Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji roślin leczniczych
Transkrypt
Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji roślin leczniczych
Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji rolin leczniczych metalami toksycznymi Nr 10/2007homeostazy oksydacyjnej hepatocytów... Zak³ócenie Niedocinienie ortostatyczne The methods of determining the actual intoxication of medicinal plants with toxic metals. mgr farm. Dominika Stawinoga, dr n. farm Jolanta Kowol, dr n. biol. Maciej Bogunia, mgr farm. Dominika Dru¿ba, mgr farm Aneta Urban, mgr farm. Hanna Librowska l¹ski Uniwesytet Medyczny, Katedra i Zak³ad Toksykologii, ul. Jagielloñska 4, 41-200 Sosnowiec Kierownik Katedry: prof. dr hab. Jerzy Kwapuliñski Streszczenie Rośliny lecznicze posiadają właściwości przyswajania związków zawartych w glebie i zdolność do kumulowania wielu metali, w tym również metali toksycznych np. Pb, Ni, Cd, Hg. Wraz z rośliną związki te dostają się do organizmu człowieka. Może nawet dochodzić do wtórnej intoksykacji organizmu, gdyż leczenie ziołami jest procesem długotrwałym. Dlatego to bardzo ważne jest wyznaczenie obszarów pozwalających na pozyskiwanie roślin leczniczych w jak najmniejszym stopniu narażonych na występowanie metali. Do scharakteryzowania roślin i terenów ich pozyskiwania można wykorzystać informacje analizy specjacyjnej gleby oraz wyznaczone współczynniki ekotoksykologiczne. Abstract Medicinal plants have the properties of assimilating compounds contained in soil, and the ability of accumulating many metals, including toxic ones, such as Pb, Ni, Cd, Hg. These compounds get to the human body along with the plant. The secondary intoxication of the organism may be a possible result, because herb treatment is a longlasting process. Therefore, very important issue is to determine areas which allow to acquire the medicinal plants that are exposed to these metals to the smallest extent. The results of speciation analysis of soil and ecotoxicological indicators can be used for characterizing plants and the areas of acquiring them. słowa kluczowe: intoksykacja, rośliny lecznicze, metale key words: intoxication, medicinal plant, metals, Zagadnienie rozpatrzono na przykładzie następujących gatunków roślin leczniczych: wrotycz pospolity (Tanacetum vulgare), mniszek pospolity (Taraxacum officinale), babka lancetowata (Plantago lanceolata), pokrzywa zwyczajna (Urtica dioica), skrzyp polny (Equisetum arvense), dziurawiec zwyczajny (Hypericum perforatum), krwawnik pospolity (Achillea millefolium), pięciornik gęsi (Potentilla anserina), malina właściwa (Rubus ideus), nostrzyk żółty (Melilotus officinalis) zebranych na terenie wiejskim pozostającym w zasięgu emisji komunikacyjnej i z terenu poza bezpośrednim oddziaływaniem przemysłu. Poszczególne części roślin, po wysuszeniu w warunkach naturalnych, rozdrobiono w moździerzu porcelanowym. Z tak przygotowanego surowca odważono po 1g i poddano mineralizacji na mokro mineralizatorem typu M9. W pierwszym etapie mineralizacji próby traktowano 2ml stężonego HNO3 (65%) spektralnie czystego, a następnie przez 2 godziny odparowywano w temp. 150oC. W drugim etapie pozostałość zadano mieszaniną 1ml stężonego HCl04 (70%) i 2ml stężonego HNO3 (65%) spektralnie czystego, prowadząc proces mineralizacji przez następne 2 godziny w temp. 250oC. Po ostudzeniu mineralizat przeniesiono ilościowo do kolby miarowej o pojemności 25ml i uzupełniono wodą destylowaną do kreski. Analizie poddano klarowny roztwór. Zawartość metali w kolejnych próbach oznaczono przy użyciu spektrofotometru absorpcji atomowej PU 9100X, firmy Pye Unicam. Zgodnie z poprawną interpretacją wyników ilustrujących migrację metali z gleby do roślin zarówno poprzez system korzeniowy jak i tzw. nawożenie dolistne zasadne jest przeprowadzenie analizy specjacyjnej, która pozwoli określić formy bezpośrednie i pośrednie biodostępne roślin. Bardzo często taką częścią jest korzeń: mniszek pospolity (Taraxacum officinale) lub liście: babka lancetowata (Plantago lanceolata), malina właściwa (Rubus ideus), mniszek pospolity (TaraFarmaceutyczny Przegl¹d Naukowy % Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji rolin leczniczych metalami toksycznymi xacum officinale), pokrzywa zwyczajna (Urtica dioica). Zasady analizy specjacyjnej opisano w pracy Rudd’a [1].Analiza specjacyjna polega na identyfikacji i ilościowym oznaczeniu różnych form i postaci tego samego pierwiastka. Formy i postacie w jakich występuje dany pierwiastek mogą wpływać na właściwości chemiczne pierwiastka, m. innymi na jego biodostępność. W przypadku analizy gleby określamy występowanie pierwiastków w formach: wymiennej za- adsorbowanej, połączeń organicznych, węglanów, siarczków i jako pozostałość organiczna [2]. Przedstawienie pierwiastków w tych formach pozwala na poznanie mechanizmów rzeczywistych wpływów i stopnia narażenia jakim poddane są rośliny. Rośliny w pierwszej kolejności wykorzystują zasoby poszczególnych pierwiastków występujących w formie wymiennej i adsorbowanej i to ich stężenie wpływa głównie na stopień intoksykacji surowca zielarskiego Tab.I Współczynnik fitokumulacji – stanowisko na terenie wiejskim pozostające w zasięgu emisji komunikacyjnej – liść/forma specjacyjna Tab.II Współczynnik fitokumulacji - stanowisko łąka śródleśna położona poza bezpośrednim oddziaływaniem przemysłu - liść/forma specjacyjna Tab.III Współczynnik wzbogacenia metali dla liści wybranych gatunków roślin leczniczych & Farmaceutyczny Przegl¹d Naukowy Nr 10/2007 Nr 10/2007 Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji rolin leczniczych metalami toksycznymi poprzez system korzeniowy oraz nawożenie dolistne. Problem oceny stopnia kumulacji roślin leczniczych był już podejmowany przez szereg autorów. Wykorzystywano w tym celu zarówno współczynniki ekotoksykologiczne [3] jak i najnowsze metody matematyczno – statystyczne, do których należą m. in. metoda podobieństwa grupowego [4]. Obecnie podstawowymi pracami stanowiącymi pewien układ odniesienia w zakresie względnej kumulacji roślin leczniczych wielu metalami są prace Kwapuliński i inni[5], Iwanek i inni [6]. Kolejnymi czynnikami wykorzystywanymi w ocenie intoksykacji roślin leczniczych są współczynniki ekotoksykologiczne. Pozwalają one na właściwy opis skutków intoksykacji gleby i selektywnej kumulacji wybranych metali przez niektóre rośliny. Pierwszy z nich to współczynnik fitokumulacji. Jest to iloraz zawartości danego metalu w roślinie i glebie. Jest on coraz powszechniej wykorzystywany do oceny stopnia kumulacji metali. Obrazuje on przeciętne zdolności kumulowania poszczególnych metali z gleby występujących w danych 6 formach chemicznych. Jego wartość większa od 1 świadczy o dużym obciążeniu rośliny danym metalem [7]. Przykładowe wartości współczynnika fitokumulacji przedstawiono dla stanowisk wyznaczonych na terenie wiejskim pozostającym w zasięgu emisji komunikacyjnej i z łąki śródleśnej położonej poza bezpośrednim oddziaływaniem przemysłu [tabela I i tabela II]. Analiza obliczeń obrazuje, że zdolność kumulacji biodostępnych form jest różna i zależy od rodzaju pierwiastków. Wśród pierwiastków badane gatunki w selektywny sposób gromadziły Fe i Mn, w drugiej kolejności Cr, Ni i Zn. Kolejny to współczynnik wzbogacenia, który opisuje proces migracji metali z gleby do rośliny w stosunku do pierwiastka odnośnikowego. Jako pierwiastek odnośnikowy przyjmuje się pierwiastek o małej zmienności występowania, który w danym środowisku występuje w wartości śladowej. Może zostać zastosowany także pierwiastek charakterystyczny geochemicznie, który występuje w dużej ilości w danym środowisku, lecz nie charakteryzuje się żadnymi efektami (synergizm, antagonizm) w stosunku do pierwiastka badanego. Jako odnośnikowe stosuje się najczęściej: Mn, Sc, Al., Ti i Ni. Współczynnik wzbogacenia charakteryzuje proces kumulacji w okresie wegetacji, nawiązuje także do charakterystyki geochemicznej podłoża [7]. Pozwala on na odzwierciedlenie rzeczywistego poziomu biodostępności poszczególnych metali w odniesieniu do określonego obszaru i gatunku roślin. [tabela III] Największe wartości współczynnika wzbogacenia w liściach roślin dotyczyły Cu i Zn z łąki śródlądowej oraz Mn na całym terenie badań. Współczynnik specyficznej kumulacji (WSK) charakteryzuje drogę i specyfikę pobierania pierwiastków przez rośliny danego gatunku. Przedstawia się go jako stosunek zawartości pierwiastka w danej roślinie do jego średniej zawartości w innych gatunkach występujących na tym samym terenie. Współczynnik ten w sposób głębszy obrazuje problem kumulacji metali gdyż przedstawia to zjawisko w odniesieniu do kumulacji w pozostałych gatunkach roślin występujących na tym samym terenie [tabela IV] [7]. Na podstawie współczynnika specyficznej kumulacji można zaobserwować, że największa ilość Cd ulega kumulacji w korzeniu pięciornika (1.70), a naj- Tab.IV Współczynnik specyficznej kumulacji dla korzeni wybranych gatunków roślin leczniczych zebranych z terenów wiejskich pozostających w zasięgu emisji komunikacyjnej i terenów położonych poza bezpośrednim oddziaływaniem przemysłu Farmaceutyczny Przegl¹d Naukowy ' Metody ustalania rzeczywistej intoksykacji rolin leczniczych metalami toksycznymi mniejsza w korzeniu pokrzywy (0.49). Porównując zawartość Pb zauważamy, że duża jego ilość znajduje się w korzeniu babki (1.61). Kolejnym parametrem ekotoksykologicznym dobrze charakteryzującym stopień zanieczyszczenia danym metalem ekosystemu jest wskaźnik koncentracji względnej przedstawiany jako stosunek różnicy średniej geometrycznej zawartości metalu w poszczególnych częściach morfologicznych danego gatunku leczniczego i średniej geometrycznej zawartości danego metalu w poszczególnych częściach morfologicznych wszystkich badanych gatunków leczniczych do średniej geometrycznej zawartości danego metalu w po- Nr 10/2007 szczególnych częściach morfologicznych wszystkich badanych gatunków leczniczych [7]. Pozwala on na wskazanie terenów o większej lub mniejszej biodostępności danego pierwiastka, również toksycznego [tabela V]. W liściach największa koncentracją odznaczał się odpowiednio: Mn (550.44) w malinie, Na (271.88) w babce, Zn (213.66) we wrotyczu i Na (155.65) w dziurawcu. Mniejsza koncentracja wystąpiła w dziurawcu dla Fe (129.55), w malinie dla Ni (107.38), we wrotyczu dla Mn (73.99) i Ni (63.78). Największa kumulacja dla Pb wystąpiła w dziurawcu (12.87) i we wrotyczu (12.71). Tab.V Wskaźnik koncentracji względnej liści roślin rosnących na terenach wiejskich pozostających w zasięgu emisji komunikacyjnej i terenach położonych poza bezpośrednim oddziaływaniem przemysłu PIMIENNICTWO 1. Rudd’a ., Lake D.L., Mehrotra I., i wsp.: Characterization of metal forms in sewage sludge by chemical extraction and progressivr acidification, Sci. Total Environ., 1988, 74, 149-175 2. Hulanicki A.:Specjacja w wodach i osadach dennych – tematyka zbieżna, czy rozbieżna?, Uniwersytet im. A. Mickiewicza Poznań, 1998, redakcja Jerzy Siepak, 7-18 3. Kowol J., Wiechuła D., Kwapuliński J., Mirosławski J. i wsp.: Zastosowanie współczynników chemotoksykologicznych w ocenie stopnia kontaminacji roślin leczniczych metalami, Bro mat.Chem.Toksykol.- Suplement, 2005, 283 - 286 4. Bogunia M., Kwapuliński J., Kowol J.: Wykorzy- ! Farmaceutyczny Przegl¹d Naukowy stanie metody podobieństwa grupowego do analizy rodzajów współzależności między metalami w roślinach leczniczych, Bromat.Chem.Toksykol.Suplement, 2005, 279 - 282 5. Kwapuliński J., Mirosławski J., Wiechula D. i wsp.: Metale ciężkie w składzie mineralnym roślin leczniczych, Problemy Ekologii, 1998, 3, 101-105 6. Iwanek K., Bednarek M., Kowol J. i wsp.: Rośliny lecznicze jako źródło metali ciężkich, Problemy Ekologii, 1997,5,160-165 7. Kwapuliński J., Kowol J., Bogunia M. i wsp.: Ekotoksykologia wybranych roślin leczniczych z obszaru Ziemi Cieszyńskiej, Problemy Ekologii, 2002,vol 6, nr 3, maj – czerwiec, 137 - 145