cHoLtNoESTERAZA (CHE)

Nr kat.
1
Nrkat
1588
1x50ml
cHoLtNoESTERAZA (CHE)
11589
4x50mL
PRZEcHOWYWAĆ W TEMP'
2_8oc
cHoLTNoESTERAZA (CHE)
((
0dczynniki do pomiaru stężenia cholinoesterazy
Tylko do użytku in Vltro w laboratoriUm klinicznym
BUTYRYLOTIOCHOLINA
ZASADA METODY
cholinoesteraza (cHE) kataliz!]e hydrolizę bltyrylot]ocho]iny do tjocho|iny
katality@ne oznacza sie na podstawie vybkoścj spadku hek$cyianożelazianu
i
i kwasu
masłowego' stężonie
Liczba dibukainowa (yoy
(lIl) w wyniku poniższych reakcji
Nomalne1omozygoty'
holeloŻygoty
mierzy się przy 405 nmr23.
Butyrylotocholina
H20
+
slednio
CHE
---------------->
2Tiocholina+2oH+2Hok9acyjanożoazan(l|)
Tiocholina
+
Kwas maslowy
Atypore
Dtiobis(cholina)+2NeksacyjanożoLazan(ll)+HŻo
-=)
Atypowy żoenzym cholin@sterazy (AA) można zmier4ć za pomocą 'liczby dibukainowej',
zahamowanie aktywności enzymu W obecnosci dibuka ny i Wyrażanej w procentach23
oznaczają@j
Nr
B
Odczynnik
kat
1
kat
Nr
1588
1
1589
4xło'l
|
,^lort
I
I
ax10-l
sKŁAD
A.
odczynnik' Pfofoslqan 95 mmol/l, h8ksacyianożelazian (lll) 2'5 mmo|/
B
Odczynnik. Butyrylotiocholina 60
mmol/1.
'
pH 7'6'
Granica detekcji: 123 U/l
-
Powtilzalność (WeMąbzsryjna):
odczynnik roboczy do cholinoesterazy calkowitei| Wać zawadośćbutgleczki z odcrynnikiem B do butelk] z
odczynnkem A' Dellkatne Wymieszaó, lnne objętości odcąnnka loboczego mogą byó przygotowang W
następują@j proporcjj:4 ml odczynnika A + 1 ml odeynnika B' stabilnoŚó przez 3 dni Wtemp' 2-8oc'
rozpuscićzawańosćfiolkizodc4nnikiemcw15mlodczynnika
roboczego do cholinoesterazy caikowtgj. De ikatn e wym]eszać' stabllnośc przez 3 dni Wtemp' 2-8"c'
WYPosAżENlE DoDATKoWE
_ Analizator' spekirofotometr ub fotometr z temostatowanym gniazdem na 37"c fltem o długośc iali 405
nm.
cm'
MATER|AŁ Do BADAŃ
1
i EDTA za|ecane są jako
pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami' Heparyna
antykoagu anty
W
surowicy lub o$czu jest siabilna przez 14 dni
W
temperaturze 2_8rc'
Doprowadaó odczynnik roboczy
i
l 1279
-
PoprawoŚć:
poróman]u
Uł =
1BB 0
AmA.Uu.min
lńalil
Javl
=
0'91 Affń
|
|
1'0
0'6
o/" l
"ó ]
25
25
Wniki uzyskano przy użyciu tego odczynnika nie Wykazały róznic systemałcznych
z odczynnikam roforoncyjnymi. szczogoły eksperymoniów porómawczych dostępno są
w
na
lnteńeroncje: Lipemia (biglicerydy < 10 gil) i bilkubina (< 20 mg/dl) nie inteńerują Homo|iza może mieć spływ
na Wynik oznaczenia nno loki i substancje mogą int€rferowaó'.
Podana chaakterystyka mebologicaa zostda u4skana W przypadlu użycia analizatora' vvyniki mogą różnić
się przy uzyciu innogo prryuądu lub W pro@durze manualnej'
CHAMKTERYSTYKA DIAG NOSTYCZNA
cholinoestoraza
w
slrowicy jest także naywana pseudocholinoestorazą ce]em joj odróżnionia
od
chol]noest8razy WysĘpu]ącej w eryłrocytach i końcósłach neruowych' cholinoesteraa ]est syntetyzowana w
Wabobi€ i jej oznaczanie może byc mkażnikiem funłcjonowania Wąlroby. spadek akłMościenzymu jest
odbiciem j6j zabuuonej syntezy
Joj pom ar ]est szczogólnle Ważny W diagnozie pacjentów z atypowymi odmianam enzymu i W przypadkach
zairucia fosfoorganicznymi $odkami owadobojczymi' Pejenci z atypowa. odmianą enzymu przejawiają Wy$ką
Waliwśó na $kcynylocholinę _ lek używanY W opgacjach jako substancja eiotczająca mięśniótrłę'Jej
identi4ikacja za pomocą liczby dib!kainorej ]est Ważna' aby zapobiec WydłUżonej faz]e bezdechu
sporcdowanej zastoewaniem t6go leku{ 6.
WynikóW pojedynczego badania, ale powinna lączyc
UWAGI
lSr-
I
l
20
'l]!*almin'
Diagnoza klinicaa nie powinna być stawiana na podstawie
ZaróMo dane kliniczn€ iak i |aboratoryjne'
apaatdo temperatury rgakcji'
Odpipetowac do kuwety (Uwaga 2)i
Odcz/rlkroboczy(Uwaga3)
Próba badana
1'
25 uL
2'
3'
!Ąrymieszać i Wlożyć kuw€tę
5'
Po 90 skundach zareiestrowe ab$rbancje poęałkową' a następnie wykonaó pomiary w odstępmh 30
skundowych przez kolejno g0 sekund
obliczyć różn]cę absorbancii pomiędzy kolejnymi pomiarami oraz średnią różnic absorbancji na mnutę
4.
n
Żmiany stężenia cholinoestgaą W surowicy mogą rómież wystąpić W innych staneh chorobowych' Jest ono
obn]żone Wosbych zapaoniach, zatorach płucnych dystofii mięsniowej i zawa16 Ńrca45'
WYKONANIE OZNACZENIA
1'
2.
cV
srednio steŹon]e
-
PRzYGoToWANlE oDczYNNlKÓW
cholinoesterąa
stężeni€
5416 U/l - 90'27
- czu|osc:0'015
odczynnik (nr kat. 1 1578): Dibuka na 0.3 mmoyl, po rozpuszczenlu. 10 x 15 ml.
o$cze
2.05 BaVl.
I
ODCZYNNIKI DODATKOWE
fub
=
_ odtwazalność (międrysoryjna):
odczynnik: obecnośó zawiesiny, nętnienie, ab$rbancja ślepej poniżej 1'300 przy 405 nm (kureta z drogą
optyczną 1 cm)
surcWica
WeMębzny system konlroli jakości i plo@dur naprawzych, jeżeli
dopugczalnych tol€rancji'
Granica l]n]owościi 25000 U/l; 417 pkavl, Przy v'yżVych Wańosciach rozciończyć próbkę Wodądestylowaną
w stosunku 1:2 i poMqryc pomia.
Oznak zopsuclal
1
y"
CHARAKTE RYSTYKA METROLOGICZNA
-
Śr9dnio
odcąnniki są stabilne do daty MŻności podanej na etykiecie, jeżeli są szczelnie zamknięte olaz jeżeli nie
dopuści się do ]ch zaniec4szczenia podczas użycia.
z drogąoptyczną
tr4asny'
5416U/l=90.27FkaU111.0%120
1279 -,1 = BB.0 rrkaul
| 0.7 90 I
odczynnikrob@ryzdibukainą(Uwaga1):
oo
KoNTRoLA JAKoścl
PRZECHOVVYWANIE
Kurety
.
Wartości ref orencyjnych'
Przechowywac w temp. 2-80C.
C
l
Wartości kontolne nie mieszczą się W zakresig
lx4oml
I
45-72ÓÓ
chalakter orientacyjny; każde Laboratorium powinno ustal]ó Wiasny Żakres
Kade laboratońum powinno ustalić
zAWARToŚc oPAKoWANlA
A'odczynnil
homołgoty:
Podane zakresy mają ]edyni€
,lsł"
]
|
do fotomelr!. Rozpocząć pom]ar czasu'
(-VUmin).
3'
odczynnikrobocryzdibukainąjestuzywanywyląąniedookreslanialiczbydibukainorej'
odczynniki t9 mogą być slo$Wane W ana izatorach automatycznych' Ap kacje do wieiu
Z n]ch dostępne
Użyc odczynnik roboc4 bez dibukainy do pomiaru calkowitej cłlolinoesterazy. a odczynnik roboczy z
dlbukainądo pomiaru nle zahamoWanoj cholinoest6razy'
BIBLIOGRAFIA
1. DGKc
Proposal ol standard mehods for tl]g detemination of gnzymo catal}łic @ncenfalions in
plasma at 37"C I Cholinestsrase. Eur J Clin Chen Chin Biachem 1 992; 30r 1 63- I 70.
OBLICZENIA
są
na życzenie
srum and
I
w próbie oblicza się pEy zastosowaniu
stężonie cholin€sterazy
Vt
x
poniżVego ogólnego
wzoru:
2-
AA/minx-=U/L
Liczba
d
bukainowa
(%) =
I
I
100
x65804.U/l
x1097=ukaul
(1
1984:
22
67
1
-67 6.
3. Mi(aker M,
Absorbanc]a molowa (E) baMnika przy 405 nm Wynosi 927 droga optyczna (l) - 1 cm' calkowta objętośc reakci
{V0 - 1'525' ob]ętosc próbki (Vs) - 0.025' a 1 t-]/L róWna się 0'0166 ŃaUL' Do ob|icz€nia sĘżenia
katalityąnego sto$je się następujac Mory:
..
wmn
Panteghini M and Bonora R. Evalualion of a new contlnuous @lorimolric mothod fq dettrmination of srum
psudo{holinesleras catalytic activity and its applicaiion to a rnfiiugal fast analyst J Clin Chen Clin
Biachen
106
Britten JJ and Daw$n PJ. Compaign of a @mmercially availablo assay system with two
reference methods for be dotormination of plasma cholinesterase var]ants' cin cńen ]983i 29| 17461?51
4'
Tietz Textbook ofclinical chemistry' 2nd edition. Buńis cA. Ashwod ER. WB saunders
5.
6.
Young 0S. Etfects of drugs on clinical laboratory tests, 3th
00 x nie zahamowana CHE i calkowita CHE)
Cho lnoesteraza (37"C):
Kobioty
M1 1588i 0501
4620ł 1500
U/| =
3930.10800 U/l
=
76'9 191 pkavl
65
5-lB0 phaul
\\'rtrrrirca: [}iłSr-stołsS.A. (łlstr l]tirr
/\() l
1997.
FriedmanandYoung.Effectsoldi*asonclinicallaboratorytests,3thed.AACCPre$,1997.
WARToŚcl REFERENcYJNE
NĘżczyźni
ed AACC Press,
a 3(). l]atccltrna (l Iiszpania)
J]'']. ll'l 'litiljl,x.'l' I\Ą: '\'\'.|]l/|ra|j |//]i
(-']:]i]
- lią': l)] 1/)l1 Lar/,
].\l) rln)|'1|'|'
co.'
1994.