KRĄŻKI DO WYKRYWANIA ESBL

KRĄŻKI DO WYKRYWANIA BETA-LAKTAMAZ O SZEROKIM ZAKRESIE
DZIAŁANIA (ESBL)
Do wykrywania wytwarzania ESBL u szczepów E. coli, Klebsiella spp oraz
Enterobacteriaceae wytwarzających indukowane AmpC.
Ponieważ coraz częściej pojawiają się doniesienia na temat zakażeń powodowanych przez
szczepy ESBL, jest ważniejsze niż kiedykolwiek ich wczesne i dokładne wykrywanie
w laboratorium. Obecnie poleca się sprawdzanie wszystkich szczepów Enterobacteriaceae
albo z cefpodoksymem (ogólnie najlepszy substrat dla wszystkich ESBL) lub z cefotaksymem
i ceftazydymem. Szczepy, które okazały się oporne na jedną z tych cefalosporyn powinny być
następnie badane na synergizm cefalosporyna/klawulanian.
Są różne metody badania synergizmu, jedna z nich jest kombinacją metody krążkowej, gdzie
średnice stref zahamowania wokół krążków z cefalosporynami porównuje się ze strefami
dookoła krążków zawierających tę samą cefalosporynę z klawulanianem. Dla szczepów
podejrzewanych o to, że wytwarzają indukowane AmpC beta-laktamazy, poleca się badanie
synergizmu dla cefepimu i cefpiromu.
Krążki MAST ESBL mają następujące zalety:
• Test synergizmu z dwoma krążkami dyfuzyjnymi
• Zestawy par krążków
• Wybór antybiotyków
• Niski koszt potwierdzenia ESBL
• Zgodność wykonania
• Zgodne ze standardami HPA, BSAC i CLS
• Standardowy format rurek
• Wygodne i łatwe układanie
i CLSI
SKŁAD I ZAWARTOŚĆ
Nr Kat. Opis
D62C
3 x Cefotaksym 30
3 x Cefotaksym 30/Kwas klawulanowy 10
D63C
3 x Cefepim 30
3 x Cefepim 30/kwas klawulanowy 10
D64C
3 x Ceftazydym 30
3 x Ceftazydym/Kwas klawulanowy 10
D65C
3 x Cefpirom 30
3 x Cefpirom 30/Kwas klawulanowy 7,5
D66C
3 x Cefpodoksym 10
3 x Cefpodoksym 10/Kwas klawulanowy 1
D52C
1 x Ceftazydym 30
1 x Ceftazydym 30/Kwas klawulanowy 10
1 x Cefotaksym 30
1 x Cefotaksym 30/Kwas klawulanowy 10
1 x Cefpodoksym 30
1 x Cefpodoksym 30/kwas klawulanowy
PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAŻNOŚCI
Przechowywać w 2 - 8°C w dostarczonych
pojemnikach do daty ważności podanej na
etykiecie na opakowaniu. Pozwolić na
osiągnięcie temperatury pokojowej przed
otwarciem.
WYKONANIE TESTU
1. Wykonać zawiesinę z czystej, świeżej
hodowli
badanego
drobnoustroju
o gęstości 0,5 standardu Mc Farlanda.
2. Nanieść zawiesinę jałowym wymazem na
powierzchnię płytki agarowej (np. Mueller
Hinton Agar nr. kat. 1170). Alternatywnie
można także posiać rozcieńczenie 1:100
zawiesiny o gęstości 0,5 Mc Farlanda na
Isotonic Sesitivity Test Agar MAST
(DM604), zgodnie z BSAC.
3. Umieścić jałową igłą lub pęsetą po jednym
krążku każdego typu (krążek z kombinacją
z kwasem klawulanowym oraz krążek
z odpowiadającym
mu
samym
antybiotykiem) na posianym podłożu,
zapewniając
wystarczającą przestrzeń
między krążkami, aby pozwolić na
utworzenie się wyraźnie odgraniczonych
stref zahamowania wzrostu. Na jednej
płytce Petriego o średnicy 9 cm można
umieścić 3 pary krążków do oznaczania
ESBL. Dla wygody można użyć dyspenser
MAST (MDD6).
4. Inkubować w 35 - 37°C przez 18 – 24 godz.
5. Zmierzyć i zapisać średnice wszystkich
obserwowanych
stref zahamowania
wzrostu.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
Porównać strefę zahamowania wzrostu
dla krążka z samym antybiotykiem do
strefy
dla
kombinacji
antybiotyku
z kwasem
klawulanowym
zgodnie
z regułami podanymi w odpowiedniej
Instrukcji użycia.
KONTROLA JAKOŚCI
W poniższej tabeli umieszczono wszystkie
szczepy do rutynowego użycia. Do
pojedynczych oznaczeń należy wybierać je
zgodnie z Instrukcjami użycia.
Organizm badany
Escherichia coli NCTC 13351
Escherichia coli NCTC 13352
Escherichia coli NCTC 13353
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Escherichia coli ATCC 25922
KONTROLA JAKOŚCI WYKONANA PRZEZ
UŻYTKOWNIKA
Kontrolę jakości należy wykonać dla co
najmniej jednego drobnoustroju, aby
wykazać dodatnią reakcję, oraz co
najmniej dla jednego drobnoustroju o
reakcji ujemnej. Strefy zahamowania
wzrostu otrzymane dla kombinacji
antybiotyku z kwasem klawulanowym
oraz dla krążka z odpowiednią samą
cefalosporyną sprawdzane na szczepie
kontrolnym ESBL ujemnej E. coli (np. ATCC
25922) powinny być równe lub nie
wykazywać większej różnicy średnicy, niż 2
mm. Każda większa różnica wskazuje na
złe funkcjonowanie lub utratę aktywności
krążka. Nie używać produktu, jeżeli reakcje
dla
szczepów
kontrolnych
są
nieprawidłowe.
OGRANICZENIA TESTU
Żeby optymizować wykrywanie ESBL
zaleca się używanie tych krążków
w kombinacji z innymi krążkami do
wykrywania ESBL firmy MAST.
Aby uniknąć potencjalnie błędnych
wyników, używać krążki z kombinacją
antybiotyku z kwasem klawulanowym
razem
z
krążkami
z
samym
odpowiadającym mu antybiotykiem z tej
samej serii/opakowania.
Nie używać rurek z różnych serii lub
opakowań.
LITERATURA
Literatura dostępna na życzenie.