Obliczenia do ćwiczeń 3
Transkrypt
Obliczenia do ćwiczeń 3
TABELA 1A: Krzywa kinetyczna Nr 1 Obliczanie prędkości początkowej vo1 reakcji katalizowanej, poprzez matematyczne wyliczenie współczynnika kierunkowego k1 stycznej do krzywej kinetycznej przy t = 0, dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) w mieszaninie inkubacyjnej [S]o1 = ............mM, w mieszaninie inkubacyjnej M1 2 ti [min] ti 0,5 0,25 1,0 1,00 1,5 2,25 2,0 4,00 2,5 6,25 3,0 9,00 A470 xi = A470 l S0 - xi S0 yi· ti S0 - xi yi ln S0 2 Σti = Σyi · ti = ……….. ……………….. . Prawo Lamberta Beera: . A=ε c l TG 470 26,6 mM cm-1 Współczynnik absorbancji molowej tetragwajakolu: Grubość warstwy mierzonego roztworu: l = 1 cm xi Stężenie tetragwajakolu (produktu reakcji) po czasie t i : = A470 l mM Dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o1 = ........................... mM H2O2, współczynnik kierunkowy k1 stycznej do krzywej kinetycznej (gdy t = 0): k yt = t i i 2 i ------------------ = prędkość początkowa reakcji vo1 . vo1 = - k1 [S]o1 = ........................................ mM TG min -1 1 TABELA 1B: Krzywa kinetyczna Nr 2 Obliczanie prędkości początkowej vo2 reakcji katalizowanej, poprzez wyliczenie współczynnika kierunkowego k2 stycznej do krzywej kinetycznej przy t = 0, dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o2 = ............mM, w mieszaninie inkubacyjnej M-2 ti [min] 2 ti 0,5 0,25 1,0 1,00 1,5 2,25 2,0 4,00 2,5 6,25 3,0 9,00 A470 xi = A470 l S0 - xi S0 S0 - xi yi ln S0 2 Σi = yi· ti Σyi · ti = . Prawo Lamberta Beera: . A=ε c l TG 470 26,6 mM cm-1 Współczynnik absorbancji molowej tetragwajakolu: Grubość warstwy mierzonego roztworu: l = 1 cm Stężenie tetragwajakolu (produktu reakcji) po czasie t i : xi = A470 l mM Dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o2 = ........................... mM H2O2, współczynnik kierunkowy k2 stycznej do krzywej kinetycznej (gdy t = 0): k yt = t i i 2 i ------------------ = prędkość początkowa reakcji vo2 . vo2 = - k2 [S]o2 = ........................................ mM TG min -1 2 TABELA 1C: Krzywa kinetyczna Nr 3 Obliczanie prędkości początkowej vo3 reakcji katalizowanej, poprzez wyliczenie współczynnika kierunkowego k3 stycznej do krzywej kinetycznej przy t = 0, dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o3 = ............mM, w mieszaninie inkubacyjnej M-3 ti [min] 2 ti 0,5 0,25 1,0 1,00 1,5 2,25 2,0 4,00 2,5 6,25 3,0 9,00 xi A470 = A470 l S0 - xi S0 yi· ti S0 - xi yi ln S0 2 Σi = Σyi · ti = . Prawo Lamberta Beera: . A=ε c l TG 470 26,6 mM cm-1 Współczynnik absorbancji molowej tetragwajakolu: Grubość warstwy mierzonego roztworu: l = 1 cm xi Stężenie tetragwajakolu (produktu reakcji) po czasie t i : = A470 l mM Dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o3 = ........................... mM H2O2, współczynnik kierunkowy k3 stycznej do krzywej kinetycznej (gdy t = 0): k yt = t i i 2 i ------------------ = prędkość początkowa reakcji vo3 . vo3 = - k3 [S]o3 = ........................................ mM TG min -1 3 TABELA 1D: Krzywa kinetyczna Nr 4 Obliczanie prędkości początkowej vo4 reakcji katalizowanej, poprzez wyliczenie współczynnika kierunkowego k4 stycznej do krzywej kinetycznej przy t = 0, dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o4 = ............mM, w mieszaninie inkubacyjnej M-4 ti [min] 2 ti 0,5 0,25 1,0 1,00 1,5 2,25 2,0 4,00 2,5 6,25 3,0 9,00 A470 xi = A470 l S0 - xi S0 S0 - xi yi ln S0 yi· ti 2 Σi = Σyi · ti = . Prawo Lamberta Beera: . A=ε c l TG 470 26,6 mM cm-1 Współczynnik absorbancji molowej tetragwajakolu: Grubość warstwy mierzonego roztworu: l = 1 cm xi Stężenie tetragwajakolu (produktu reakcji) po czasie t i : = A470 l mM Dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o4 = ........................... mM H2O2, współczynnik kierunkowy k4 stycznej do krzywej kinetycznej (gdy t = 0): k yt = t i i 2 i ------------------ = więc prędkość początkowa reakcji vo4 . v04 = - k4 [S]o4 = ........................................ mM TG min -1 4 TABELA 1E: Krzywa kinetyczna Nr 5 Obliczanie prędkości początkowej (v o)5 reakcji katalizowanej, poprzez wyliczenie współczynnika kierunkowego k5 stycznej do krzywej kinetycznej przy t = 0, dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o5 = ............mM, w mieszaninie inkubacyjnej M-5 ti [min] 2 ti 0,5 0,25 1,0 1,00 1,5 2,25 2,0 4,00 2,5 6,25 3,0 9,00 A470 xi = A470 l S0 - xi S0 S0 - xi yi ln S0 2 Σi = yi· ti Σyi · ti = . Prawo Lamberta Beera: . A=ε c l TG 470 26,6 mM cm-1 Współczynnik absorbancji molowej tetragwajakolu: Grubość warstwy mierzonego roztworu: l = 1 cm Stężenie tetragwajakolu (produktu reakcji) po czasie t i : xi = A470 l mM Dla początkowego stężenia nadtlenku wodoru (substratu reakcji) [S]o5 = ........................... mM H2O2, współczynnik kierunkowy k5 stycznej do krzywej kinetycznej (gdy t = 0): k yt = t i i 2 i ------------------ = więc prędkość początkowa reakcji vo5 . vo5 = - k5 [S]o5 = ........................................ mM TG min -1 5 TABELA 3A: Obliczanie wartości stałych K m , Vmax i kkat z równania prostej Lineweavera-Burka metodą najmniejszych kwadratów -1 [S]0 = xi x i V01 = yi y = i 2 xi x = Równanie prostej: 2 i xi yi x = i yi = y=ax+b Równanie Lineweavera-Burka: 1 K 1 1 m V S 0 V m a x [] 0 V m a x Km 1 a= b= Vmax Vmax Obliczenia: Ilość prób: N = N x x i 1 i = N 2 x N y y i1 i = N Nx y = N x y Nx y a= i1 i i N x i1 2 i 2 = Nx b = y ax = 1 -1 = ……………………… mM min b a = ……………………… mM Vmax Km = Vmax [E] = ……… M = ……………….mM kkat = Skuteczność= Vmax -1 -1 = ………………………. min = ……………… s [E ] k kat -1 -1 -1 -1 = …………………mM s = ……………… M s Km 6