Właściwości przeciwutleniające etanolowych ekstraktów z owoców
Transkrypt
Właściwości przeciwutleniające etanolowych ekstraktów z owoców
Właściwości przeciwutleniające etanolowych ekstraktów z owoców sezonowych Uczniowie realizujący projekt: Joanna Waraksa Weronika Wojsa Opiekun naukowy: Dr Maria Stasiuk Dotacje na innowacje Projekt „Właściwości przeciwutleniające etanolowych ekstraktów z owoców sezonowych” jest realizowany w ramach programu Uniwersytet Młodych Wynalazców współfinansowanego ze środków Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego w ramach Programu Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka. Cel projektu Wykazanie obecności antyoksydantów w owocach sezonowych, określenie ich ilości, jak również ich całkowitej zdolności antyoksydacyjnej. Liofilizacja materiału do badań Celem jest przygotowanie owoców do ekstrakcji lipidów z materiału biologicznego. Podzielenie materiału na mniejsze fragmenty Zamrożenie w ciekłym azocie Wstawienie zamrożonych owoców do liofilizatora Przygotowanie ekstraktów do badań Ekstrakcja jest to proces rozpuszczania związków w materiale biologicznym, w roztworze, w którym ich rozpuszczalność jest największa. W naszym przypadku zastosowaliśmy etanol. Oznaczenia jakościowe – TLC Chromatografia jest techniką analityczną i preparatywną. Metoda chromatografii cienkowarstwowej: Układ rozwijający zabiera ze sobą naniesione na linię startu składniki badanej mieszaniny. Chromatografia cienkowarstwowa służy do szybkiej analizy jakościowej. Stosuje się ją głównie do określenia liczby składników w próbce oraz do wykrywania określonego związku w mieszaninie. Oznaczenia ilościowe Całkowita zawartość związków polifenolowych Całkowita zawartość flawonoidów Całkowita zawartość antocyjanin Całkowita zawartość kwasów fenolowych Całkowita zawartość lipidów rezorcynolowych Oznaczenia ilościowe Za pomocą oznaczeń spektrofotometrycznych: Związki antyoksydacyjne reagują specyficznie z pewnymi odczynnikami a powstały kompleks jest barwny. Natężenie barwy pozwala na określenie ich zawartości w badanym materiale. Oznaczenia całkowitego potencjału antyoksydacyjnego badanych ekstraktów W odniesieniu do antyoksydantów prewentywnych metodą pomiaru zdolności do redukcji jonów żelaza. W odniesieniu do antyoksydantów interwencyjnych metodą pomiaru zdolności do redukcji wolnego rodnika DPPH. Zdolność ekstraktów do ochrony sondy fluorescencyjnej (piraniny) przed utlenieniem przez wolny rodnik AAPH. Wyniki Polifenole, detekcja nieswoista (pary jodu) Lipidy rezorcynolowe, detekcja nieswoista (pary jodu) Polifenole, detekcja swoista (światło UV) Lipidy rezorcynolowe, detekcja swoista (wodny roztwór Fast Blue B) Flawonoidy, detekcja nieswoista (pary jodu) Kwasy fenolowe, detekcja nieswoista (pary jodu) Antocyjaniny, chromatogram nie poddany detekcji (związki są barwne) Flawonoidy, detekcja swoista Kwasy fenolowe, detekcja swoista Wyniki Lipidy rezorcynolowe Zawartość [mg na 1 g s.m.] 6 5 4 3 2 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 8 6 4 2 0 1 15 2 3 4 5 6 7 Zawartośc [mg na 1 g s.m.] 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11 10 11 12 13 12 13 30 25 20 15 10 5 0 14 1 2 3 Owoce 4 5 6 7 8 Owoce Kwasy fenolowe Zawartość [mg na 1 g s.m.] 2 9 Antocyjaniny Flawonoidy 1 8 Owoce Owoce Zawartość [mg na 1 g s.m.] Zawartośc [mg na 1 g s.m.] Polifenole 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Owoce 9 10 11 12 13 14 15 9 10 11 12 13 14 15 14 15 Wyniki Ochrona piraniny przed wygaszaniem 40 Wygaszanie sondy [%] Wygaszanie sondy [%] Właściwości prooksydacyjne 30 20 10 0 Tx 1 2 3 4 5 6 7 8 owoce 9 10 11 12 13 14 15 100 80 60 40 20 0 K Tx 1 2 3 4 5 6 7 8 Owoce 9 10 11 12 13 14 15 Wnioski Największą ilość związków o charakterze antyoksydacyjnym zawarta jest w owocach żurawiny, czarnej jagody, jeżyny, maliny, wiśni i truskawki. Ekstrakty z tych owoców wykazują również największą wartość całkowitej pojemności antyoksydacyjnej. Badane ekstrakty nie chronią sondy fluorescencyjnej przed zniszczeniem przez wolne rodniki. Ekstrakty o największej całkowitej pojemności antyoksydacyjnej wykazują również najsilniejsze właściwości prooksydacyjne, czyli zdolność do zamiany w wolne rodniki i uszkadzania otaczających związków chemicznych. Silne odwodnienie owoców nie wpłynęło na zawartość i aktywność antyoksydantów. Dziękujemy za uwagę Uczniowie realizujący projekt: Joanna Waraksa Weronika Wojsa Opiekun naukowy: Dr. Maria Stasiuk Dotacje na innowacje Projekt „Właściwości przeciwutleniające etanolowych ekstraktów z owoców sezonowych” jest realizowany w ramach programu Uniwersytet Młodych Wynalazców współfinansowanego ze środków Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego w ramach Programu Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka.