pobierz
Transkrypt
pobierz
Sprawozdanie z wyjazdu służbowego w ramach programu wieloletniego, zadanie 4.1. W ramach realizacji zad. 4.1 w dniach 22-23 września 2015 roku mgr Magdalena ŻurawskaZajfert uczestniczyła w 11 Workshopie dla Krajowych Laboratoriów Referencyjnych ds. GMO (NRL) zgodnie z Rozporządzeniem 882/2004/WE oraz plenarnym spotkaniu członków ENGL (Europejskiej Sieci Laboratoriów ds. GMO). Spotkanie zorganizowane było przez: Komisję Europejską, Wspólne Centrum Badawcze (JRC), Instytut Ochrony Zdrowia i Konsumenta (IHCP), Jednostkę Biologii Molekularnej i Genomiki, Via Ernico Fermi 2749, 21027 Ispra, Włochy. Laboratorium Kontroli GMO należy do sieci ENGL (Krajowe Laboratorium Referencyjne zgodnie z rozp. 120/2014) oraz od połowy br. jest Krajowym Laboratorium Referencyjnym (NRL) zgodnie z rozp. 882/2004/WE. Na spotkaniach sieci ENGL i NRLi są omawiane zadania NRL oraz aktualne problemy związane z wykrywaniem, identyfikacją i ilościowym oznaczaniem autoryzowanych i nieautoryzowanych GMO w Unii Europejskiej. W spotkaniu brali udział przedstawiciele laboratoriów oficjalnych kontroli i należących do sieci ENGL z 27 krajów Unii Europejskiej, a także przedstawiciele z Chorwacji, Turcji, Chin i Japonii. Program ramowy: 22.09.2015 Sesja 1: Krajowe Laboratoria Referencyjne (NRL) i Oficjalna Kontrola Tematyka sesji 1 • Uczestnictwo laboratoriów w badaniach porównawczych (CT) Przedstawiono raport z wynikami z porównań międzylaboratoryjnych z 6 ostatnich lat. W okresie od 2010 do 2015 w badaniach porównawczych organizowanych przez EURL-GMFF (Laboratorium Referencyjne Unii Europejskiej ds. Genetycznie Zmodyfikowanej Żywności i Pasz) brało udział średnio od 70 do 90 laboratoriów czy to oficjalnej kontroli wg rozp. 882/2004/WE czy należących do sieci ENGL zgodnie z rozp. 120/2014. Przynajmniej w jednym CT brały udział 32 różne kraje. W 2015 roku w CT 02/15 wzięło udział 60 uczestników UE z czego: 32 to laboratoria NRL/882, 19 to laboratoria NRL/120 i 9 laboratoria nie NRL. W okresie 2010-2015 ilość laboratoriów NRL z niezadawalającymi wynikami była różna i wahała się w granicach od 50% do 10%. Najlepsze rezultaty osiągnięto w 2015 roku gdzie dla CT-01/2015 osiągnięto 100% wyników satysfakcjonujących. Wyniki szczegółowe Wyniki z CT-01/2014 – dwie próbki: T1 z MON88017, NK603, 40-3-2 i MON89788, T2 z MON89788. Identyfikacja GM: T1: 80% OK, T2: 93% OK. Kwantyfikacja GM: T1:91-97% OK (10 laboratoriów wyniki niezadawalające dla 1 lub więcej modyfikacji GM). T2: 88% OK (7 laboratoriów wyniki niezadawalające) Wyniki z CT-02/2014 – dwie próbki: T1 pasza z kukurydzą 40278 i soją 40-3-2, T2 mączka z kukurydzą 40278. Problemy z wykryciem soi 40-3-2. Wiele laboratoriów nie zidentyfikowało i nie oszacowało ilościowo kukurydzy 40278, z tych które wykonały oznaczenia ilościowe dla T1 96% OK, dla T2 98% OK. Problemy z wykryciem soi 40-3-2 związane były z zastosowanymi metodami izolacji. Zalecenia: używać odpowiedniej metody ekstrakcyjnej, ważnych odczynników, przygotować próbkę odpowiednio dla danej metody izolacji, w sposób prawidłowy określić ilość wyizolowanego DNA, przeprowadzić test na inhibicję, mieć pewność co do jakości stosowanych kontroli. Wyniki z CT-01/2015 – dwie próbki: T1 makaron ryżowy z soją 356043, T2 soja 68416. Identyfikacja GM: T1:98% OK; 6 laboratoriów nie przeprowadziło identyfikacji w kierunku soi 356043, T2: 98% OK, 10 lab. nie przeprowadziło identyfikacji w kierunku soi 68416. Kwantyfikacja GM: T1: 96% OK (2 wyniki niezadawalające), 15 lab. nie zrobiło analizy ilościowej, T2: 100% OK, 17 lab. nie przeprowadziło analizy ilościowej. Wyniki z CT -02/2015 - dwie próbki: T1 zupka instant z rzepakiem MON88302, T2 soja 81419. Identyfikacja GM: T1: 100% OK, 18 lab. nie przeprowadziło identyfikacji dla rzepaku MON88302, T2:100% OK, 14 lab. nie przeprowadziło identyfikacji w kierunku soi 81419. Kwantyfikacja GM: T1: 93% OK (3 wyniki niezadawalające), 15 lab. nie przeprowadziło analizy ilościowej, T2: 96% OK (2 wyniki niezadawalające), 17 lab. nie przeprowadziło analizy ilościowej. Na 2016 rok przewidziane są dwa badania porównawcze organizowane przez EURLGMFF, jedno w pierwszej połowie roku, drugie na jesieni, mające na celu sprawdzenie kompetencji laboratoriów w zakresie analiz GM ze szczególnym uwzględnieniem nowych metod. Laboratorium Kontroli GMO w IHAR-PIB jako należące do ENGL uczestniczyło w większości badań porównawczych organizowanych przez EURL-GMFF w latach 2010-2014, uzyskując wyniki pozytywne. • Informacje na temat potrzebnych szkoleń Uczestnicy spotkania zgłosili potrzebę szkoleń w tematyce nowych metod analiz GMO: m.in. droplet digital PCR oraz metody multitarget. • Krótki raport z rocznej działalności każdego NRLu Większość laboratoriów wykonuje ok. 200 analiz kontrolnych rocznie, z czego nieduży procent to próbki pozytywne pod kątem obecności GM (papaja, kukurydza, rzepak i len GM). Istnieje potrzeba ciągłej aktualizacji i rozszerzenia zakresu używanych metod w celu dostosowania możliwości analitycznych laboratoriów do zwiększającej się liczby nowych autoryzowanych produktów GM na rynku. • Wyniki ankiety rozesłanej do NRLi dotyczącej używanych metod w analizach GMO W połowie 2015 roku do laboratoriów sieci ENGL i NRLi została rozesłana ankieta dotycząca używanych metod w laboratorium i korzystania ze strony EURL-GMFF. Polskie laboratoria zajęły drugie miejsce w skuteczności odpowiedzi na ankietę. Z analizy danych zwrotnych z ankiet wynika, że większość z ankietowanych laboratoriów UE tylko czasami korzysta ze strony EURL-GMFF. Metodami analiz GM wykorzystywanymi przez laboratoria są metody PCR screeningowe oraz metody charakterystyczne dla zdarzenia transformacyjnego tzw. „event specific”. Większość ze stosowanych metod to metody ze strony EURL. Ankietowane laboratoria określały częstotliwość korzystania z baz danych i „JRC GMO-Matrix” zawartych na stronie EURL-GMFF jako sporadyczną. Stąd na spotkaniu jednym z tematów było zapoznanie uczestników z możliwościami jakie daje „JRC GMO-Matrix”. 22.09.2015 Sesja 2: NRL 882 i 24 Sesja Plenarna ENGL 23.09.2015 Sesja 3: NRL 882 i 24 Sesja Plenarna ENGL Sesje 2 i 3 obejmowały: • Sprawozdania z prac grup roboczych ENGL w kwestiach walidacji metod, uaktualniania metod, interpretacji wyników, cyfrowego PCR, jednostek pomiarowych oraz metod w analizach nasion dla GMO. Identyfikując potrzeby i braki w bazie zwalidowanych metod EURL-GMFF zaproponowano walidację metody „element-specyficznej” - t35S-Pcambia, która obejmuje ok 30% nieautoryzowanych GM oraz walidację metody pentapleksowej „event-specyficznej” dla: bawełny GHB614, kukurydzy DAS40278-9 i soi BP-CV-127-9, MON87708, 305423 - zdarzeń transformacyjnych, które nie są ujęte w kompendium metod EURL-GMFF. Należy dążyć aby wszystkie metody wypełniały kryteria zawarte w nowym dokumencie EURL GMFF dotyczącym minimalnych wymagań dla metod analiz GMO (dokument MPR). Metody powinny być oparte o Real Time PCR. Określono parametry walidacji i weryfikacji metod w zależności od wprowadzanych zmian w metodach. Przedstawiono problemy związane z przystosowaniem zaleceń dla metod analiz GMO opartych o Real Time PCR do analiz przy użyciu Digital PCR. Przedstawiono podejście do analizy próbek nasiennych od momentu próbkobrania, przez izolację DNA, analizę PCR po interpretację wyników. • Powołanie grup dyskusyjnych w kwestiach ekstrakcji DNA, metod multitarget oraz granicy wykrywalności i interpretacji wyniku w jej okolicy. Rezultatem prowadzonych dyskusji była propozycja przygotowania praktycznego przewodnika ze schematami postępowania w poruszanych kwestiach, na wzór przewodnika dotyczącego np. weryfikacji metod analiz GMO. • Wykłady dotyczące: zastosowania techniki LAMP w analizach GMO; ilościowej reakcji multipleksowej przy użyciu ddPCR w analizach GMO; multipleksowej reakcji PCR dla 6 różnych zdarzeń transformacyjnych soi GM; wykrywania ryb GM; genów referencyjnych dla pszenicy w analizach GMO; identyfikacji możliwej obecności nieautoryzowanych upraw GM. Prezentacje dotyczące praktycznego korzystania z baz danych EURL-GMFF, „JRC GMOMatrix”, „Prespotted plates” Zdobyte informacje, szczególnie dotyczące praktycznego wykorzystywania baz danych zawartych na stronie EURL-GMFF oraz problematyki związanej z analizą nasion pod kątem GM, wykorzystano w szkoleniach dla PIORIN i COBORU przeprowadzonych w dniach 8 i 14 grudnia 2015 roku.