Alpha-2-Macroglobulin - Serum Application Note

Ceruloplasmina
Cobas MIRA Plus
Instrukcja użytkowania
Wskazówki dla oznaczania
ceruloplazminy w surowicy/osoczu
z zastosowaniem Cobas MIRA Plus
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Instrukcja użytkowania opisuje ilościowe oznaczanie cerulplazminy w próbce materiału ludzkiego poprzez pomiar
zmętnienia z zastosowaniem Cobas MIRA Plus (1, 2).
Zakres pomiaru
Około 0,06-1,3 g/L, zależnie od danej partii kalibratorów. W przypadkach następczego stężania lub rozcieńczania
próbek zakres można poszerzyć do 0,06 g/L do 3,9 g/L.
Zakres wartości
prawidłowych
0,2-0,6 g/L (3). Zaleca się ustalenie zakresu wartości prawidłowych dla lokalnej populacji.
Ustawienia automatu
Programowanie automatu odbywa się zgodnie z punktem „Ustawienia automatu” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor do
przeprowadzenia reakcji
Rozcieńczalnik
Kalibrator
Kontrole
Nr kat.
Q 0121
S 2008
Nazwa
DakoCytomation Polyclonal Rabbit Anti-Human Ceruloplasmin
DakoCytomation Reaction Buffer 2
S 2005
X 0908
X 0939
X 0940
DakoCytomation Dilution Buffer 1
DakoCytomation Human Serum Protein Calibrator
DakoCytomation Human Serum Protein Low Control
DakoCytomation Human Serum Protein High Control
Próbki
Ludzka surowica lub heparynizowane osocze.
Stabilne przez 7 dni w temperaturze 2-8 oC.
Stabilne przez 3 miesiące w temperaturze -20 oC (jeśli zostały zamrożone tylko raz).
Zamrożone próbki rozmrażać w temperaturze 37 oC i dobrze wymieszać przed badaniem.
Kalibrator
Standardowe rozcieńczenie wykonywane jest automatycznie przez aparat.
Bufor do przeprowadzania
reakcji
Bufor do przeprowadzania reakcji jest gotowy do użycia.
Przeciwciało
Wstępnie rozcieńczyć przeciwciało 1:2,20 (np. 1000 µL przeciwciała + 1200 µL rozcieńczalnika).
Jeśli w rzadkich przypadkach stwierdza się nieznaczne zmętnienie wstępnie rozcieńczonego przeciwciała, zaleca się
dokonanie przefiltrowania roztworu przez filtr membranowy o średnicy porów 0,22 µm.
Stabilność nierozcieńczonego przeciwciała: Patrz data ważności na etykiecie.
Stabilność wstępnie rozcieńczonego przeciwciała: 28 dni w temperaturze 2-8 °C.
Wydajność: 1 mL wstępnie rozcieńczonego przeciwciała odpowiada około 20 odczytom kuwet z wzorcem lub próbką.
Przy obliczaniu wymaganej ilości odczynnika należy wziąć pod uwagę martwą objętość butelki z odczynnikiem.
Stabilność kalibracji
Zaleca się dokonywanie ponownej kalibracji co 28 dni lub gdy zmienia się numer partii używanych odczynników, gdy
przygotuje się nowy roztwór przeciwciała, gdy roztwór przeciwciała podda się filtracji lub wyniki oceny kontroli jakości
oznaczeń znajdują się poza ustalonymi dla danego laboratorium wartościami.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli otrzymane wyniki są nie do zaakceptowania należy przeprowadzić ponowną kalibrację aparatu. Należy
sprawdzić odczynniki i procedurę. Jeśli problem nadal występuje, należy skontaktować się z dostawcą aparatury
lub z Działem Pomocy Technicznej firmy DakoCytomation.
(109365-001)
30 133.Q0121.01/PL/SUM/06.04.04 s. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Ceruloplasmina
Cobas MIRA Plus
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,13 w Cobas MIRA Plus odpowiada stężeniu ceruloplazminy około 1,3 g/L.
Próg wykrywalności
Próg wykrywalności ocenia się na 0,002 g/L.
Precyzja
Precyzję oszacowano dokonując analizy ANOVA wyników oznaczenia ceruloplazminy (CER) w 3 różnych stężeniach
dokonanych w czasie 6 cykli oznaczeń, z których dla każdego dokonano nowej kalibracji i w każdym wykonano 6
oznaczeń.
CER
Odchylenie standardowe
(g/L)
Wartość
średnia
(g/L)
W
zakresie
jednego
badania
Między
poszczególnymi
cyklami
oznaczeń
1
0,27
0,005
2
0,33
3
0,61
Surowice
Łącznie
Łącznie
Współczynnik
Wariancji (%)
n
0,007
0,009
3,3
36
0,006
0,006
0,009
2,6
30
0,008
0,019
0,021
3,4
34
Dokładność
W przypadku DakoCytomation Human Serum Protein Low Control, nr kat. X 0939 i DakoCytomation Human Serum
Protein High Control, nr kat. X 0940 oczekiwany odzysk ceruloplazminy wynosi 85-115%.
Liniowość
Metoda jest liniowa w zakresie 0,06-1,3 g/L.
Zakres bezpieczeństwa
Nadmiaru antygenu nie stwierdzono przy stężeniach ceruloplazminy do 5 g/L (najwyższe badane stężenie).
Zakłócenie
Nie stwierdzono zakłóceń przy stężeniach hemoglobiny do 7 g/L, bilirubiny do 600 mg/L oraz trójglicerydów do 15 g/L.
Wszystkie leki opisane w punkcie 4. zbadano zgodnie z zaleceniami zawartymi w tym punkcie. Nie zaobserwowano
żadnego wpływu, z wyjątkiem intralipidu w stężeniu 10 g/L.
Porównanie metod
Oznaczenie ceruloplazminy zgodnie z niniejszą Instrukcją obsługi zostało porównane z dostępnymi na rynku
metodami turbidymetrycznymi. Dane są dostępne na żądanie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001; 39:1098–1109.
2. Instrukcja obsługi Cobas MIRA Plus, Roche Diagnostic Systems.
3. Dati F, Schumann G, Thomas L, Aguzzi F, Baudner S, Bienvenu J, et al. Consensus of a group of professional
societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in serum based
on the standardization against the IFCC/BCR/CAP Reference Material (CRM 470). Eur J Clin Chem Clin
Biochem 1996; 34:517–20.
4. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001; 38:376–85.
(109365-001)
30 133.Q0121.01/PL/SUM/06.04.04 s. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Ceruloplasmina
Cobas MIRA Plus
Ustawienia automatu (wersja oprogramowania 9215)
P2
TESTS
CER
ROUTINE
/15-JUL-95
GENERAL
MEASUREMENT MODE
REACTION MODE
CALIBRATION MODE
REAGENT BLANK
CLEANER
:
:
:
:
:
ABSORB
D-R-S-SR1
LOGIT/LOG5
REAG/DIL
NO
WAVELENGTH
DECIMAL POSITION
UNIT
:
:
:
340 nm
2
g/l
ANALYSIS
DILUENT
NAME:
DIL1
FACTOR:
15.00
TIME:
NO
STD:
MAIN DIRECT
[*]
MAIN STD:
(15.00 × C(Cal)) g/l
POS:
1
FACT.STD-1:
3.50
2:
3:
7.00
4:
5:
21.10
6:
7:
NO
8:
POST DIL. FACTOR
:
CONC.FACTOR:
SAMPLE
DILUENT
REAGENT
START R1
DILUTION
TEST
RANGE
NORM.
RANGE
NUMBER OF
CALC. STEP A
READINGS
CALIBRATION
CALIB.
BLANK
REAG. RANGE
1
40.0
H2O
50.0
CYCLE:
VOLUME:
1
200
CYCLE:
VOLUME:
NAME:
VOLUME:
5
50.0
H2O
20.0
LOW:
HIGH:
LOW:
HIGH:
STEPS :
:
FIRST:
INTERVAL:
LOW:
HIGH:
LOW:
HIGH:
BLANK RANGE
STANDARDS[**]
1:
3:
5:
7:
NO
REPLICATE
DEVIATION
CORRECTION STD
CONTROL
CS1 POS:
CS2 POS:
CS3 POS:
3.00
NO
CYCLE:
VOLUME:
NAME:
VOLUME:
CALCULATION
SAMPLE
LIMIT:
REAC.
DIRECTION:
CHECK:
ANTIGEN
EXCESS:
CONVERS.
FACTOR:
OFFSET:
1.29
0.64
0.21
2:
4:
6:
8:
:
:
:
4.70
12.30
80.00
NO
µl
µl
µl
µl
µl
NO
INCREASE
ON
NO
1.00000
0.00000
OFF
ON
NO
NO
1
ENDPOINT
4
LAST: 16
ON REQUEST
NO
NO
NO
NO
0.96
0.37
0.06
g/l
g/l
g/l
NO
SINGLE
5.0 %
NO
NO
NO
NO
DIL 1 – nr kat. S 2005
REAGENT – nr kat. S 2008
START R1 – nr kat. Q 0121, wstępnie rozcieńczony 1:2,20.
[*]
Kalibrator, nr kat. X 0908. Stężenie obliczane jest jako wielokrotność wartości kalibratora dla określonej partii (C(cal), wyrażonej w g/L na
arkuszu wartości analitycznej X 0908).
[**]
Wartości tych nie należy wprowadzać. Wartości obliczane są automatycznie przez aparat za pomocą funkcji "MAIN STD" i "FACT.STD" w
rozdziale "ANALIZA" ustawień aparatu. Wartości różnią się nieznacznie od wartości kalibratora.
(109365-001)
30 133.Q0121.01/PL/SUM/06.04.04 s. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17