Dako Levamisole Endogenous Alkaline Phosphatase

Dako Levamisole Endogenous Alkaline Phosphatase

Dako
Levamisole
Endogenous Alkaline
Phosphatase Inhibitor
Nr kat. X3021
Przeznaczenie
Do stosowania w diagnostyce in vitro.
Opisywany produkt jest przeznaczony do stosowania w odczynach immunohistochemicznych (IHC)
i hybrydyzacji in-situ (ISH) z wykorzystaniem fosfatazy alkalicznej w preparatach cytologicznych, skrawkach
mrożakowych oraz skrawkach utrwalanych w formalinie i zatapianych w parafinie.
Levamisole, Endogenous Alkaline Phosphatase Inhibitor zawiera stężony roztwór lewamizolu dodawany do
substratu użytkownika lub roztworu buforowego substratu. Po dodaniu lewamizolu do roztworu buforowego
substratu substrat przygotowuje się zgodnie z protokołem użytkownika i stosuje do preparatu.
Streszczenie i
informacje ogólne
Produkt powoduje tłumienie nieswoistego odczynu wywołanego obecnością endogennej fosfatazy alkalicznej w
odczynach IHC i ISH z zastosowaniem fosfatazy alkalicznej. Został przetestowany z następującymi substratami
do odczynów z wykorzystaniem fosfatazy alkalicznej: Fast Red (nr kat. K0597 i K0699), New Fuchsin (nr kat.
K0596 i K0698), BCIP/NBT (nr kat. K0598) i BCIP/NBT/INT (nr kat. K0599).
Zobacz dokument „Ogólne instrukcje wykonywania odczynów immunohistochemicznych” firmy Dako lub
następujące części instrukcji do systemu detekcji IHC: 1) Zasady procedury, 2) Niezbędne materiały
niedostarczone z zestawem, 3) Przechowywanie, 4) Przygotowanie preparatu, 5) Wykonanie odczynu,
6) Kontrola jakości, 7) Rozwiązywanie problemów, 8) Interpretacja wyniku odczynu, 9) Ograniczenia metody.
Dostarczany
odczynnik
15 mL odczynnika hamującego aktywność endogennej fosfatazy alkalicznej zawierającego lewamizol
i konserwant.
Dodać odpowiednią liczbę kropel odczynnika Levamisole, Endogenous Alkaline Phosphatase Inhibitor do
substratu lub roztworu buforowego substratu w celu uzyskania końcowego stężenia wynoszącego około
0,0002 mol/L lewamizolu (jedna kropla inhibitora na mL substratu).
Środki ostrożności
1. Odczynniki są przeznaczone dla przeszkolonych Użytkowników.
2. Należy stosować właściwe wyposażenie ochronne, zabezpieczające przed kontaktem odczynnika ze skórą
bądź oczami.
3. Niewykorzystany odczynnik należy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i krajowymi.
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2–8°C. Nie zamrażać.
Nie należy używać odczynników po upływie terminu ważności podanego na fiolce. Jeśli odczynniki
przechowywane są w warunkach innych niż określone powyżej, faktyczne warunki przechowywania powinny
zostać zweryfikowane przez użytkownika.1 Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego
produktu. Dlatego równolegle z odczynami na materiale pochodzącym od pacjentów, należy wykonywać
dodatnie i ujemne próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie można wyjaśnić
różnicami w procedurach laboratoryjnych, gdy podejrzewa się problem z produktem, należy się skontaktować z
działem wsparcia technicznego firmy Dako.
Przygotowanie
materiału
(113290-002)
Ten produkt nadaje się do stosowana z rozmazami cytologicznymi, np. rozmazami z krwi obwodowej,
skrawkami mrożakowymi oraz skrawkami tkankowymi utrwalonymi w formalinie i zatopionymi w parafinie.
301329PL_001 s. 1/2
Charakterystyka
wydajnościowa
Przy wykonywaniu odczynów IHC i ISH często obserwuje się aktywność endogennej fosfatazy alkalicznej.
Silna aktywność endogennej fosfatazy alkalicznej występuje w różnych rodzajach komórek i tkanek, w tym
nabłonku pęcherza moczowego, blaszki właściwej jajnika, nerkach i śliniankach.2 Izoforma jelitowa fosfatazy
alkalicznej występuje zwykle na rąbku szczoteczkowym komórek nabłonkowych jelita cienkiego3 a izoforma
łożyskowa ludzkiej fosfatazy alkalicznej jest w warunkach prawidłowych wytwarzana w mikrokosmkach
syncytiotrofoblastu łożyska.4 W preparatach cytologicznych obecność fosfatazy alkalicznej stwierdza się
w granulocytach obojętnochłonnych segmentowanych, pałeczkowatych i metamielocytach. Fosfataza
alkaliczna występuje również w komórkach białaczkowych przewlekłej i ostrej białaczki granulocytarnej oraz
w niektórych rzekomobiałaczkowych odczynach neutrofilowych.5
Podczas oceny preparatów tkankowych przy użyciu technik IHC lub ISH z zastosowaniem fosfatazy alkalicznej,
występowanie endogennej fosfatazy alkalicznej może niejednokrotnie zaburzać swoisty odczyn antygenu
docelowego. Aktywność endogennej fosfatazy alkalicznej można hamować podczas wykonywania odczynu
IHC, dodając do substratu roztwór lewamizolu, co nie spowoduje istotnego osłabienia odczynu swoistego w
miejscach występowania antygenu.6,7 Levamisole, Endogenous Alkaline Phosphatase Inhibitor najlepiej nadaje
się do hamowania aktywności endogennej fosfatazy alkalicznej, może być jednak stosowany także do
preparatów cytologicznych i utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie skrawków tkankowych.
Ograniczenia swoiste
dla opisywanego
produktu
Levamisole, Endogenous Alkaline Phosphatase Inhibitor nie blokuje aktywności izoformy jelitowej fosfatazy
alkalicznej.
Piśmiennictwo
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988: Final Rule, 57FR7163. February 28, 1992
2. Ponder BA, Wilkinson MM. Inhibition of endogenous tissue alkaline phosphatase with the use of alkaline
phosphatase conjugates in immunohistochemistry. J Histochem Cytochem 1981; 29(8):981
3. Uchida T, et al. Immunohistochemical localization of placental and intestinal alkaline phosphatases.
DeLellis RA, ed. Advances in immunohistochemistry. New York: Masson Publishing 1984; 185
4. Groote GD, et al. Use of monoclonal antibodies to detect human placental alkaline phosphatase. Clin
Chem 1983; 29(1):115
5. Seiverd CE. Additional staining procedures. Seiverd CE, ed. Hematology for medical technologies.
Philadelphia: Lea & Febiger 1972
6. Boenisch T, Farmilo AJ, Stead RH. Handbook: Immunochemical Staining Methods. 3rd Edition. Dako 2001
7. Elias JM. Immunohistochemical methods: endogenous alkaline phosphatase activity. Immunopathology.
A practical approach to diagnosis. Chicago: ASCP Press 1990; 49
Edition 05/07
(113290-002)
301329PL_001 s. 2/2