Pobierz opis
Transkrypt
Pobierz opis
Joanna Biegaj-Fic Katedra i Klinika Położnictwa i Patologii Ciąży Uniwersytetu Medycznego w Lublinie ul. Staszica 16, 20-081 Lublin E-mail: [email protected] Częstość występowania Leptotrichii amnionii sp. nov. oraz wybranych infekcji wirusowych ( HPV, HSV-2, CMV) u kobiet ciężarnych. Zakończenie ciąży przed terminem dotyczy 6-15% wszystkich ciężarnych. Następstwa tego, zarówno krótko- jak i długotrwałe pod postacią umieralności, zachorowalności oraz trwałego kalectwa dzieci są jednym z najtrudniejszych problemów w perinatologii. Wśród licznych przyczyn nieprawidłowego przebiegu ciąży jednym z najmniej zbadanych są infekcje bakteryjne beztlenowcowe oraz infekcje wirusem brodawczaka ludzkiego u ciężarnych. Efektem działania wirusów i beztlenowców na płód mogą być poronienie, obumarcie płodu, wady anatomiczne lub zaburzenia wzrastania. Do największych uszkodzeń dochodzi w okresie organogenezy. Zakażenie może wywierać wpływ swoisty zależny od czynnika wirusowego, bądź nieswoisty. Zazwyczaj w przypadku wiremii u matki wirus dostaje się do łożyska i osiąga krążenie płodowe. W okresie płodowym w miarę postępu różnicowania się układów i narządów maleje wrażliwość płodów na teratogenne działanie wirusów. Czynniki zakaźne zazwyczaj mają działanie letalne. Wpływają na rozwój płodu tuż po zapłodnieniu zarówno poprzez hamowanie podziałów mitotycznych (z następową zmianą wzrostu komórek) jak i oddziałują cytotoksycznie. Ponadto zapalenie rozwijające się w odpowiedzi na zakażenie może powodować powstanie blizn lub zwapnień, zaburzając histogenezę, co wpływa na dalsze uszkodzenie płodu Pomimo ustalenia udziału czynników zakaźnych w nieprawidłowym przebiegu ciąży oraz wprowadzeniu nowych technik badawczych (PCR) wskazania do badań przesiewowych ciężarnych nie są jednoznacznie określone. Badania prowadzone w latach 70-tych pozwoliły na ustalenie częstości występowania wad wrodzonych w przebiegu różnych infekcji u ciężarnych. Nadal jednak częstość infekcji wirusowych, a szczególnie HPV występujących w określonych patologiach jaja płodowego nie jest znana. Niewyjaśnionym pozostaje problem skali aktywnego zakażenia wirusami ocenianego bezpośrednio metodą PCR (a nie pośrednio przez wykrywanie przeciwciał) i jego znaczenia w przedwczesnym zakończeniu ciąży. Celem pracy jest ocena obecności beztlenowców Leptotrichia amnioni sp. nov. oraz wybranych infekcji wirusowych: HPV, CMV, HSV2 u ciężarnych z ciążą o nieprawidłowym przebiegu lub powikłanych patologią jaja płodowego (małowodzie, wielowodzie, wada płodu). Cel pracy realizowany będzie poprzez ocenę występowania DNA Leptorichia amnioni sp. nov. i DNA HPV, CMV, HSV2 w wymazach z pochwy kobiet podczas rutynowego badania. Metodyka przeprowadzania badań, jaka jest użyta w pracy doktorskiej należy do najnowocześniejszych metod wykrywania ww. wirusów i bakterii. Jest to w chwili obecnej najbardziej skuteczna metoda wykrywania, charakteryzująca się największą czułością w identyfikacji występowania wirusów i bakterii. Dotychczasowa weryfikacja wirusa nie była wystarczająco skuteczna, dopiero zastosowana w pracy badawczej innowacja polegająca na analizie materiału genetycznego z DNA pozwala na znaczne wyeliminowanie ryzyka popełnienia błędu przy ocenie. PCR jest metodą bardzo specyficzną ze względu na dużą dokładność hybrydyzacji w wysokiej temperaturze; jedynym DNA, który ulega amplifikacji, jest odcinek zawarty pomiędzy parą primerów zhybrydyzowanych z wyjściowym DNA; dzięki tej metodzie stosunkowo łatwa stała się analiza genów, z których każdy stanowi mniej niż milionową część całkowitego DNA organizmu wyższego. Stosowana uprzednio metoda wykrywania wirusów i bakterii nie była wystarczająco czuła. W chwili obecnej nie istnieją doskonalsze metody identyfikacji drobnoustrojów. Przedstawiona w pracy metodyka analizy materiału genetycznego należy do najbardziej zaawansowanych metod badawczych na wykrywanie bakterii i wirusów powodujących zaburzenia prawidłowego przebiegu ciąży. Bakteria o nazwie Leptotrichia amnioni sp.nov. została wykryta dopiero w 2002 r. Obecnie nie ma jeszcze na świecie opublikowanych standardów profilaktyki oraz leczenia ww. bakterii. Dzięki metodzie PCR przedstawionej w pracy doktorskiej, wyniki przeprowadzonych badań mogą być wykorzystane jako najnowsze źródło informacji na temat bakterii, które będą przydatne w tworzeniu profilaktyki oraz standardów leczenia. Rozwoju badań związany jest z potrzebą rozbudowy laboratoriów co w znacznym stopniu podniesie innowacyjność dalszych prac badawczych. Przyczyni się również do poszerzenia wiedzy o czynnikach infekcyjnych i ich wpływu na nieprawidłowy przebieg ciąży oraz niepłodność.