Materiały

Ćwiczenie 5
Wykrywanie i oznaczanie aktywności penicyliny w hodowlach grzybów Penicillium
chrysogenum
Materiały:
szczep badany: Penicillium chrysogenum
szczepy wzorcowe: Escherichia coli, Bacillus cereus, Bacillus subtilis ssp. subtilis
Podłoża:
Podłoże do produkcji penicyliny:
glukoza
15,0 g
laktoza
50,0 g
namok kukurydziany
30,0 g
olej arachidowy
5,0 g
fenylooctan sodu
4,0 g
CaCO3
10,0 g
NaNO3
5,0 g
Na2SO4
0,5 g
K2SO4
1,0 g
KH2PO4
4,0 g
MgSO4
0,25 g
ZnSO4
0,04 g
MnSO4
0,02 g
woda
do 1000 ml
Agar odżywczy (dla bakterii z rodzaju Bacillus):
wyciąg mięsny
5g
pepton
10 g
glukoza
10 g
NaCl
5g
woda
do 1000 ml
(podłoże zestalone: 20 g agaru na 1000 ml pożywki)
Podłoże LB (dla E. coli):
wyciąg drożdżowy
5g
pepton trypton
10 g
NaCl
10 g
woda
do 1000 ml
(podłoże zestalone: 20 g agaru na 1000 ml pożywki)
1
Wykonanie ćwiczenia:
1. Kilkudniową hodowlę P. chrysogenum przefiltrować przez sączek w celu oddzielenia
grzybni od medium pofermentacyjnego.
2. Nasączyć krążki bibuły w przesączu hodowlanym i umieścić po 2 na płytkach z
naniesionymi powierzchniowo hodowlami szczepów wzorcowych (E. coli, B. cereus, B.
subtilis ssp. subtilis).
3. Wykonać odpowiednie hodowle kontrolne (czyste krążki).
Ryc. Schemat rozmieszczenia krążków bibułowych
4. Inkubować przez 48 h, odczytać wyniki.
Ryc. Schemat pomiaru stref zahamowania wzrostu
2
Wyniki:
Tabela. Pomiar stref zahamowania wzrostu organizmów wzorcowych [mm]:
przesącz hodowlany
czyste krążki
E. coli
B. cereus
B. subtilis
Wnioski:
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………
3