Rekonstrukcja ubytków tchawicy kompozytowym materialem
Transkrypt
Rekonstrukcja ubytków tchawicy kompozytowym materialem
DOKTORATY, HABILITACJE / DOCTORS THESES, PROFESSORS THESES 303 Rekonstrukcja ubytków tchawicy kompozytowym materiałem węglowym Reconstruction of the tracheal defects by the composite carbon material Wojciech Ścierski Rozprawa na stopień doktora habilitowanego nauk medycznych ZABRZE 11.12.2008 RECENZENCI: Prof. dr hab. n. med. Mieczysław Szostek, Prof. dr hab. n. med. Tadeusz Orłowski, Prof. dr hab. inż. Jan Chłopek, Prof. dr hab. n. med. Marek Rokicki Leczenie operacyjne schorzeń tchawicy (guzów nowotworowych, zwężeń, urazów) w dużym stopniu uzależnione jest od długości objętego procesem chorobowym segmentu tego narządu. W przypadkach, gdy występuje konieczność resekcji odcinka tchawicy o długości do 3 cm rekonstrukcja polega na jego pierwotnym zamknięciu metodą „koniec do końca”. Ubytki o długości od 3 do 6 cm można również zamknąć tą metodą po dodatkowej mobilizacji tchawicy w odcinku szyjnym i/lub piersiowym. Resekcje tchawicy o długości ponad 6 cm wymagają rekonstrukcji z użyciem tkanek własnych chorego lub materiału syntetycznego. Pomimo stosowania różnych metod operacyjnych i materiałów w rekonstrukcji dużych (powyżej 6 cm), segmentowych ubytków tchawicy, jak dotąd nie znaleziono idealnego rozwiązania. Wykorzystywanie tkanek własnych chorego związane jest z wieloetapowością leczenia operacyjnego i niewielkim odsetkiem powodzeń. Zastosowanie materiałów syntetycznych jak dotychczas nie przyniosło spodziewanych efektów. Wciąż zatem poszukuje się materiału, który byłby skuteczny w rekonstrukcji dużych, segmentowych ubytków tchawicy. Celem podjętych badań była: 1. Ocena właściwości fizykomechanicznych tchawicy zwierzęcej w aspekcie ich przydatności do konstrukcji segmentowego implantu tchawicy z nowego biomateriału kompozytowego. ©by Polskie Towarzystwo Otorynolaryngologów – Chirurgów Głowy i Szyi Otrzymano/Received: 17.02.2009 Zaakceptowano do druku/Accepted: 24.02.2009 Katedra i Oddział Kliniczny Laryngologii w Zabrzu, Śląskiego Uniwersytetu Medycznego w Katowicach. Kierownik: Prof. dr hab. n. med. Grzegorz Namysłowski Konflikt interesu/Conflicts of interest: Autor pracy nie zgłasza konfliktu interesów. Adres do korespondencji/ Address for correspondence: imię i nazwisko: Wojciech Ścierski adres pocztowy: ul. Skłodowskiej-Curie 10 41-700 Zabrze tel. 0-32 271 74 20 fax 0-32 271 74 20 e-mail [email protected] 2. Ocena możliwości zastosowania wytworzonych segmentowych implantów w rekonstrukcji ubytków tchawicy w eksperymencie zwierzęcym. 3. Określenie stopnia mineralizacji segmentowego implantu oraz tchawicy po zakończonym eksperymencie zwierzęcym. 4. Ocena stopnia biodegradacji włókien węglowych segmentowego implantu tchawicy. Materiał i metody Przed zaprojektowaniem biomateriału służącego do wytworzenia implantu tchawicy dokonano analizy budowy i właściwości biomechanicznych tego narządu pobranego od owcy. Celem tych badań było wytworzenie takiego materiału syntetycznego, który pod względem struktury i właściwości fizykomechanicznych byłby najbardziej zbliżony do tchawicy owiec. Badania przeprowadzono w Akademii Górniczo-Hutniczej w Krakowie przy użyciu maszyny wytrzymałościowej Zwick 1435. Zarówno w teście ściskania jak i rozciągania różnice wielkości deformacji tkankowej wzrastały wraz ze wzrostem wartości działającej siły. Ich wielkość zależała od kierunku działania siły. Badania te wykazały, że tchawica owcy jest układem mechanicznym o właściwościach anizotropowych, którego stopień odkształcenia uzależniony jest od kierunku działania siły. Żaden pojedynczy materiał syntetyczny (polimerowy, ceramiczny, węglowy czy metaliczny) nie posiada * Praca finansowana ze środków Komitetu Badań Naukowych projekt nr PBZ KBN 082 T08 2002 Otolar yngologia Polska tom 63, nr 3, maj – c zer wiec 20 0 9 Otolaryngol Pol 2009; 63 (3): 303-305 304 DOKTORATY, HABILITACJE / DOCTORS THESES, PROFESSORS THESES właściwości mechanicznych zbliżonych do właściwości tkanek tchawicy. Na podstawie wyników badań biomechanicznych zaprojektowano kompozytowy materiał anizotropowy, którego właściwości i struktura były zbliżone do naturalnych tkanek tchawicy owcy. Biomateriał ten składał się z dwóch zasadniczych elementów: włókien węglowych (odpowiadających za właściwości mechaniczne) oraz polisulfonu – polimeru, który stanowił matrycę kompozytu, spajał włókna węglowe, przenosił na nie obciążenia mechaniczne i odpowiadał za właściwości biologiczne. Wykonano trzy rodzaje cylindrycznych implantów tchawicy o długości 3 i średnicy 2,5 cm. W pierwszych pięciu implantach warstwy zewnętrzne zostały dodatkowo nasycone terpolimerem składającym się z politetrafluoroetylenu, fluorku polivinylu i polipropylenu (grupa I). Terpolimer ten miał za zadanie poprawę połączenia implantu z otaczającymi tkankami. W pięciu następnych implantach na powierzchnię wewnętrzną naniesiono warstwę poliuretanu, który posiada właściwości fibro- i chondrogenne i miał pobudzać komórki nabłonkowe tchawicy do migracji i rozplemu (grupa II). W ostatnich pięciu wykorzystano jedynie materiał węglowy i polisulfon (grupa III). Implanty zbudowane były (idąc od wewnątrz) z pojedynczej warstwy włókniny węglowej i leżących na niej pięciu pierścieni wykonanych z pasm włókien węglowych (które spełniały funkcje podobne do chrząstek tchawicy). Całość pokryta była pięcioma warstwami tkaniny węglowej. Wszystkie elementy węglowe nasycone były polisulfonem. Badania eksperymentalne przeprowadzono na grupie 15 owiec rasy „Podgórskiej”, u których wykonywano resekcję odcinka szyjnego tchawicy o długości 3 cm. Ubytek ten rekonstruowano następnie za pomocą implantów zbudowanych z kompozytowego materiału węglowego. Założony okres obserwacji wynosił 24 tygodnie. Zwierzęta uśmiercano wcześniej w każdym przypadku, gdy pojawiały się zaburzenia oddechowe o charakterze stridoru. Po zakończonym eksperymencie dokonywano oceny stopnia zwężenia w miejscu połączenia implantu i tchawicy wykorzystując zmodyfikowany system zaproponowany przez Hsieha. Badania histologiczne obejmowały ocenę preparatów tkankowych pobranych z powierzchni wewnętrznej implantu, z miejsca połączenia implantu i tchawicy oraz jego przekrojów poprzecznych. W pracy oceniono również stopień mineralizacji kompozytowego implantu tchawicy oraz tkanek przylegających wybarwiając preparaty histologiczne czerwienią alizarynową reagującą z solami wapnia. Stopień biodegradacji włókien węglowych zbadano wykorzystując możliwości morfometrycznej analizy obrazu. Oceniano wymiar najkrótszy włókien węglowych, obliczoną szerokość, współczynnik wypełnienia i średni stopień szarości. Wyniki W grupie I jedna owca przeżyła zaplanowany okres obserwacji (stwierdzono u niej niewielki stopień zwężenia w miejscu anastomozy). Pozostałe uśmiercono po 1, 2, 3 i 4 tygodniach. W tych przypadkach stopień zwężenia oceniano jako znacznego stopnia. W grupie II wszystkie owce uśmiercono przed 24 tygodniem obserwacji z powodu narastających zaburzeń oddechowych, które spowodowane były nadmiernym procesem tworzenia ziarniny na jej wewnętrznej powierzchni. W grupie III trzy zwierzęta przeżyły 24 tygodnie. Stwierdzono u nich niewielki stopień zwężenia w miejscu anastomozy. Pozostałe owce uśmiercono w 4 i 6 tygodniu obserwacji, z powodu narastających zaburzeń oddechowych. Badania histologiczne wykazały na powierzchni wewnętrznej implantów obecność wyspowo rozmieszczonej tkanki zbudowanej z włókien łącznotkankowych i tworzących się naczyń krwionośnych. Nie stwierdzono pokrycia powierzchni wewnętrznej implantu rzęskowym nabłonkiem oddechowym. Przekroje poprzeczne implantów wykazały obecność włókien kolagenowych przylegających bezpośrednio do powierzchni zewnętrznej i wewnętrznej implantu oraz wnikających pomiędzy włókna węglowe materiału kompozytowego. Ich ilość, stopień przylegania i wnikania pomiędzy włókna węglowe nie zależał od rodzaju zastosowanego implantu. Nie zaobserwowano zjawiska nadmiernego odkładania się soli wapnia zarówno w obrębie implantu jak i tkankach otaczających. Badania morfometryczne włókien węglowych wykazały, iż ulegają one stopniowym procesom degradacyjnym w środowisku biologicznym. Przejawem tego było stopniowe zmniejszanie się wymiarów włókien węglowych (obliczonej szerokości i wymiaru najkrótszego), połączone z utratą nierówności obwodu oraz zmianami zagęszczenia struktury. Na podstawie uzyskanych wyników sformułowano następujące wnioski: 1. Badania mechaniczne tchawicy owcy wykazały, że jest to narząd o właściwościach anizotropowych, dlatego konstrukcję segmentowego implantu tchawicy oparto na nowym materiale kompozytowym wytworzonym z włókien węglowych i wybranych polimerów. 2. W eksperymencie zwierzęcym, stosując do rekonstrukcji tchawicy segmentowy implant o nienaruszonej strukturze zbudowany z włókien węglowych i polisulfonu, uzyskano najdłuższy czas przeżycia zwierząt i najmniejszy stopień zwężenia w miejscu anastomozy. 3. W badaniach mineralizacji segmentowego implantu tchawicy i otaczających tkanek nie stwierdzono procesu nadmiernego odkładania się soli wapnia. Jest to zjawisko korzystne zwłaszcza w przypadku implantów pracujących mechanicznie. Otolar yngologia Polska tom 63, nr 3, maj – c zer wiec 20 0 9 DOKTORATY, HABILITACJE / DOCTORS THESES, PROFESSORS THESES 4. Włókna węglowe segmentowego implantu tchawicy ulegają stopniowym procesom degradacyjnym w środowisku biologicznym. Wyrazem tego jest zmniejszanie Otolar yngologia Polska tom 63, nr 3, maj – c zer wiec 20 0 9 się wymiarów włókien węglowych połączone z utratą nierówności i zmianami zagęszczenia ich struktury. 305