zanurzane w 100% alkoholu, zmywane w trzech zmianach ksylenu lub
równowaŜnika ksylenu, a następnie nakrywane.
Interpretacja odczynu
Kwaśne mukopolisacharydy z nielicznymi grupami siarczanowymi, sulfomucyny, kwas hialuronowy, sialomucyny .... Ciemnoniebieski
Jądro:................................................................................................................................................................. Od czerwonego do róŜowego
Cytoplazma: ....................................................................................................................................................... BladoróŜowy
Charakterystyka wydajnościowa
Powtarzalność
Po wykonaniu w tym samym aparacie odczynu na 12 preparatach zawierających tę samą tkankę kontrolną stwierdzono 100% powtarzalność
w ramach serii.
Po wykonaniu w trzech róŜnych aparatach odczynu na 12 preparatach zawierających tę samą tkankę kontrolną stwierdzono
100% powtarzalność między seriami.
Rozwiązywanie problemów
NaleŜy zapoznać się z rozdziałem dotyczącym konserwacji i rozwiązywania problemów w podręczniku Podręcznik dla uŜytkownika systemu
Artisan lub skontaktować się z działem wsparcia technicznego.
(127132-001)
P04001PL_01/AR160/2105.04 s. 2/3
Piśmiennictwo
1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, 1996
2. Luna LG. Histopathological Methods and Color Atlas of Special Stains and Tissue Artifacts, 1st edition, American Histolabs, Inc.,
Gaithersburg, MD, 1992
Wydanie 04/15
(127132-001)
P04001PL_01/AR160/2105.04 s. 3/3