instrukcja dla klienta OM
Transkrypt
instrukcja dla klienta OM
WSSE WROCŁAW ODDZIAŁ MIKROBIOLOGII INSTRUKCJA OGÓLNA „POBIERANIE I TRANSPORT MATERIAŁU DO BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH” IM-01/PM-09 wyd.04 z dnia 15.10.2008 1. CEL I PRZEDMIOT INSTRUKCJI: Celem i przedmiotem instrukcji jest prawidłowe pobieranie i transport materiału biologicznego do badań bakteriologicznych, mykologicznych, serologicznych, wirusologicznych, parazytologicznych oraz do badań wykonywanych przez Pracownię Badań Czystościowych i Szkodliwych Czynników Biologicznych. 2. ZAKRES STOSOWANIA: Zleceniodawcy, pacjenci, osoby pobierające i transportujące materiał biologiczny (próbki) do Oddziału Mikrobiologii. 3. ODPOWIEDZIALNOŚĆ: Zleceniodawcy, pacjenci, osoby pobierające i transportujące ponoszą pełną odpowiedzialność za wszystkie etapy pobrania i transportu próbek, do momentu dostarczenia do Oddziału Mikrobiologii. 4. TERMINY I DEFINICJE: 4.1. WYMAZÓWKA- mały wacik na giętkim pręcie. 5. TRYB POSTĘPOWANIA: Pobieranie i transport materiału – zasady ogólne (warunki szczegółowe jeśli dotyczą są podane w podpunktach od 5.1. do 5.18.): Materiał powinien być pobrany przez pielęgniarkę, lekarza, diagnostę lub technika analityki medycznej. JeŜeli materiał pobiera sam chory (np. mocz, kał, plwocina, nasienie) powinien zapoznać się z instrukcją prawidłowego postępowania. JeŜeli materiał pobiera sam zleceniodawca badań czystościowych i szkodliwych czynników biologicznych powinien zapoznać się z instrukcją prawidłowego postępowania. Materiał do badań - bakteriologicznych naleŜy pobierać we wczesnym okresie choroby, przed podaniem choremu antybiotyków lub w 3-4 dni po ich odstawieniu (kontrola skuteczności antybiotykoterapii). Materiał naleŜy pobierać jałowo do wysterylizowanego pojemnika. Pojemniki do pobierania materiału do badań pacjenci otrzymują w Punkcie Przyjęcia Próbek lub są informowani o moŜliwości ich zakupu. Transport - wszystkie materiały naleŜy dostarczyć do laboratorium w moŜliwie najkrótszym czasie, niektóre, w zaleŜności od czasu transportu, naleŜy schładzać (warunki szczegółowe jeśli dotyczą są podane w podpunktach od 5.1. do 5.18.). Materiał powinien być przekazywany do laboratorium w oznaczonym pojemniku (probówce, kałówce, pojemniku na mocz itp.) imieniem i nazwiskiem (w przypadku pacjenta) lub innym indywidualnym oznaczeniem (np. dla szczepów przesyłanych do identyfikacji) wraz ze: skierowaniem lekarskim, protokołem pobrania próbki, zleceniem, umową, dokumentem przekazania próbki. Dokument (zlecenie) ten powinien (jeśli to jest zasadne i istotne dla badania) zawierać następujące dane: • Dane pacjenta (imię i nazwisko, datę urodzenia, płeć, adres, telefon, PESEL); • Dane zleceniodawcy (pieczątka zakładu kierującego i pieczątka lekarza zlecającego) • Wstępne rozpoznanie choroby; • Datę pobrania materiału lub inne informacje dot. pobranego materiału; • Określenie zakresu zlecenia i rodzaju materiału do badań (np. posiew bakteriologiczny moczu, badanie parazytologiczne kału, badanie serologiczne surowicy krwi w kierunku Chlamydia pneumaniae IgG, IgM) • Istotne klinicznie informacje o pacjencie (np. oczekiwania dotyczące rodzaju antybiotyków proponowanych w leczeniu (jeśli dotyczy). • Informacje dotyczące odbioru wyniku W przypadku odstępstw od niniejszej instrukcji naleŜy uzgadniać warunki indywidualne z Kierownikiem technicznym danego kierunku badań. 5.1. Pobranie wymazu z gardła lub jamy nosowo-gardłowej: Pacjent powinien być na czczo, uprzednio powinien przepłukać usta przegotowaną wodą, jałowym wacikiem pobrać materiał z migdałków, łuków podniebiennych i tylnej ściany gardła, lub ze zmian Strona 1 z 5 ropnych (czopy). Nie zanieczyszczać wymazówki śliną. W przypadku pobierania materiału z jamy nosowo-gardłowej naleŜy posługiwać się małym wacikiem na giętkim pręcie. Wacik wprowadza się za języczkiem podniebiennym ku górze w celu wymazania tylnej ściany gardła. 5.2. Pobieranie wymazów z nosa Wymaz z nosa naleŜy wykonać suchą lub zwilŜoną w jałowym roztworze NaCl wymazówką. Przed pobraniem wymazu nie naleŜy stosować przynajmniej 1 dzień wcześniej preparatów do nosa o działaniu przeciwbakteryjnym. Wymaz naleŜy pobrać z tylnych nozdrzy. W przypadku badania ukierunkowanego – krztusiec, naleŜy stosować wymazówki z dakronu lub alginianu wapnia, stosować podłoŜa transportowe. Wymazy z gardła i nosa pobrane za pomocą suchej wymazówki naleŜy dostarczyć do laboratorium w czasie 3 godz. JeŜeli materiał jest pobrany na podłoŜe transportowe, to moŜna go przechowywać w temperaturze pokojowej do 72 godz. 5.3. Pobieranie wymazów z ucha: Skórę ucha naleŜy uprzednio oczyścić tamponem nasączonym 70% alkoholem etylowym. Jałową wymazówką (osobno do kaŜdego ucha) nasączonym roztworem soli fizjologicznej (NaCl), pobrać treść zmian ropnych. W przypadkach zachowanej ciągłości błony bębenkowej wymaz z przewodu słuchowego zewnętrznego nie jest przydatny do diagnostyki mikrobiologicznej. W przypadku pęknięcia błony bębenkowej lub tympanopunkcji naleŜy pobrać treść ropną. Materiał naleŜy dostarczyć do laboratorium w ciągu 2 godz. od pobrania. W przypadku dłuŜszego czasu transportu naleŜy stosować podłoŜa transportowe. 5.4. Pobieranie wymazów z plwociny: Powinna być pobrana rano, na czczo, po uprzednim umyciu zębów i przepłukaniu ust przegotowaną wodą. Plwocinę naleŜy odksztuszać do jałowego pojemnika – nie pluć. Objętość plwociny powinna wynosić 1-3 ml. Transport plwociny – do dwóch godzin – powinien przebiegać w temp. pokojowej, przedłuŜenie czasu transportu wymaga schłodzenia materiału. Próbka plwociny musi być dostarczona do badania przed upływem 24 godzin. 5.5. Pobieranie krwi na badania bakteriologiczne w kierunku Salmonella, Shigella: Krew naleŜy pobierać na skrzep do jałowych probówek w ilości 5 ml ze świeŜego wkłucia do Ŝyły (nie z cewników). Skórę naleŜy przed wkłuciem zdezynfekować. Przy podejrzeniu duru brzusznego krew pobrać w 1 tygodniu choroby i dostarczyć do laboratorium w moŜliwe najkrótszym czasie. 5.6. Krew na badania serologiczne, wirusologiczne powinna być pobrana dwukrotnie w odstępach 2-3 tygodniowych (jeśli to zasadne). Krew naleŜy pobierać na skrzep w ilości 5 ml lub uzyskać 2-4 ml surowicy. Krew powinna być pobrana do jałowych probówek bez konserwantów, ewentualnie ze środkami przyspieszającymi krzepnięcie krwi. Do czasu przekazania do laboratorium moŜna przechowywać: krew – 1 dzień w temp. lodówki, surowicę – do 7 dni w temp. lodówki, surowicę – jeŜeli musi być przechowywana dłuŜej niŜ 1 tydzień zamraŜać w temperaturze równej lub niŜszej niŜ -20ºC. 5.7. Pobieranie wymazu z oka: Nie pobierać w ciągu 4 godzin po płukaniu lub podaniu środków przeciwbakteryjnych, wydzielinę pobrać najlepiej jałową gazą i wykonać natychmiast posiew na podłoŜa bakteriologiczne. Wyjątkowo moŜna stosować bardzo cieniutkie wymazówki (okulistyczne) i umieścić w podłoŜu transportowym. Pobieranie wymazów grubymi wymazówkami jak do gardła i nosa powoduje zawsze zanieczyszczenie bakteriami ze skóry i rzęs. Do laboratorium dostarczyć w czasie 2 godz., jeŜeli dłuŜszy czas transportu, to naleŜy zastosować podłoŜe transportowe. 5.8. Pobieranie i transport moczu: NaleŜy pobrać rano po przerwie nocnej min. 4 godziny, po dokładnym umyciu krocza i cewki moczowej (nie naleŜy się wycierać). Mocz powinien pochodzić ze środkowego strumienia i być oddany w ilości około 5 ml. bezpośrednio do jałowego pojemnika. U małych dzieci dopuszcza się pobieranie moczu do sterylnego woreczka przyklejonego tak, aby obejmował ujście cewki moczowej (wówczas zaleca się kilkukrotne pobranie próbek). We wszystkich przypadkach wątpliwych wyników badań u noworodków, chorych nieprzytomnych zaleca się pobieranie moczu przez nakłucia nadłonowe lub cewnikowanie pęcherza moczowego. Do czasu transportu mocz przechowywać w lodówce, dostarczyć do laboratorium w czasie 2 godz. od pobrania. JeŜeli przewidujemy dłuŜszy czas transportu to materiał naleŜy pobrać na podłoŜe transportowe. 5.9. Pobieranie i transport ropy, wymazu z rany, wymazu z napletka, nasienia: Strona 2 z 5 Materiał ropny, tkanki, płyn wysiękowy wymaz z rany, wymaz z napletka powinny być pobrane przez pielęgniarkę lub lekarza. Przed pobraniem ropy, nasienia naleŜy odkazić skórę. Ze zmian powierzchniowych materiał pobrać z jak najgłębszych warstw za pomocą jałowej wymazówki zwilŜonej solą fizjologiczną. Materiał z ropni zamkniętych pobrać po nacięciu chirurgicznym odrzucając pierwszą porcję ropy. Materiał z ropni głębokich aspiruje się strzykawką lub pobiera się jałową wymazówką z węglem aktywnym. Po pobraniu probówkę naleŜy dobrze zamknąć gumowym korkiem. Przy pobieraniu wymazów wskazane jest pobranie dwóch wymazówek, jedna bez podłoŜa transportowego do wykonania preparatu bezpośredniego. Materiał pobrany z ropni naleŜy dostarczyć do laboratorium w czasie 2 godzin. JeŜeli czas transportu jest dłuŜszy to naleŜy zastosować podłoŜe transportowe. Materiał do badań w kierunku beztlenowców przechowuje się i przesyła w temperaturze pokojowej. 5.10. Wymazy z pochwy, szyjki macicy, cewki moczowej: Materiał powinien być pobrany przez pielęgniarkę, połoŜną lub lekarza. Materiał naleŜy pobrać rano przed oddaniem moczu lub 3 godziny po ostatnim oddaniu moczu, przed pobraniem wymazu nie powinno się stosować środków odkaŜających i leczniczych. W stanach zapalnych pochwy pobiera się wydzielinę ze ścian lub tylnego sklepienia pochwy. W zapaleniach gruczołu Bartoliniego gdy wydzielina jest obfita, pobrać do strzykawki i przenieść do jałowego pojemnika. Transport materiału 2-3 godz., przy badaniach ukierunkowanych naleŜy stosować podłoŜa transportowe. 5.11. Pobieranie kału na badanie bakteriologiczne: NaleŜy pobrać grudkę kału wielkości duŜego orzecha laskowego do czystego pojemnika; w przypadku silnej biegunki około 3 ml. kału płynnego. Kał naleŜy przed pobraniem oddać do czystego pojemnika lub na papier, nie pobierać z urządzeń sanitarnych. Kał naleŜy pobrać trzykrotnie (w okresie tygodnia). W przypadku gdy nie udaje się uzyskać próbek kału do badania w kierunku Salmonella, Shigella dopuszcza się pobranie wymazu z odbytu. W celu pobrania wymazu naleŜy wprowadzić poza zwieracz zewnętrzny jałową wymazówkę i wielokrotnie nią obracając pobrać materiał. Transport kału, wymazu – do dwóch godzin – moŜe przebiegać w temp. pokojowej, przedłuŜenie czasu transportu wymaga schłodzenia materiału. Próbka kału, wymazu powinna być dostarczona do badania przed upływem 24 godzin. 5.12. Materiał na badania parazytologiczne: 5.12.1. Kał. NaleŜy pobrać do ¾ wielkości pojemnika na kał (pojemnik taki sam jak uŜywany do badań mikrobiologicznych). Przy stolcach płynnych do ½ wielkości pojemnika na kał. Kał naleŜy pobrać z trzech róŜnych miejsc wypróŜnienia jeŜeli występują z ropą i z krwią. Materiał do laboratorium dostarczyć w czasie 2 godz., przechowywany w temp.2-8 oC w czasie 24 godzin. Kał od osób wracających z tropiku naleŜy dostarczyć do ½ godz. od momentu defekacji z zachowaniem temp. około 36°C 5.12.2. Wycier okołoodbytniczy/ wymaz. Wycier/wymaz naleŜy pobrać rano przed wykonaniem wszelkich czynności higieniczno-fiziologicznych. Suchą wymazówką bakteriologiczną naleŜy ruchem okręŜnym wytrzeć tylko zewnętrzne fałdy odbytu. 5.12.3. Odcisk okołoodbytniczy. Odcisk naleŜy pobrać rano przed wykonaniem wszelkich czynności higieniczno-fiziologicznych. Rozsunąć jedną ręką pośladki i przykleić taśmę stroną klejącą na 5 sekund do fałd odbytu. Następnie taśmę odkleić i przykleić do otrzymanego szkiełka. 5.13. Kał na badania wirusologiczne: NaleŜy pobrać grudkę kału wielkości orzecha laskowego do czystego pojemnika; w przypadku silnej biegunki około 1-3 ml kału płynnego. Kał naleŜy przed pobraniem oddać do czystego pojemnika lub na papier, nie pobierać z urządzeń sanitarnych. Kał naleŜy pobrać trzykrotnie w odstępach 2-3 dni. Materiał naleŜy transportować w warunkach schłodzenia, do laboratorium dostarczyć w ciągu 4 godz. JeŜeli przewiduje się transport do 24 godz. to naleŜy zamrozić w temp. równej, niŜszej -20 oC, powyŜej 24 godz. –zamrozić w -70 oC. 5.13.1. Kał do badań wirusologicznych czynników schorzeń jelitowych (np.rotawirusy) naleŜy transportować w warunkach schłodzenia 2-8 oC do 72 godzin. JeŜeli przewiduje się dłuŜszy czas transportu to materiał naleŜy zamrozić w temp. równej, niŜszej -20 oC. 5.14. Płyn mózgowo – rdzeniowy: Do badań wirusologicznych, serologicznych pobierać w warunkach aseptycznych do jałowych probówek w ilości 1-3 ml. Płyn mózgowo rdzeniowy moŜna zamraŜać w temp. równej, niŜszej -20 oC lub przesyłać w stanie schłodzenia. 5.15. śółć: Pobiera się ją z dwunastnicy przy pomocy jałowego zgłębnika w ilości około 2-3 ml i przesyła w jałowej szczelnie zakorkowanej i prawidłowo oznakowanej probówce, w czasie 2 godz. od pobrania, dopuszcza się dłuŜszy czas transportu na podłoŜu transportowym. Strona 3 z 5 5.16. Pobieranie materiału do badań mykologicznych: Materiał pobrany do badania w kierunku grzybic naleŜy naleŜy pobierać do jałowych pojemników oraz zgodnie z zasadami poboru materiału z miejsc, których zakaŜenie dotyczy, np.: • owrzodzenia grzybicze rogówki - pobrać za pomocą platynowej ezy; • plwocina - rano po wypłukaniu jamy ustnej; • płyny ustrojowe - płyn otrzewnowy, stawowy, opłucnowy pobierane do pojemników z niewielką ilością heparyny; • Kał - NaleŜy pobrać grudkę kału wielkości orzecha laskowego do czystego pojemnika; w przypadku silnej biegunki około 3 ml. kału płynnego. Kał naleŜy przed pobraniem oddać do czystego pojemnika lub na papier, nie pobierać z urządzeń sanitarnych (przechowywać w temperaturze lodówki); • Mocz – naleŜy pobierać i przesyłać zgodnie z punktem 5.8. 5.17. Badania wykonywane w Pracowni Badań Czystościowych i Szkodliwych Czynników Biologicznych. 5.17.1. Badanie czystości mikrobiologicznej powietrza 1. Metoda sedymentacyjna Przed przystąpieniem do pobierania próbek naleŜy zamknąć okna i drzwi. Próbki powietrza pobierać bezpośrednio na płytki Petriego z odpowiednim podłoŜem przeznaczając dla kaŜdego punktu pomiarowego 3 płytki równoległe na wysokości ok. 1,3m. Eksponować 5-60 minut lub dłuŜej w zaleŜności od przypuszczalnego stopnia zanieczyszczenia powietrza. Po upływie określonego czasu płytki zamknąć, opisać (data, czas i miejsce ekspozycji) włoŜyć do tubusa zabezpieczając przed zanieczyszczeniami i uszkodzeniem. Dostarczyć do pracowni nie później niŜ 5 godz. od pobrania próbek. Transportować w temp. pokojowej. 2. Metoda impakcyjna Płytki Petriego z odpowiednimi podłoŜami umieszcza się wewnątrz komory impakcyjnej aparatu. Pobór powietrza odbywa się z przepływem 100 l/min. Płytka Petriego umieszczona jest na obrotowym stoliku dzięki temu mikroorganizmy występujące w powietrzu zostają równomiernie rozsiane na powierzchni poŜywki. Po upływie czasu płytki umieścić w tubusie i dostarczyć do pracowni wykonującej badanie nie później niŜ 5 godz. od pobrania próbek. Transportować w temp. pokojowej. 5.17.2. Czystość mikrobiologiczna powierzchni: 5.17.2.1. Metoda kontaktowa – ilościowa słuŜąca do kontroli powierzchni płaskich i suchych za pomocą płytek zawierających odpowiednie podłoŜe wzrostowe z meniskiem wypukłym o powierzchni 25 cm2. Do badań ilościowych pojedyńcza próbka składa się z podłoŜy: TSA (tryptozowo-sojowego) i Sabourauda. Do pobranych próbek naleŜy dołączyć kontrolę: płytkę TSA, płytkę Sabourauda. Sposób poboru: • płytki osuszyć i doprowadzić do temp. otoczenia. • zdjąć wieczko i przyłoŜyć do badanej powierzchni na 10 sek. unikając obracania płytki. MoŜna uŜyć aplikatora o sile nacisku 500 g • zamknąć płytkę, odwrócić wieczkiem do dołu oznakować i umieścić w opakowaniu przeznaczonym do transportu (pojemniki Bi-Box) • oczyścić miejsce przyłoŜenia z ewentualnych resztek podłoŜa • płytki transportować i przechowywać nie dłuŜej niŜ 24 godz. bez dostępu światła w temp. od 5°C do 15°C. 5.17.2.2. Metoda wymazów – jakościowa, słuŜąca do kontroli powierzchni za pomocą jałowych wymazówek zanurzonych w płynie transportowym. Sposób poboru • wyjąć wymazówkę ze sterylnego opakowania i nawilŜyć jej koniec przez zanurzenie w probówce zawierającej płyn transportowy. Przycisnąć koniec wymazówki do ścianki probówki dla usunięcia nadmiaru płynu. Umieścić koniec wymazówki na powierzchni poddawanej badaniu i przetrzeć określony obszar obracając wymazówkę w dwóch kierunkach. WłoŜyć wymazówkę do probówki z płynem transportowym i aseptycznie złamać lub odciąć patyczek. • wstawić do statywu zabezpieczając przed wylaniem, oznakować i dostarczyć do Pracowni CB • transportować w pojemniku w temp. od 5°C do 15°C w czasie 4 godz. od momentu pobrania. 5.17.3. Badanie jałowości Próbki do badań z pojemników wielokrotnego uŜytku (puszki, kontenery) naleŜy pobierać aseptycznie do sterylnych pojemników lub torebek. Próbki materiału sterylizowanego w rękawach i torebkach papierowo-foliowych naleŜy zabezpieczyć przed uszkodzeniem stosując dodatkowe opakowanie. KaŜdą próbkę opisać podając datę sterylizacji, poboru oraz otwarcia pojemnika wielokrotnego uŜytku. Strona 4 z 5 5.17.4. Badanie czystości mikrobiologicznej. Pobieranie i transport próbek oraz wielkość próbek ustalona z uwzględnieniem wymagań zleceniodawcy. 5.17.5. Kontrola biologiczna procesu sterylizacji • Po ekspozycji Sporal S zabezpieczony przed zanieczyszczeniem i zawilgoceniem naleŜy dostarczyć do laboratorium w ciągu 24 godz. • Po ekspozycji wskaźniki: atest (para wodna) i atest (tlenek etylenu) transportować w temperaturze pokojowej do 25°C do 4 dni. Wskaźniki biologicznej skuteczności procesu sterylizacji po ekspozycji moŜna przechowywać w chłodziarce do 7 dni w temp. 2-7˚C. Nie wolno przechowywać w temperaturze równej, niŜszej niŜ 0°C. • zabezpieczyć wskaźniki przed uszkodzeniami w czasie sterylizacji (umieścić w rękawie lub torebce papierowo-foliowej) • włoŜyć je do pakietów testowych i ułoŜyć równomiernie w komorze sterylizatora (półka górna i dolna) • przeprowadzić wybrany proces sterylizacji • wyjąć wskaźniki z pakietu kontrolnego i opisać (data sterylizacji oraz rozmieszczenie) • zabezpieczyć przed uszkodzeniem i zanieczyszczeniem 5.17.6. Kontrola skuteczności dezynfekcji komorowej Kontrolę przeprowadza pracownik Nadzoru Epidemiologicznego za pomocą testów „A” i „S”. Po ekspozycji testów i zabezpieczeniu przed zanieczyszczeniem i zawilgoceniem próbki naleŜy dostarczyć wraz z protokołem z kontroli do pracowni w czasie 24 godz. Transportować w temp. pokojowej tj. do 25 °C lub w temperaturze od 2°C do 8°C. 5.18. Dostarczanie szczepów bakteryjnych w celu identyfikacji bądź potwierdzenia identyfikacji. Wyizolowane szczepy bakteryjne naleŜy przesłać na skosach agarowych zabezpieczonych przed wyschnięciem i zanieczyszczeniem oraz oznaczone kodem próbki, z której zostały wyhodowane. Transport i przekazanie próbki ze szczepem do Oddziału Mikrobiologii powinien być zgodny z punktem 5- zasadami ogólnymi. Szczepy naleŜy przesyłać przesyłką priorytetową odpowiednio oznaczoną (materiał zakaźny) lub dostarczać osobiście. 5.19. CZAS OCZEKIWANIA NA WYNIKI BADAŃ: A. Badania bakteriologiczne Od 2 do 5 dni w zaleŜności od ilości izolowanych bakterii. Tylko badania bakteriologiczne moczu, w przypadku wyniku ujemnego, moŜna odebrać po 24 godzinach. Pracownia Schorzeń Jelitowych zastrzega sobie moŜliwość przedłuŜenia do 2 tygodni czasu oczekiwania na pełny wynik w przypadku typowania serologicznego. B. Badania serologiczne Od 2 dni do 2 tygodni w zaleŜności od ilości zlecanych badań przez naszych zleceniodawców. KaŜdorazowo w punkcie przyjęcia próbek naleŜy zapytać kiedy moŜna odebrać wyniki badań. C. Badania parazytologiczne kału Od 2 do 5 dni wynik badania koproskopowego (np. kału). W przypadku badań immunoenzymatycznych (np. lambliozy), w zaleŜności od ilości zlecanych badań przez naszych zleceniodawców do 2 tygodni. D. Badanie mykologiczne Do 10 dni w zaleŜności od czasu izolacji grzybów. E. Badania Pracowni Badań Czystościowych i Szkodliwych Czynników Biologicznych. Od 3 do 16 dni w zaleŜności od rodzaju badania 6. Dokumenty związane. Brak 7. Wykaz załączników Brak Strona 5 z 5