Ćwiczenie nr 4

MIKROBIOLOGIA KOSMETOLOGICZNA
dla studentów II roku, studiów I st.
kierunku KOSMETOLOGIA
Ćwiczenie 4
Pojęcia: dezynfekcja, sterylizacja, aseptyka, antyseptyka, sanityzacja, środki bakteriobójcze
i bakteriostatyczne. Metody i zasady skutecznej sterylizacji. Metody kontroli procesu
sterylizacji. Badanie skuteczności wybranych metod sterylizacji.
liczba godzin
2
Zagadnienia do ćwiczeń 4
1. Pojęcia: dezynfekcja, sterylizacja, aseptyka, antyseptyka, sanityzacja.
2. Działanie bakteriobójcze i bakteriostatyczne.
3. Sterylizacja – definicja, podział metod sterylizacji.
4. Mechanizm działania poszczególnych czynników stosowanych do sterylizacji.
5. Metody kontroli procesu sterylizacji – fizyczne, chemiczne, biologiczne.
lp. Ćwiczenia praktyczne
1
Badanie skuteczności działania promieniowania ultrafioletowego na mikroorganizmy obecne
w powietrzu – badanie należy wykonać w pomieszczeniu z lampą UV innym niż sala ćwiczeń
-
przygotować 2 szalki Petri’ego z agarem odżywczym i opisać na dnie – 1- (-)UV, 2 – (+)UV,
przygotować 2 szalki Petri’ego z agarem Sabouraud i opisać na dnie – 1- (-)UV, 2 – (+)UV,
badanie mikrobiologicznej czystości powietrza przed działaniem promieniowania UV:
po jednej szalce z agarem odżywczym i agarem Sabouraud opisanej jako (-)UV przenieść do pomieszczenia
z wyłączoną lampą UV, zdjąć z szalek wieczka i inkubować przez 10 minut,
po tym czasie zamknąć szalki, przenieść na salę ćwiczeń, a w pomieszczeniu załączyć lampę UV na co najmniej 30
minut, po 30 minutach lampę wyłączyć (UWAGA: nie przebywać w strefie działania promieni UV!) i przystąpić do:
badania mikrobiologicznej czystości powietrza po działaniu promieniowania UV:
po jednej szalce z agarem odżywczym i agarem Sabouraud opisanej jako (+)UV, przenieść do pomieszczenia,
w którym wcześniej działała lampa UV, z obu szalek zdjąć wieczka i inkubować przez 10 minut,
po tym czasie zamknąć szalki, przenieść na salę ćwiczeń,
wszystkie szalki inkubować w temperaturze pokojowej (20ºC) przez 1 tydzień, do góry dnem,
po okresie inkubacji ocenić skuteczność działania promieniowania UV.
Podłoże
Przed działaniem promieniowania UV
((-)UV)
ocena wzrostu i opis:
Po działaniu promieniowania UV
((+)UV)
ocena wzrostu i opis:
ocena wzrostu i opis:
ocena wzrostu i opis:
agar odżywczy
agar Sabouraud
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
1
2
Badanie skuteczności filtracji membranowej - prezentacja
- szalkę Petri’ego z agarem odżywczym podzielić na dwie równe części i opisać na dnie („przed filtracją” i „po
filtracji”),
- za pomocą wyżarzonej ezy wykonać posiewy - na jednej połowie szalki posiew pożywki niejałowej (opalić wlot
naczynia z zaszczepioną pożywką),
- zmontować zestaw do filtracji i przefiltrować skażoną pożywkę lub przefiltrować przez filtr strzykawkowy,
- wykonać posiew przefiltrowanej pożywki na drugiej połowie szalki,
- szalkę inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji porównać wzrost w obu połowach szalki i ocenić skuteczność sterylizacji.
Pożywka przed filtracją
ocena wzrostu:
Pożywka po filtracji
ocena wzrostu:
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
3
Metody kontroli procesu sterylizacji – wykonać opis
- Fizyczne
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
- Chemiczne
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
- Biologiczne
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………
2
4
Biologiczna kontrola procesu sterylizacji za pomocą pary wodnej pod ciśnieniem (w autoklawach)
- biologiczny wskaźnik kontroli procesu sterylizacji parą wodną - sporal A (krążek nasączony ciepłoopornymi
zarodnikami Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953, zabezpieczony opakowaniem papierowym i foliowym)
po wyjęciu z folii został umieszczony w komorze autoklawu i wraz ze sterylizowanymi materiałami poddany został
procesowi sterylizacji (121°C, 20 minut),
- po zakończeniu sterylizacji osłonięte papierową torebką sporale A należy wyjąć z autoklawu i przenieść (bez
papierowej osłony) do probówki z bulionem odżywczym zachowując przy tym warunki jałowości i używając
sterylnej pęsety,
- probówki ze sporalami A inkubować przez 7 dni w temperaturze 56°C,
- ocenić skuteczność procesu sterylizacji w autoklawie
- sterylizacja skuteczna – bulion pozostaje klarowny,
- sterylizacja nieskuteczna – bulion zmętnieje, a na jego powierzchni pojawi się kożuch z komórek bakteryjnych.
Wyniki i wnioski:.........................................................................................................................................................
.....................................................................................................................................................................................
.....................................................................................................................................................................................
.....................................................................................................................................................................................
3