MAPOWANIE GENOMU ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO (Lupinus

ZESZYTY PROBLEMOWE POSTĘPÓW NAUK ROLNICZYCH 2007 z. 517: 215-223
MAPOWANIE GENOMU
ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO (Lupinus angustifolius L.)
Z WYKORZYSTANIEM MARKERÓW STS
Z Medicago truncatula GAERTN. i Pisum sativum L. 1
1
1
1
Magdalena Chudy 1, Karolina Leśniewska , Wojciech Święcicki , Bogdan Wolko ,
1
1
2
Izabela Pawłowicz , Magdalena Gawłowska , Jeffrey G. Boersma
1
2
Instytut Genetyki Roślin Polskiej Akademii Nauk w Poznaniu
Ministerstwo Rolnictwa Zachodniej Australii, Perth
Wstęp
Celem prowadzonych prac było umieszczenie na mapie genetycznej łubinu
wąskolistnego (Lupinus angustifolius L.) markerów sekwencyjnie zdefiniowanych,
zaprojektowanych na podstawie baz danych sekwencyjnych dla rośliny modelowej
Medicago truncatula GAERTN. oraz dla Pisum sativum L. Materiał stanowiła populacja
mapująca, dla której we wcześniejszych badaniach skonstruowano mapę genetyczną
opartą o zmienność markerów MFLP [BOERSMA i in. 2005]. Zagadnienie to mieści się w
nurcie określanym jako mapowanie porównawcze genomów roślin, wykorzystywanym w
studiach nad pokrewieństwem i filogenezą gatunków. Badania z tego zakresu były juŜ
prowadzone dla niektórych gatunków roślin strączkowych m. in. przez PHAN i in. [2006],
ZHU i in. [2005] oraz CHOI i in. [2004]. Prezentowana praca jest częścią projektu „Grain
Legumes” realizowanego w ramach 6. Programu Ramowego Unii Europejskiej. Jego
celem jest poszerzenie wiedzy z zakresu struktury i organizacji genomów najwaŜniejszych
gatunków uprawnych roślin strączkowych oraz wprowadzanie nowych technologii i
modyfikacji do hodowli tej grupy roślin. Wyniki prac mogą przyczynić się do wzrostu
wykorzystania roślin strączkowych w rolnictwie, szczególnie w Ŝywieniu ludzi i zwierząt.
Materiał i metody
Populację mapującą stanowiło 89 linii wsobnych, kombinacji krzyŜówkowej
83A:476 (linia hodowlana) P27255 (typ dziki) w pokoleniu F8 łubinu wąskolistnego,
otrzymaną w ramach współpracy z australijską grupą badawczą (Department of
1
Badania sfinansowano ze środków Zintegrowanego Projektu 6. Programu Ramowego Unii
Europejskiej „Grain Legumes” „New strategies to improve grain legumes for food and feed” nr FP62002-FOOD-1-506223.
216
M. Chudy i inni
Agriculture Western Australia, Perth). Sekwencje starterów zostały dostarczone przez
partnera węgierskiego projektu „Grain Legumes”. Optymalizacja warunków PCR
wymagała zastosowania róŜnych profili termicznych (touchdown, gradient
temperaturowy), jak równieŜ róŜnych stęŜeń chlorku magnezu.
Analizę sprzęŜeń nowych markerów i ich lokalizację na mapie wykonano za
pomocą programu komputerowego Map Manager v. QTXb20 oraz MapChart.
Wyniki i dyskusja
W ramach współpracy z partnerem węgierskim projektu otrzymano 257 par
starterów. W wyniku amplifikacji większości z nich, w liniach rodzicielskich populacji
mapującej łubinu otrzymano produkty monomorficzne. Po wstępnej optymalizacji
warunków PCR uzyskano 61 produktów polimorficznych. W przypadku 29 par starterów
uzyskano produkty stabilne, przeanalizowane pod względem segregacji alleli w całej
populacji mapującej. 24 markery STS wykazały prawidłową segregację alleli 1 : 1,
natomiast w przypadku pozostałych 5 stwierdzono odchylenia od poprawnej segregacji.
Wstępnym warunkiem wykorzystania markerów do mapowania jest ich poprawna
segregacja jednogenowa [STAUB i in. 1996]. Stwierdzono, Ŝe markery wykazujące istotne
odchylenia od Mendlowskiego modelu dziedziczenia mają tendencję do grupowania się
na mapach genetycznych [JONES i in. 1997; SALIBA-COLOMBANI i in. 2000]. Za pomocą testu 2
sprawdzono zgodność uzyskanych rozszczepień z wartościami oczekiwanymi. Według
tablic rozkładu 2 [PUCHALSKI 1973] wartość oczekiwana dla markerów dominacyjnych nie
powinna przekraczać 3,841, a dla markerów kodominacyjnych 5,991.
Do chwili obecnej na mapie sprzęŜeń MFLP łubinu wąskolistnego zostały
umieszczone 22 markery STS, a lokalizacja pozostałych 6 markerów jest jeszcze
niepewna (rys. 1). W przypadku 19 par starterów fragmenty polimorficzne róŜniły się
wielkością amplifikowanego produktu, a pozostałe 10 wykazało polimorfizm typu jest/nie
ma. Dla dwóch par starterów otrzymano więcej niŜ jeden produkt polimorficzny, który
mógł być rozpatrywany jako marker molekularny.
Procent udziału markerów polimorficznych wynosił 24. Ze względu na niską
powtarzalność warunków PCR poziom polimorfizmu zmniejszył się do 11%.
W pozostałych gatunkach strączkowych, badanych przez innych partnerów w ramach
projektu, poziom polimorfizmu wynosił około 20%. Prawdopodobną przyczyną jest
niedokładne dopasowanie starterów do matrycy DNA podczas amplifikacji. Wynika ono z
odległego pokrewieństwa łubinu i rośliny modelowej Medicago w porównaniu z innymi
badanymi gatunkami. Łubin naleŜy bowiem do podrodziny Papilionoideae, rząd
Genisteae, natomiast Medicago i koniczyna do rzędu Trifolieae, ciecierzyca do rzędu
Cicereae, a groch, soczewica i bobik do rzędu Fabeae [LEWIS i in. 2005].
Całkowita długość opublikowanej mapy genetycznej łubinu wąskolistnego miała
1543 cM, ze średnią odległością między markerami 3,4 cM. Zawierała ona 454 loci w 21
głównych grupach sprzęŜeń [BOERSMA i in. 2005]. Wzbogacenie mapy o markery STS
zwiększyło jej długość do 1953 cM, a średnią odległość pomiędzy markerami do 4,14 cM.
EUJAYL i in. [1998] sugerowali, Ŝe wraz ze zwiększaniem liczby zlokalizowanych
markerów, zmniejsza się długość mapy.
217
MAPOWANIE GENOMU ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO ...
W przypadku prezentowanych wyników wzbogacenie mapy o nowe markery spowodowało wydłuŜenie mapy oraz zwiększenie średniej odległości pomiędzy markerami.
Przyczyną zwiększenia długości mapy moŜe być typ populacji mapującej i rodzaj
zastosowanych markerów [KNOX, ELLIS 2002]. WydłuŜenie mapy moŜe być równieŜ
spowodowane zjawiskiem podwójnego crossing-over [KNOX, ELLIS 2001].
W celu potwierdzenia homologii sekwencji amplifikowanych u łubinu wąskolistnego z sekwencjami rośliny modelowej Medicago truncatula, podjęto wstępne
prace dotyczące sekwencjonowania poszczególnych produktów PCR. Sekwencjonowaniu
poddano dotychczas 15 produktów PCR. W przypadku trzech sekwencji potwierdzono
istnienie homologii sekwencji łubinowej w sekwencyjnych bazach danych Medicago oraz
Pisum (tab. 1). Podjęte analizy sekwencyjne będą kontynuowane.
Tabela 1; Table 1
Markery STS łubinu wąskolistnego, których sekwencje wykazały homologię
z M. truncatula lub P. sativum
Narrow-leafed lupin STS markers showing homology to M. trucatula
or P. sativum sequences
Nazwa startera; Primer name
Wielkość produktu PCR (pz)
PCR product size (bp)
Wartość E
Expected value
mtmt_GEN_00087_02_1_137
900
E= 0,008
psat_EST_00190_01_1_138L
900
E= 7e-05
psat_EST_00190_01_1_138R
900
E= 6e-20
mtmt_GEN_00103_01_1_137
385
E = 9e-16
Potwierdzenie podobieństwa amplifikowanych sekwencji u łubinu i Medicago tylko
w 20% moŜe wynikać nie tyle z braku homologii, co z ilości i jakości produktu po PCR
poddanemu sekwencjonowaniu. Wynika to z wcześniej omówionej, niskiej wydajności
reakcji PCR i tym samym powoduje złą jakość odczytu sekwencji.
Proponowanym rozwiązaniem, zwiększającym liczbę zmapowanych markerów jest
zastosowanie markerów zaprojektowanych dla Lotus japonicus, Medicago truncatula i
Glicyne max oraz przetestowanych w liniach fasoli Phaseolus vulgaris przez duńską,
Rolniczo-Weterynaryjną Radę Badawczą we współpracy z Centrum Bioinformatycznym
Uniwersytetu w Aarhus. Zidentyfikowane sekwencje konserwatywne, graniczące z
intronami z Lotus japonicus, Medicago truncatula oraz Glicyne max umoŜliwiają
zaproponowanie starterów, amplifikujących ortologiczne regiony genów w rodzinie
Leguminosae.
Wnioski
1.
W związku z niską stabilnością produktów amplifikacji PCR nie wszystkie
wstępnie wykryte produkty polimorficzne mogły być przeanalizowane w całej
218
M. Chudy i inni
populacji mapującej. Prawdopodobną tego przyczyną
komplementarności sekwencji starterów do matrycy DNA.
jest
brak
pełnej
2.
Poziom polimorfizmu markerów u łubinu okazał się niŜszy niŜ wstępnie zakładano.
Zaproponowano zastosowanie metod dodatkowych (np. Cel I, opracowanie
dCAPS) w celu umieszczenia na mapie odpowiednio duŜej, wymaganej w
projekcie liczby markerów.
3.
Na obecnym etapie badań syntenia genomów L. angustifolius L., M. truncatula
GAERTN. i P. sativum L. moŜe być określona tylko dla fragmentów porównywanych
genomów ze względu na niewielką liczbę zlokalizowanych markerów wspólnych,
na mapach wymienionych wyŜej gatunków.
Literatura
BOERSMA J.G., PALLOTTA M., LI C., BUIRCHELL B.J., SIVASITHAMPARAM K., YANG H. 2005.
Construction of a genetic linkage map using MFLP and identification of molecular
markers linked to domestication genes in narrow-leafed lupin (Lupinus angustifolius L.).
Cell Molecular Biological Letters 10(2): 331-44.
CHOI H.K., MUN J.H., KIM D.J., ZHU H., BAEK J.M., MUDGE J., ROE B., ELLIS N., DOYLE J.,
KISS G.B., YOUNG N.D., COOK R.D. 2004. Estimating genome conservation between crop and
model legume species. Proc Natl Acad Sci USA 101(43): 15289-15294.
EUJAYL I., BAUM M., POWELL W., ERSKINE W., PEHU E. 1998. A genetic linkage map of lentil
(Lens sp.) based on RAPD and AFLP markers using recombinant inbred lines. Theor.
Appl. Genet. 97: 83-89.
JONES C.J., EDWARDS K.J., CASTAGLIONI S., WINFIELD M.O., SALA F., VAN DE WIEL C.,
BREDEMEIJER G., VOSMAN B., MATFLIES M., DALY A., BRETTSCHNEIDER R., BETTINI P., BUIATTI
M., MAESTRI E., MALCEVSCHI A., MARMIROLI N., AERT R., VOLCKAERT G., RUEDA LINACERO R.,
VAZQUEX A., KARP A. 1997. Reproducibility testing of RAPD, AFLP and SSR markers in
plants by a network of European laboratories. Molecular Breeding 3: 381-390.
KNOX M., ELLIS T. 2001. Stability and inheritance of methylation states at Pst I sites in
Pisum. Mol. Genet. Genomics 265: 497-507.
KNOX M., ELLIS T. 2002. Excess Heterozygosity Contributes to Genetic Map Expansion in
Pea Recombinant Inbred Populations. Genetics 162: 861-871.
LEWIS G., SCHRIRE B., MACKINDER B., LOCK M. 2005. Legumes of the World. The Royal
Botanic Gardens, Kew: 16-19.
PHAN H.T., ELLWOOD S.R., FORD R., THOMAS S., OLIVER R. 2006. Differences in syntenic
complexity between Medicago truncatula with Lens culinaris and Lupinus albus.
Functional Plant Biology 33: 775-782.
PUCHALSKI T. 1973. Wnioskowanie statystyczne. PWN, Warszawa: 346 ss.
SALIBA-COLOMBANI V., CAUSSE M., GERVAIS L., PHILOUZE J. 2000. Efficiency of RFLP, RAPD,
AFLP markers for the construction of an intraspecific map of tomato genome. Genome
MAPOWANIE GENOMU ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO ...
219
43: 29-40.
STAUB J.E., SERQUEN F.C., GUPTA M. 1996. Genetic markers, map construction and their
application in plant breeding. Hort Science 31(5): 729-740.
ZHU H., CHOI H. K., COOK D.R., SHOEMAKER R.C. 2005. Bridging model and crop legumes
through comparative genomics. Plant Physiology 137(4): 1189-96.
Słowa kluczowe: łubin wąskolistny, mapowanie porównawcze, markery STS
Streszczenie
W pracy opisano mapowanie genetyczne markerów zdefiniowanych sekwencyjnie, zaprojektowanych dla rośliny modelowej Medicago truncatula GAERTN. u
gatunku uprawnego łubinu (Lupinus angustifolius L.). Prace te są częścią Projektu
Europejskiego realizowanego w ramach 6. Programu Ramowego Unii Europejskiej
„Grain Legumes Integrated Project” (GLIP).
Populację mapującą stanowiło 89 linii wsobnych kombinacji krzyŜówkowej
83A:476 (linia hodowlana)
P27255 (typ dziki). Markery STS wygenerowano za
pomocą reakcji PCR, przy uŜyciu starterów zaprojektowanych w oparciu o bazy danych
sekwencyjnych M. truncatula i P. sativum.
Przetestowano 257 par starterów dostarczonych przez partnera projektu GLIP.
Większość starterów amplifikowała produkt monomorficzny. W przypadku 29 wykrytych
produktów polimorficznych segregacja alleli mogła być przetestowana na całej populacji
mapującej. Do chwili obecnej 22 markery STS zostały zlokalizowane na mapie sprzęŜeń
opartej o markery MFLP, opracowanej przez grupę australijską. Pozycja pozostałych 6
markerów nie została jeszcze ustalona. Wzbogacenie opublikowanej mapy o markery STS
zwiększyło jej długość do 1953 cM, a średnią odległość pomiędzy markerami do 4,14 cM.
MAPPING OF THE NARROW-LEAFED
LUPIN (Lupinus angustifolius L.) GENOME USING STS MARKERS
DESIGNED FOR Medicago truncatula GAERTN. AND Pisum sativum L.
Magdalena Chudy 1, Karolina Leśniewska 1, Wojciech Święcicki 1, Bogdan Wolko 1,
Izabela Pawłowicz 1, Magdalena Gawłowska 1, Jeffrey G. Boersma 2
1
Institute of Plant Genetics Polish Academy of Sciences, Poznań
2
Department of Agriculture, Western Australia, Perth, Australia
Key words:
narrow-leafed lupin, comparative mapping, STS markers
Summary
The aim of this research is a genetic mapping of the STS markers derived from a
model legume Medicago truncatula GAERTN. in lupin crop (Lupinus angustifolius L.). This
study was undertaken within the framework of VI EU „Grain Legumes Integrated Project”
(GLIP).
220
M. Chudy i inni
The mapping population consists of 89 recombinant inbred lines of a cross
between a domesticated line and a wild type (83A:476
P27255). STS markers were
generated by the PCR, using primer pairs designed on the basis of M. truncatula and P.
sativum genomic sequences.
Up till now 257 primer pairs designed and delivered by the Hungarian partner of
the project have been tested. Most of the primers amplified a monomorphic product. In the
case of 29 detected polimorphic products, segregation of alleles could be analyzed in the
whole mapping population. 22 of these markers were located on the genetic linkage map
based on the MFLP markers constructed by the Australian group. The position of the
remaining 6 markers is still uncertain. Supplementing the published map with the STS
markers increased its length to 1953 cM and the average marker distance into 4.1 cM.
Mgr Magdalena Chudy
Instytut Genetyki Roślin Polskiej Akademii Nauk
ul. Strzeszyńska 34
60-479 POZNAŃ
email: [email protected]
0,0
2,1
3,7
4,4
5,0
5,6
10,6
11,9
12,4
13,6
14,3
28,7
30,5
31,1
36,6
37,2
37,7
40,2
46,7
48,5
51,9
58,8
59,5
62,4
63,6
64,2
64,8
65,3
66,6
68,4
70,2
76,1
77,5
81,1
90,0
107,
117,
121,
121,
122,
126,
128,
133,
135,
137,
140,
141,
143,
170,
1
DAWA758.47
DAWA809.47
DAWA930.135
DAWA377.35
DAWA532.48
DAWA749.46
DAWA821.14
DAWA289.630
DAWA80.19
DAWA109.260
DAWA956.29
DAWA765.18
DAWA523.29
DAWA516.29
DAWA498.31
DAWA400.300
DAWA394.070
DAWA478.50
DAWA91.19
mtmt_GEN_00447
mtmt_GEN_00258
DAWA545.14
DAWA808.50
DAWA793.40
DAWA792.42
DAWA682.24
DAWA180.24
DAWA181.21
DAWA261.06
DAWA392.19
DAWA30.05
DAWA1078.22
DAWA612.13
DAWA299.68
mtmt_GEN_00116
DAWA631.17
DAWA919.090
DAWA789.56
DAWA486.27
DAWA339.25
DAWA194.23
DAWA627.25
DAWA101.235
DAWA391.20
DAWA772.330
DAWA894.12
DAWA403.20
DAWA1065.25
mtmt_GEN_00087
0,0
0,6
13,
23,
33,
34,
37,
41,
42,
50,
52,
53,
55,
59,
60,
62,
65,
65,
66,
70,
76,
87,
90,
94,
97,
102,
108,
114,
118,
118,
130,
130,
132,
140,
142,
143,
2
DAWA563.130
DAWA531.125
DAWA932.09
Leg_17
DAWA319.07
DAWA824.40
DAWA301.550
DAWA669.090
DAWA414.40
DAWA429.27
DAWA451.40
DAWA84.11
DAWA100.250
DAWA142.10
DAWA113.14
DAWA674.200
DAWA131.16
DAWA50.190
DAWA70.19
DAWA582.42
DAWA415.35
DAWA207.32
DAWA224.17
Lanr
AntjM
DAWA1019.350
psat_EST_0017
DAWA120.30
DAWA817.39
DAWA811.39
DAWA257.19
DAWA938.32
DAWA356.300
DAWA233.12
DAWA40.43
DAWA1091.42
0,0
4,4
5,0
10,0
11,3
15,1
20,3
20,8
25,9
26,5
29,6
30,3
33,4
48,1
53,2
57,2
61,3
62,0
62,5
67,7
68,3
70,1
75,5
76,1
77,2
77,8
78,4
79,0
80,7
82,5
83,1
83,7
86,1
89,7
96,3
102,
105,
107,
109,
116,
118,
131,
MAPOWANIE GENOMU ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO ...
3
DAWA529.450
DAWA972.100
DAWA1050.28
DAWA1046.125
DAWA572.265
DAWA205.42
DAWA365.11
DAWA778.49
DAWA434.055
DAWA718.160
DAWA724.52
DAWA494.550
DAWA141.15
Pis_GEN_12_2_60
DAWA513.450
DAWA354.10
DAWA832.29
DAWA645.45
DAWA292.45
DAWA253.100
DAWA551.25
mtmt_GEN_00105
DAWA505.25
DAWA736.24
DAWA441.06
DAWA436.45
DAWA311.12
DAWA132.15
DAWA409.07
DAWA284.520
DAWA291.475
DAWA270.55
DAWA406.095
DAWA138.230
GAL
DAWA22.14
DAWA508.44
DAWA887.30
DAWA320.56
DAWA618.150
DAWA836.140
DAWA667.15
0,0
3,7
19,
25,
34,
35,
37,
39,
40,
45,
45,
46,
47,
48,
51,
53,
56,
58,
61,
62,
63,
64,
64,
76,
102,
117,
123,
124,
125,
126,
133,
134,
4
221
mtmt_GEN_00237
DAWA603.450
DAWA509.350
DAWA1080.18
DAWA814.09
DAWA1087.250
DAWA795.20
DAWA268.12
DAWA267.13
DAWA94.11
DAWA419.10
DAWA282.55
DAWA474.80
DAWA1010.18
DAWA890.19
DAWA20.19
DAWA381.18
DAWA99.280
DAWA375.070
DAWA178.45
DAWA42.380
DAWA591.14
DAWA726.45
DAWA785.135
PIS_PR_106_
DAWA670.475
DAWA537.30
DAWA762.29
DAWA663.41
DAWA671.37
DAWA393.07
DAWA852.14
0,0
7,8
9,0
12,
12,
14,
20,
24,
48,
71,
72,
79,
82,
85,
87,
92,
97,
102,
107,
112,
115,
120,
123,
130,
131,
132,
135,
152,
155,
158,
5
DAWA918.11
DAWA63.09
DAWA102.16
DAWA213.19
DAWA851.180
DAWA216.48
DAWA471.20
DAWA973.230
Pis_GEN_6_3_
DAWA383.145
DAWA470.23
DAWA660.13
DAWA936.36
DAWA606.22
DAWA219.34
DAWA256.23
DAWA605.33
mtmt_GEN_275
DAWA314.310
DAWA149.15
mtmt_GEN_00080
DAWA515.29
Pis_GEN_12_2_50
DAWA858.22
DAWA542.16
DAWA565.16
DAWA993.09
DAWA787.17
DAWA159.290
DAWA790.44
0,0
5,0
10,
20,
21,
22,
38,
44,
45,
45,
46,
51,
53,
53,
54,
55,
55,
57,
60,
61,
76,
79,
81,
100,
6
DAWA533.45
DAWA45.32
DAWA1002.230
DAWA325.450
DAWA321.460
DAWA376.27
DAWA188.31
DAWA497.40
DAWA843.09
DAWA841.15
DAWA813.17
DAWA150.12
DAWA402.210
DAWA247.330
DAWA331.16
DAWA685.170
DAWA489.13
mtmt_GEN_00092
DAWA725.48
DAWA19.23
DAWA53.12
mtmt_GEN_00103
DAWA1084.13
DAWA300.56
0,0
0,6
3,2
12,8
29,9
41,3
42,0
42,6
43,8
45,7
50,7
52,0
53,2
53,8
57,5
62,7
63,9
65,0
65,6
69,3
72,4
74,1
74,7
77,2
77,7
101,
DAWA763.27
DAWA539.26
DAWA27.22
DAWA782.24
DAWA507.450
DAWA404.18
DAWA822.07
DAWA73.10
DAWA192.350
DAWA888.29
DAWA423.18
DAWA520.35
barwakwiat Leu
DAWA1045.15
Pis_GEN_12_2_1
DAWA713.29 DAWA518.26
DAWA622.45
DAWA544.14
DAWA83.13
DAWA554.14
DAWA52.12
DAWA317.13
DAWA139.18
DAWA869.360
DAWA242.45
GPI2
GAL
DAWA781.250
DAWA17.270
DAWA433.06
DAWA576.27
DAWA378.30
DAWA39.46
DAWA35.260
DAWA465.37
DAWA959.100
DAWA967.20
DAWA949.150
DAWA744.40
DAWA850.195
11
DAWA316.15
71,
95,
105,
106,
107,
109,
110,
112,
124,
131,
131,
140,
147,
148,
DAWA825.375
22,
0,0
7
0,0
1,4
2,1
3,5
13,
18,
29,
32,
32,
36,
41,
43,
52,
53,
53,
54,
56,
59,
59,
62,
63,
73,
0,0
15,
16,
20,
22,
26,
30,
35,
37,
37,
38,
41,
42,
42,
55,
56,
62,
84,
87,
DAWA982.28
DAWA905.27
DAWA879.26
DAWA65.290
DAWA18.240
DAWA85.11
DAWA906.25
DAWA119.32
DAWA1041.32
DAWA892.175
DAWA707.10
DAWA374.08
DAWA553.165
DAWA43.36
DAWA288.17
DAWA598.14
DAWA143.09
DAWA128.38
DAWA960.05
DAWA613.43
DAWA278.14
DAWA372.10
DAWA804.12
Mol DAWA561.18
DAWA783.18
DAWA664.29
DAWA662.50
DAWA573.23
DAWA264.17
DAWA723.650
DAWA717.20
DAWA480.400
DAWA484.31
DAWA208.29
DAWA910.130
DAWA600.250
DAWA893.160
DAWA753.199
DAWA47.29
DAWA842.14
DAWA122.24
12
8
0,0
0,6
13,
14,
31,
31,
37,
38,
44,
47,
48,
49,
50,
52,
57,
62,
63,
64,
69,
75,
77,
78,
82,
100,
120,
121,
121,
122,
123,
126,
127,
127,
9
DAWA345.09
DAWA575.375
DAWA71.16
DAWA254.47
DAWA1008.36
DAWA76.43
DAWA741.17
DAWA444.300
DAWA137.250
DAWA639.15
DAWA506.19
DAWA524.19
DAWA1072.65
DAWA54.10
DAWA305.27
DAWA608.170
DAWA397.40
DAWA34.28
psat_EST_0017
DAWA396.55
DAWA646.380 DAWA504.28
DAWA632.55
zawartos
AC
Iuc
DAWA604.33
DAWA134.26
DAWA525.18
DAWA26.25
DAWA255.36
DAWA679.43
DAWA650.45
0,0
0,6
2,3
4,3
9,9
14,
17,
29,
35,
39,
40,
41,
42,
43,
43,
45,
49,
51,
53,
56,
56,
57,
58,
63,
64,
65,
67,
74,
10
DAWA93.09
DAWA359.36
DAWA127.540
DAWA1082.17
DAWA868.05
DAWA366.050
DAWA41.40
DAWA628.22
DAWA461.19
DAWA59.21
DAWA928.24
DAWA691.07
DAWA690.08
DAWA315.22
DAWA49.23
DAWA157.49
DAWA211.26
DAWA98.34
DAWA570.08
DAWA826.270
DAWA295.265
DAWA75.46
DAWA32.35
DAWA479.42
mou
DAWA198.450
DAWA751.330
DAWA592.09
0,0
26,
35,
35,
36,
38,
39,
40,
43,
44,
44,
53,
61,
0,0
2,4
9,1
11,7
22,5
32,9
33,5
34,1
38,0
48,5
49,1
49,8
57,3
59,1
62,1
64,5
67,1
70,3
94,3
19
13
pokro
DAWA341.23
DAWA330.19
DAWA552.18
DAWA915.180
DAWA652.400
DAWA302.400
DAWA21.19
DAWA665.25
DAWA491.11
DAWA877.325
DAWA135.34
Pis_GEN_20_1_
DAWA364.18
DAWA348.40
DAWA237.170
DAWA209.29
DAWA15.39
DAWA323.15
L
DAWA964.27
DAWA72.16
DAWA165.480
DAWA88.325
DAWA1029.35
DAWA250.17
DAWA23.10
DAWA241.29
DAWA308.19
DAWA104.02
DAWA577.15
ID
0,0
0,6
2,1
3,6
5,6
6,3
8,4
11,
13,
19,
26,
0,0
0,7
4,7
5,3
27,
66,
73,
77,
78,
79,
80,
81,
82,
84,
87,
87,
91,
93,
108,
110,
113,
20
14
DAWA948.215
DAWA984.25
DAWA904.28
DAWA878.27
DAWA981.29
DAWA913.290
DAWA689.12
DAWA942.140
DAWA90.225
DAWA1023.19
DAWA502.15
DAWA186.13
DAWA1051.18
DAWA541.18
DAWA766.17
Pis_Gen_15_1_7
DAWA200.25
DAWA361.310
DAWA197.190
DAWA82.14
DAWA696.32
DAWA312.340
DAWA437.350
DAWA659.215
DAWA435.04
DAWA754.19
DAWA369.29
DAWA1005.13
DAWA16.32
DAWA721.090
DAWA641.480
DAWA620.57
0,0
2,0
11,9
12,5
14,3
14,9
20,7
25,5
0,0
4,4
13,7
25,9
28,3
38,1
38,6
39,2
39,8
41,1
41,7
42,3
51,7
53,7
63,5
65,3
65,8
21
15
DAWA933.10
DAWA275.17
DAWA183.17
DAWA202.18
DAWA912.32
DAWA204.550
psat_EST_0016
DAWA203.16
DAWA243.22
DAWA140.17
DAWA413.60
DAWA902.47
DAWA510.300
DAWA350.05
DAWA46.31
DAWA512.80
DAWA742.85
DAWA411.350
DAWA476.19
DAWA248.18
DAWA51.15
DAWA801.215
DAWA44.340
DAWA462.160
DAWA371.130
0,0
0,7
2,0
5,8
6,5
11,4
12,6
14,4
16,8
17,4
18,0
19,8
23,1
23,8
28,2
29,4
35,7
MAPOWANIE GENOMU ŁUBINU WĄSKOLISTNEGO ...
16
DAWA975.16
DAWA133.350
DAWA996.37
DAWA881.21
DAWA583.33
DAWA820.19
DAWA223.27
DAWA318.12
DAWA596.36
DAWA266.13
DAWA614.36
DAWA535.35
DAWA827.13
DAWA601.14
DAWA648.07
DAWA979.32
DAWA212.19
0,0
0,6
12,
13,
15,
17,
18,
19,
27,
28,
29,
30,
32,
33,
46,
17
0,0
0,7
1,4
2,6
13,2
14,4
17,4
23,4
26,0
31,9
18
DAWA
DAWA
DAWA
DAWA
DAWA
DAWA
mtmt_
DAWA
DAWA
DAWA
Markers STS/ STS mar
DAWA229.25
DAWA193.24
DAWA144.650
DAWA420.09
DAWA245.10
K DAWA428.29
DAWA306.255
DAWA1015.17
DAWA955.300
DAWA581.46
DAWA287.20
DAWA189.22
DAWA549.29
DAWA779.28
MTMT_GEN_0007
223
Rys 1.
Fig. 1.
224
Markery zlokalizowane na mapie MFLP łubinu wąskolistnego (L. angustifolius)
Markers located on the narrow-leafed lupin (L. angustifolius) MFLP map
M. Chudy i inni