SPRAWOZDANIE

SPRAWOZDANIE
ETAPOWE [ROCZNE] Z REALIZOWANEJ PRACY NAUKOWO-BADAWCZEJ
w roku 2009
Tytuł: Otrzymywanie populacji homozygotycznych roślin buraka ćwikłowego z
zastosowaniem embriogenezy gametycznej
Wykonawcy: prof. dr hab. Krystyna Górecka
dr Dorota Krzyżanowska
mgr Waldemar Kiszczak
mgr Urszula Kowalska
Celem tegorocznych doświadczeń było zbadanie wpływu wybranych czynników na proces
androgenezy i gynogenezy. Pracowano też nad regeneracją roślin z zarodków otrzymanych z
mikrospor i zalążków. Badano też stadia rozwojowe woreczka zalążkowego w pąkach różnej
długości.
Traktowanie pąków kwiatowych 70% etanolem przez 2 min. a potem 0.1% HgCl2 z 0.1 %
Tweenem przez 8 min. okazało się dobrym sposobem sterylizacji powierzchniowej dla kultur
pylnikowych i kultur zalążków, a dla kultur izolowanych mikrospor oba zastosowane
sposoby: 70% etanolem przez 10 min. jak i uprzednie traktowanie pąków płynem Bode
Sterillum przez 1,5 min. Efektywność embriogenezy w kulturach pylnikowych i kulturach
zalążków zależała od genotypu. Chłodzenie roślin donorowych w ciemnej chłodni wpłynęło
na zaindukowanie tworzenia się zarodków w kulturach pylnikowych. Prekultura według
Hoekstry i in. (1997) spowodowała bardzo liczne zakażenia. Prekultura według SeguiSimmaro (2007) nie wpłynęła na powstawanie zarodków. Najlepszą pożywką do indukcji
androgenezy w kulturach pylnikowych okazała się pożywka N6 ze 100g sacharozy, 0.2mg BA
i 0.5mg IAA na litr.
W kulturach izolowanych mikrospor wywołano powstawanie struktur wielokomórkowych.
Stosowanie amylazy nie spowodowało wytwarzania embrioidów w kulturach pylnikowych,
ani podziałów komórek w kulturach izolowanych mikrospor.
W kulturach zalążków najwięcej zarodków otrzymano pąków kwiatowych o długości 2,5 mm.
Najlepszą pożywką do indukcji gynogenezy była B5 ze 100g sacharozy i 0,1 mg 2.4-D w
litrze.
Z embrioidów uzyskanych w kulturach pylnikowych jak dotąd nie uzyskano roślin. Zarodki
uzyskane w kulturach zalążków wytwarzały bardzo intensywnie pędy na pożywkach do
regeneracji. Długość pąka kwiatowego jest dobrym zewnętrznym wskaźnikiem stadium
rozwoju zalążka.