Mgr Weronika Korpysa-Dzirba Zakład Higieny Żywności
Transkrypt
Mgr Weronika Korpysa-Dzirba Zakład Higieny Żywności
Mgr Weronika Korpysa-Dzirba Zakład Higieny Żywności Pochodzenia Zwierzęcego Państwowy Instytut Weterynaryjny – Państwowy Instytut Badawczy [email protected] Molekularna charakterystyka enterotoksycznych szczepów Staphylococcus aureus wyizolowanych z mleka surowego Opis pracy doktorskiej Wytwarzanie, ochrona i promocja żywności wysokiej jakości odgrywa coraz większą rolę w krajach należących do Unii Europejskiej. Na Lubelszczyźnie – regionie typowo rolniczym, gdzie jedną z głównych gałęzi gospodarki jest przemysł mleczarski, dbanie o jakość tego typu produktów jest szczególnie istotna. Zapewnienie wysokiej jakości żywności, w tym również jej bezpieczeństwa dla konsumentów, w dużej mierze zależy od jakości mleka surowego, użytego do produkcji. Ze względu na powszechność występowania w mleku surowym gronkowców Staphylococcus aureus, szczególnie istotne jest określenie jaki odsetek tych drobnoustrojów ma zdolność do wytwarzania enterotoksyn, które są przyczyną gronkowcowych zatruć pokarmowych u ludzi. Celem pracy jest określenie częstości występowania gronkowców enterotoksycznych poprzez oznaczenie genów kodujących klasyczne enterotoksyny gronkowcowe, zwłaszcza wśród koagulazo-dodatnich szczepów S. aureus wyizolowanych z mleka surowego oraz genotypowa charakterystyka takich izolatów bakteryjnych. W pracy zaplanowano izolację koagulazo-dodatnich szczepów gronkowców (CPS – Coagulase Positive Staphylococci) a następnie potwierdzenie ich przynależności do gatunku S. aureus wykorzystując do tego celu opracowany test multiplex PCR. W kolejnym etapie zaplanowano opracowanie a następnie wykorzystanie testu multiplex PCR do określenia potencjału enterotoksycznego wyizolowanych szczepów S. aureus. Szczepy posiadające geny kodujące enterotoksyny gronkowcowe zostaną ponadto poddane analizom mającym na celu weryfikację ekspresji tych genów, poprzez określenie wytwarzania enterotoksyn in vitro. Badania te umożliwią określenie jaki procent koagulazo-dodatnich gronkowców posiada geny kodujące najważniejsze z punktu widzenia zdrowia konsumentów, enterotoksyny oraz pozwoli określić rzeczywiste zagrożenie jakie niesie za sobą konsumpcja surowego mleka oraz produktów wytwarzanych z mleka nie poddanego obróbce cieplnej. W następnym etapie realizacji projektu, wyizolowane enterotoksyczne szczepy S. aureus zostaną poddane analizom z zastosowaniem nowoczesnych metod biologii molekularnej w celu określenia ich pokrewieństwa oraz wzajemnych powiązań między nimi. Rozbieżne dane literaturowe dotyczące występowania enterotoksycznych szczepów S. aureus w mleku surowym uzasadniają potrzeba podjęcia badań mających na celu określenie rzeczywistej sytuacji epidemiologicznej w regionach Polski, gdzie występuje największa produkcja mleka, w tym w województwie lubelskim. Ponadto opracowane podczas realizacji projektu nowe techniki molekularne usprawnią diagnostykę w kierunku wykrywania enterotoksycznych szczepów S. aureus i będą mogły być wykorzystywane w rutynowych badaniach laboratoryjnych, prowadzonych w celu zapewnienia właściwej ochrony zdrowia konsumentów.