1. Monitorowanie oporności typu KPC
Transkrypt
1. Monitorowanie oporności typu KPC
Monitorowanie oporności typu KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase) pałeczek Enterobacteriaceae w badaniach przesiewowych pacjentów hospitalizowanych. A. Bańska*, E. Zawidzka*, A. Kaczmarek**, E. Wilk* * Pracownia Mikrobiologii ALAB laboratoria Sp. z o.o. Warszawa, [email protected] ** Szpital Praski p.w. Przemienienia Pańskiego, Warszawa Drobnoustroje wytwarzające karbapenemazy typu KPC są oporne na wszystkie leki β-laktamowe (w tym karbapenemy). Ponadto są one z reguły oporne na leki innych grup stosowane wobec Enterobacteriaceae. Geny odpowiedzialne za wytwarzanie karbapenemaz typu KPC umiejscowione są w obrębie plazmidów, co powoduje łatwość ich rozprzestrzeniania zarówno wewnątrz jak i międzygatunkowego. Szczepy dysponujące takim mechanizmem oporności stanowią więc poważne zagrożenie epidemiologiczne. Przy okazji szeroko zakrojonych badań epidemiologicznych prowadzonych przez zespół kontroli zakażeń w Szpitalu Praskim w Warszawie przeprowadzono analizę skuteczności zastosowania podłoży chromogennych do szybkiej identyfikacji szczepów KPC+. Metody: Próbki wysiewano redukcyjnie na podłoże CHROMagar KPC (GRASO) i równolegle na podłoże chromogenne CPS ID3 (bioMerieux). Wszystkie szczepy, które wyrosły na podłożu Chromagar KPC identyfikowano do gatunku przy użyciu pasków Api 10S (bioMerieux). Wrażliwość izolatów na karbapenemy (imipenem, meropenem, ertapenem) oceniano metodą krążkową. Mechanizm oporności typu KPC sprawdzano fenotypowo stosując test kombinowany z kwasem boronowym (test fenotypowy KPC) zalecany przez Krajowy Ośrodek Referencyjny ds. Lekowrażliwości (KORDL) polegający na wykryciu synergizmu działania antybiotyku i inhibitora KPC. Kontrolnie oceniano wrażliwość na karbapenemy szczepów Klebsiella pneumoniae, które wyrosły na podłożu CPS ID3, przy braku ich wzrostu na podłożu CHROMagar KPC. Cel pracy: Ocena skuteczności podłoża CHROMagar KPC (GRASO) w badaniach przesiewowych pacjentów hospitalizowanych celem wykrycia lub wykluczenia obecności szczepów KPC. Materiał: Wymazy z odbytu pobrano jednocześnie od 253 osób hospitalizowanych na oddziałach: chirurgii, chorób wewnętrznych, ginekologii, ortopedii, urologii, OIOM, Wyniki: W badaniu uzyskano wzrost bakterii na podłożu CHROMagar KPC z 7 badanych próbek. Identyfikacja biochemiczna potwierdziła przynależność wszystkich izolatów do gatunku Klebsiella pneumoniae. Wszystkie szczepy były oporne na karbapenemy i dały pozytywny wynik w teście kombinowanym z kwasem boronowym. Szczepy przesłano do KORDL celem potwierdzenia wykrytego mechanizmu oporności. W każdym przypadku uzyskano potwierdzenie w badaniu na obecność KPC zarówno w metodzie fenotypowej jak i genetyczno-molekularnej. Szczepy Klebsiella pneumoniae, które wyrosły na podłożu CPS, przy braku wzrostu na podłożu CHROMagar KPC były wrażliwe na karbapenemy. CHROMagar KPC (GRASO) szczep I / szczep II CPS ID3 (bioMerieux) Próbka CHROMagar KPC api 10S (wszystkie izolaty) CPS ID3 api 10S (izolaty z grupy KES, które nie wyrosły na posianym równolegle podłożu CHROMagar KPC) Test fenotypowy KPC Test fenotypowy KPC (dla szczepów Klebsiella pneumoniae) Wyniki uzyskane z 253 badanych próbek Oznaczenie Wynik Potwierdzenie Liczba izolatów Klebsiella pneumoniae 20 api 10S Liczba izolatów Klebsiella pneumoniae KPC(+) 7 Test fenotypowy KPC Liczba izolatów Klebsiella pneumoniae KPC(-) 13 Test fenotypowy KPC Liczba izolatów Klebsiella pneumoniae KPC(+) fałszywie dodatnich 0 Potwierdzenie przez KORDL Liczba izolatów Klebsiella pneumoniae KPC(-) fałszywie ujemnych 0 Ocena wrażliwości na karbapenemy szczep I / szczep II api 10S Identyfikacja: Klebsiella pneumoniae Test kombinowany z kwasem boronowym szczep I KPC (+) szczep II KPC (-) Wnioski: Otrzymane wyniki potwierdziły przydatność podłoża CHROMagar KPC firmy GRASO w badaniu przesiewowym w celu wykrycia lub wykluczenia obecności szczepów KPC. Zdecydowano o wdrożeniu procedury z zastosowaniem podłoża do rutynowej diagnostyki.