Multilayred TiN/Ti/a-C:H coatings for tribological application

Materiały konferencyjne BioMedTech SILESIA 2016 I BioMedTech SILESIA CONFERENCE 2016
JUNIOR - STRONA 362
Aleksandra Skubis1, Bartosz Sikora1, Małgorzata Kimsa2, Urszula Mazurek1. Zmiany ekspresji genu
kodującego fosfatazę alkaliczną (ALP) w komórkach macierzystych poddanych działaniu
deksametazonu, kwasu askorbinowego i β-glicerolofosforanu. 1Katedra i Zakład Biologii
Molekularnej, Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej, Śląski Uniwersytet
Medyczny w Katowicach, 2Katedra i Zakład Biochemii, Wydział Lekarski w Katowicach, Śląski
Uniwersytet Medyczny w Katowicach.
Opiekun pracy: prof. dr hab. Urszula Mazurek
STRESZCZENIE
Komórki mezenchymalne macierzyste tkanki tłuszczowej (ADSC ang. adipose derived stem cells) to
komórki posiadające zdolność różnicowania w kierunku komórek mezodermy (adipocyty, chondrocyty
i osteocyty), co wiąże się z wielkimi nadziejami w medycynie regeneracyjnej. Celem eksperymentu jest
wydajny proces różnicowana komórek macierzystych w osteocyty. Możliwości jakie stwarzają
zróżnicowane komórki ADSC to m.in. wykorzystanie ich w regeneracji uszkodzeń kości powstających
w wyniku urazów mechanicznych oraz trudno gojących się złamań u osób z obniżonym potencjałem
regeneracyjnym np. u osób z chorobami cywilizacyjnymi takimi jak otyłość, cukrzyca.
Do wskaźników kościotworzenia należy białko ALP (ang. Bone Alkaline Phosphatase) – marker
aktywności osteoblastów. Jest ono kodowane przez gen ALP, którego ekspresja była oceniana
w komórkach macierzystych ADSC hodowanych z dodatkiem deksametazonu, kwasu askorbinowego
(w dwóch różnych stężeniach) i β-glicerolofosforanu. Fosfataza alkaliczna białko, które bierze udział
w tworzeniu osteoidu i mineralizacji. W doświadczeniu wykorzystano ludzkie mezenchymalne komórki
macierzyste pochodzące z tkanki tłuszczowej (ADSC, ang. Adipose-Derived Stem Cells, PT-5006, Lonza,
Szwajcaria). Hodowlę prowadzono przez 14 oraz 28 dni, a układ odniesienia stanowiły komórki
macierzyste tkanki tłuszczowej hodowane przez taki sam okres czasu tylko w pożywce standardowej
(DMEM, Lonza, Szwajcaria ) bez dodatków czynników różnicujących. Identyfikacja markerów była
przeprowadzana z wykorzystaniem techniki ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną
transkrypcją (Q RT-PCR, ang. quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction).
Identyfikacja markera kościotworzenia ALP oraz ilościowa, a także jakościowa ocena złogów wapnia
w komórkach różnicowanych pozwoli na określenie zmian molekularnych zachodzących na różnych
etapach dyferencjacji w kierunku komórek tkanki kostnej oraz umożliwi zoptymalizowane warunków
tego procesu w hodowlach in vitro.