docPobierz dokument
download 
Reklamacja Transkrypt
Pobierz dokument
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 07.11.2005 05851408.4 (19) PL (11) PL/EP (13) (51) 1817006 T3 Int.Cl. A61K 9/127 (2006.01) A61K 38/06 (2006.01) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (54) (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: 05.09.2012 Europejski Biuletyn Patentowy 2012/36 EP 1817006 B1 A61K 9/48 (2006.01) A61K 31/198 (2006.01) Tytuł wynalazku: LIPOSOMALNY PREPARAT DO DOUSTNEGO PODAWANIA GLUTATIONU (ZREDUKOWANEGO) (30) (43) Pierwszeństwo: 07.11.2004 US 522785 P 25.05.2005 US 594996 P 06.11.2005 US 597041 P Zgłoszenie ogłoszono: 15.08.2007 w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2007/33 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: 29.03.2013 Wiadomości Urzędu Patentowego 2013/03 (73) Uprawniony z patentu: Guilford, F. Timothy, Palo Alto, US PL/EP 1817006 T3 (72) Twórca(y) wynalazku: F. TIMOTHY GUILFORD, Palo Alto, US (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Jerzy Lampart KANCELARIA PATENTOWA ul. Wyzwolenia 1 B Ossy 42-624 Tąpkowice Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich). Liposomalny preparat do doustnego podawania glutationu (zredukowanego) STRESZCZENIE WYNALAZKU [0001] Przedmiotem wynalazku jest kompozycja glutationu (zredukowanego) w liposomie, która zgodnie z zastrzeżeniem patentowym nr 1, ma stabilizować glutation w fizjologicznie aktywnym stanie, co umożliwia jego doustne podawanie i dostarczanie terapeutycznie efektywnej dawki w celu złagodzenia objawów chorobowych przez wniknięcie glutationu do komórek ciała, jak również metoda wytwarzania wymienionej wcześniej kompozycji. Dotychczas niemożliwe było doustne podawanie glutationu (zredukowanego) w sposób terapeutycznie efektywny. Wynalazek także przedstawia metodę kapsułkowania glutationu (zredukowanego) w liposomie - która pozwala na stabilizowanie glutationu w fizjologicznie aktywnym stanie w celu umożliwienia doustnego podawania terapeutycznie efektywnej dawki glutationu (zredukowanego) by łagodzić objawy chorobowe poprzez wnikanie glutationu do komórek ciała. Rozważa się zastosowanie związków chemicznych wzmacniających efekt liposomalnego glutationu, takich jak Selen, EDTA, karbidopa i lewodopa. DZIEDZINA TECHNIKI [0002] Wynalazek dotyczy dostarczania substancji pokarmowej, glutationu w formie biochemicznie zredukowanej, jako preparat lizosomalny, umożliwiający nowatorski sposób dostarczania glutationu (zredukowanego) w ilości pozwalającej na uzyskanie efektu poprawy stanu chorobowego związanego z niedoborem glutationu. Glutation może być również wchłaniany przez błonę śluzową nosa, usta, przewód pokarmowy, po miejscowym podaniu zastrzyku podskórnego lub dożylnego. HISTORIA [0003] Tripeptyd L-glutation (GSH) (gamma-glutamyl-cysteinyl-glycine) to substancja, która jak wykazały badania naukowe w dziedzinie biologii i medycyny, pełni podstawowe 1 funkcje w komórkach organizmów wyższych, takich jak ssaki. Substancja ta spełnia swoje funkcje tylko wtedy, kiedy występuje w biochemicznej formie nazywanej zredukowaną (GHS). Gdy jest utleniona, tworzy formę znaną jako dimer (GSSG). [0004] Glutation w formie zredukowanej (GSH) funkcjonuje jako przeciwutleniacz, chroniący komórki przed szkodliwym działaniem wolnych rodników; jako substancja odtruwająca, która transportuje toksyny z komórek i wątroby; oraz jako przekaźnik sygnałów w komórce, szczególnie w układzie odpornościowym. [0005] Niedobór glutationu (zredukowanego) może doprowadzić do uszkodzenia komórek oraz tkanek na kilka sposobów, w tym poprzez nadmierne nagromadzenie się wolnych rodników, które powoduje rozerwanie cząsteczek, szczególnie lipidów, co z kolei przyczynia się do peroksydacji lipidów, co wraz z nagromadzeniem się toksyn, powoduje śmierć komórek. Mechanizmy te są często określane jako stres oksydatywny. Mała ilość glutationu w formie zredukowanej w porównaniu do jego ilości w formie utlenionej może być spowodowana brakiem produkcji glutationu (zredukowanego) lub nadmiaru substancji takich jak toksyny, które pochłaniają glutation (zredukowany). Niedobór glutationu (zredukowanego) może być ogólnoustrojowy albo pojawiać się miejscowo, w konkretnych komórkach, w które występuje stres oksydatywny. [0006] Niedobór glutationu w formie zredukowanej przyczynia się do stresu oksydatywnego, który odgrywa kluczową role w starzeniu się organizmu i patogenezie wielu chorób takich jak [0007] Mukowiscydoza [0008] Choroba wątroby [0009] Choroba Parkinsona [0010] Choroba Alzheimera [0011] Zawał serca i Udar [0012] Cukrzyca [0013] Wiroza [0014] Uszkodzenia wolnorodnikowe spowodowane uszkodzeniami komórkowymi, biologicznymi lub chemicznymi [0015] Uszkodzenia wolnorodnikowe spowodowane infekcją bakteryjną [0016] Modulacja układu odpornościowego po szczepieniu [0017] Użycie terminu ‘glutation’ lub ‘glutation (zredukowany)’ będzie oznaczać glutation w formie zredukowanej 2 [0018] Uzupełnianie niedoboru glutationu było trudne z powodu braku bezpośredniego wchłaniania glutationu po podaniu doustnym. Glutation jest peptydem rozpuszczalnym w wodzie. Uważa się, iż ta właściwość glutationu nie pozwala na jego wchłanianie po doustnym przyjęciu. Bezpośrednie doustne przyjmowanie glutationu zostało zbadane w doświadczeniu klinicznym, które wykazało, że 3 gramy glutationu podanego doustnie nie podnosi jego poziomu w osoczu krwi. [0019] Zwiększanie poziomu glutationu w organizmie wymagało dożylnego wstrzyknięcia glutationu, albo podania substancji budującej glutation, takiej jak cysteina (Smith et al, U.S. Pat. No. 6,495,170). Zostało udokumentowane, że bezpośrednie podanie doustne nie podnosi poziomu glutationu (Rowe et al, U.S. Pat. No. 5,747,459), jak i nie przynosi klinicznych korzyści. [0020] Dożylne podawanie glutationu okazało się korzystne, ponieważ poprawia przepływ krwi w wypadku chorób naczyń obwodowych oraz łagodzi objawy związane z chorobą Parkinsona. Niniejszy wynalazek zawiera zastrzeżenia patentowe dotyczące użycia wynalazku w formie doustnej przy leczeniu choroby Parkinsona, mukowiscydozy, chorób układu naczyniowego, cukrzycy, jak również chorób zapalnych układu oddechowego, takich jak przewlekłe choroby zatok, rozedma i alergia. Dzięki wynalazkowi możliwe jest lizosomalne zawarcie glutationu (zredukowanego) co z kolei umożliwia dostarczanie zredukowanego glutationu do przedziałów wewnątrzkomórkowych komórek, takich jak czerwone krwinki i nie tylko. Ta właściwość wynalazku jest ważna dla osób z wadami związanymi z transportem glutationu do komórek, jak ma to miejsce w przypadku mukowiscydozy. [0021] Klinicznie efektywne użycie glutationu w jego czystej postaci, bezpośrednio bez żadnego dodatkowego kapsułkowania lub transformacji (w ‘czystej’ postaci) było ograniczone do dożylnego podania związku w formie zredukowanej. Ponieważ glutation jest nietrwały w roztworze bez dodatkowej ochrony przed utlenianiem, które zapewnia mu ten wynalazek, istnieją ograniczenia związane ze trwałością roztworu. Demopoulus et al, U.S. Pat. # 6,204,248 opisuje metodę przygotowania glutationu połączonego z krystalicznym kwasem askorbinowym otoczonym żelową powłoką do doustnego podania. Demopoulus et al, U.S. Pat. # 6,204,248 opisuje użycie glutationu połączonego z krystalicznym kwasem askorbinowym otoczonym żelową powłoką do doustnego podania w celu zapobiegnięcia reakcji redoksu w komórkach oraz łagodzenia procesów chorobowych. Demopoulus et al, U.S. Pat. No. 6,350,467 przytacza użycie glutationu połączonego z krystalicznym kwasem askorbinowym otoczonym żelową powłoką do 3 doustnego podania w celu dodatkowego leczenia stanów chorobowych. Niedawny patent, Smith, U.S. Pat. No. 6,764,693 powołuje się na użycie liposomów zawierających kombinację glutationu połączonego z co najmniej jedną inną substancją przeciwutleniającą tak aby zwiększyć wewnątrzkomórkowe oraz zewnątrzkomórkowe przeciwutleniacze. Nie istnieje żadne zastrzeżenie patentowe dla użycia liposomalnego glutationu oddzielnie lub połączonego z innymi przeciwutleniaczami do używanych w celu leczenia choroby Parkinsona lub mukowiscydozy. Dodatkowo, zastrzeżenie patentowe dla aktywności liposomu w Smith’693 dotyczy liposomu odpowiedniego dla przechodzenia peroksydacji i lizy, uwalniającego uwalniających swoją zawartość do obiegu. Preferowana metoda kompozycji liposomu będąca zastrzeżeniem patentowym dla tego wynalazku dotyczy liposomu, który funkcjonuje przez syntezę i przepływ zawartości glutationu do komórek. Dowody przemawiające za tą metodą działania są zaprezentowane w przykładach klinicznych opisujących podniesienie poziomu glutationu w czerwonych krwinkach, jak również poprawę stanu zdrowia osób z mukowiscydozą. [0022] Liposom jest mikroskopijnym, wypełnionym cieczą woreczkiem, którego ściany są zbudowane z jednej lub więcej warstw substancji fosfolipidowej identycznej z fosfolipidami tworzącymi membrany komórkowe. Lipidy mogą być wykorzystywane do dostarczania organizmowi substancji takich jak leki z powodu zwiększonego wchłaniania liposomu. Zewnętrzna ściana liposomu jest rozpuszczalna w tłuszczach, podczas gdy jej wnętrze jest rozpuszczalne w wodzie. Taka kombinacja pozwala na to, żeby liposom stał się doskonałą metodą dostarczania rozpuszczalnych w wodzie substancji, które w innym wypadku nie byłyby wchłaniane przez organizm. Substancją powszechnie wykorzystywaną w budowie liposomów jest fosfatydylocholina, która wchodzi w skład lecytyny. Dostępny jest bardziej szczegółowy opis składników tego wynalazku. [0023] Mukowiscydoza (CF) jest schorzeniem dziedzicznym, na które cierpi około 30 000 dzieci w Stanach Zjednoczonych. Jest to najczęstsza choroba genetyczna, powodująca najwięcej zgonów wśród dzieci. Mukowiscydoza polega na wytwarzaniu grubego śluzu w płucach oraz zatokach i prowadzi do powtarzających się infekcji, jak i dysfunkcji układu pokarmowego. Na chwilę obecną nie ma żadnego lekarstwa i żadna z proponowanych terapii nie jest w stanie naprawić zasadniczej wady komórkowej. Obecna terapia polega na usuwania śluzu za pomocą terapii fizycznych i terapii antybiotykowych, leczących zakażenia, których występowanie jest nieuchronne. Nawet przy intensywnych terapiach obecna średnia długość życia ludzi z CF wynosi niewiele ponad 30 lat. Choć CF zaburza 4 funkcjonowanie układu pokarmowego oraz narządów płciowych, choroba płuc jest główną przyczyną śmierci dla w przypadku 90% pacjentów CF. [0024] Najnowsze badania wskazują na to, że defekt genetyczny wywołujący CF występuje w białku, które przenosi substancje przez membrany komórkowe. To powoduje niezdolność ludzi z CF do przenoszenia chlorków do komórek, co powoduje charakterystyczne nagromadzenie nadmiaru chlorków w skórze. Ta obserwacja prowadzi do wstępnej charakterystyki testu na CF, testu chlorkowego. Potwierdzone zostało, iż białko, które przenosi chlorek, błonowy regulator przewodnictwa (CFTR), przenosi inne duże aniony takie jak glutation przez membrany komórkowe. Płyn nabłonkowy płuc dorosłych z CF posiada niższe stężenie glutationu niż grupy kontrolne, a obserwacje laboratoryjne myszy bez białka genowego CFTR potwierdzają obserwacje, iż przepływ glutationu jest niedostateczny przy CF. Dodatkowo, stosunek zredukowanych do utlenionych GSH u osób z CF jest nieprawidłowy, z widocznym nadmiarem utlenionego glutationu. Brak przepływu glutationu doprowadził do obserwacji, iż doustne suplementy używane w celu zwiększenia poziomów glutationu mogą nie docierać do wewnętrznych komórek, wykazujących niedostatki glutationu, takich jak czerwone krwinki (RBC). W ten sposób, poziom, stężenie glutationu w RBC został zaproponowany jako potencjalny wskaźnik zaawansowania choroby u osób z mukowiscydozą. [0025] Większość glutationu powstaje w wątrobie i jest uwalniana do krwi. Upośledzony przepływ membranowy przy mukowiscydozie wydaje się wpływać na zdolność czerwonych krwinek do utrzymywania wystarczających poziomów glutationu wewnątrz ścianek komórek, takich jak czerwone krwinki. Stąd, poważniejsze przypadki mukowiscydozy są związane z obniżeniem poziomu glutationu w czerwonych krwinkach, większym niż w osoczu krwi. Zastosowanie opisywanego wynalazku, liposomalnego glutationu, może podnieść poziom glutationu w komórkach ciała, takich jak czerwone krwinki. [0026] Zostało udokumentowane, iż liposomy posiadają zdolność do łączenia się z czerwonymi krwinkami jak i do dostarczania swojej zawartości do komórek (Constantinescu I, Artificial cells, blood substitutes, and immobilization biotechnology. 2003 Nov;31(4):395-424). [0027] Przykłady kliniczne wykazują, iż opisywany wynalazek jest w stanie podnieść poziom glutationu w czerwonych krwinkach u osób z mukowiscydozą. Ponieważ komórki osób z CF posiadają wadę genetyczną utrudniającą przepływ glutationu przez membrany komórkowe, obserwuje się wzrost w poziomach glutationu w czerwonych krwinkach po 5 doustnym przyjęciu opisywanej substancji i poprzez mechanizm syntezy liposomu. Wstrzyknięcie glutationu zredukowanego do systemu krwionośnego nie spowodowałoby wzrostu glutationu u osób z mukowiscydozą. [0028] Liposomy mogą przeniknąć do komórek na cztery różne sposoby: [0029] Adsorpcja: Ściana liposomu przylega do komórki i uwalnia zawartość liposomu do komórki. [0030] Endocytoza: W endocytozie komórka pochłania liposom tworząc dodatkową lamellę wokół liposomu, która jest rozpuszczona wewnątrz komórki, wypuszczając zawartość liposomu. W procesie endocytozy część membrany zostaje wklęśnięta i ściśnięta, tworząc pęcherzyk otoczony membraną zwany endosomem. [0031] Wymiana lipidowa: Zawartość lipidu liposomu i komórka wymieniają się zawartością lipidu, uwalniając zawartość liposomu. [0032] Synteza: Połączenie membrany liposomu z membraną komórki, przenoszące zawartość liposomu do komórki. [0033] Jeden lub więcej z tych mechanizmów odbywa się w opisanym wynalazku, umożliwiając przenoszenie glutationu do komórek osób chorych na mukowiscydozę. [0034] Przyjmowanie składników odżywczych w postaci tabletek i pokarmów stałych jest wygodne, jednak dla części populacji połykanie tabletek nie jest możliwe. Może to być spowodowane wiekiem. Zarówno dla dzieci, jak i dla osób starszych, połykanie tabletek jest trudne. Biorąc to pod uwagę, jak również łatwość obliczania dawki, podawanie glutationu w postaci płynnego żelu będzie bardziej powszechnie dogodne. Kolejną zaletą jest fakt, iż opisywany wynalazek pozwala na podanie większej ilości GSH w pojedynczej dawce w porównaniu z innymi formami nie pozajelitowego podawania a także pozwala na stopniowe zwiększanie dawek dla dzieci i dorosłych. [0035] Liposomalne dostarczanie glutationu, jak to zostało opisane w tym wynalazku jest nieocenione dla dostarczania glutationu przez membrany komórek, co jest kluczowe w radzeniu sobie z mukowiscydozą. Choroba powoduje upośledzenie przepływu niektórych molekuł, takich jak glutationu, przez membrany komórek skutkując wewnątrzkomórkowym niedostatkiem glutationu. Problemy związane z mukowiscydozą pojawiają się na wczesnych etapach życia, w okresie, kiedy możliwe jest tylko podawanie leku w formie płynnej. [0036] Choroba Parkinsona. [0037] Choroba Parkinsona (PD) polega na uszkodzeniu systemu neuro-motorycznego a jej cztery podstawowe objawy to: 6 [0038] Drżenie rąk, ramion, nóg, szczęki i twarzy [0039] Sztywność lub zesztywnienie członków i tułowia [0040] Bradykinezja lub spowolnienie ruchów [0041] Brak stabilności postawy lub zaburzenia równowagi i koordynacji ruchowej [0042] Osoby z chorobą Parkinsona mogą mięć problemy z chodzeniem, mówieniem lub wykonywaniem prostych czynności. Choroba ta jest zarówno przewlekła jak i postępująca. Wczesne objawy są niezauważalne, pojawiają się stopniowo, po czym często się nasilają. [0043] Mózg stanowi centrum dowodzenia organizmu i koordynuje informacje otrzymywane z różnych części systemu sensorycznego. Mózg przetwarza informacje i przekazuje je do systemu motorycznego, a ten powoduje ruch ciała. Ta ściśle zorganizowana droga informacji może zostać zakłócona przez najdrobniejsze zakłócenie, jak na linii montażowej??, kiedy to błąd w komórkowej sekwencji chemicznej może wywołać olbrzymie nieprawidłowości. [0044] Istnieją dwa obszary mózgu ściśle powiązane z nieprawidłowym funkcjonowaniem układu motorycznego: istota czarna śródmózgowia i prążkowie. Istota czarna śródmózgowia znajduje się w śródmózgowiu, w połowie między korą mózgową, a rdzeniem kręgowym. U zdrowych ludzi, istota czarna śródmózgowia zawiera komórki nerwowe, zwane komórkami istoty czarnej, które produkują dopaminę. Dopamina przedostaje się z istoty czarnej śródmózgowia do obszaru mózgu, zwanego prążkowiem. W prążkowiu, dopamina uaktywnia komórki nerwowe, które koordynują prawidłową pracę mięśni. [0045] U ludzi z chorobą Parkinsona, komórki istoty czarnej ulegają zniszczeniu i umierają w przyspieszonym tempie a utrata tych komórek powoduje zmniejszenie ilość dopaminy docierającej do prążkowia. Dopamina jest jedną z substancji chemicznych odpowiedzialnych za przekazywanie sygnałów w mózgu i jej funkcjonowanie jest powiązane z innymi neuroprzekaźnikami takimi jak acetylocholina. Bez odpowiedniej dawki dopaminy, komórki nerwowe prążkowia uaktywniają się w niewłaściwy sposób, upośledzając zdolność osoby do kontrolowania funkcji mięśniowych takich jak chodzenie, utrzymywanie równowagi i ruchy mięśni. [0046] Komórki istoty czarnej śródmózgowia mogą być szczególnie wrażliwe na stres oksydatywny. Stres oksydatywny występuje w komórkach istoty czarnej śródmózgowia ponieważ metabolizm dopaminy wymaga utleniania i może doprowadzić do wytworzenia wolnych rodników w procesie tworzenia się nadtlenków wodoru. W obecności jonów metalu takich jak żelazo, nadtlenek wodoru może tworzyć nadtlenki jonów, które mogą 7 być bardzo szkodliwe dla komórek. Nadtlenek wodoru jest naturalnie usuwany przez zredukowany glutation w reakcji katalizowanej przez nadtlenki glutationu, stąd, zwiększone tempo dawkowania dopaminy lub niedobór glutationu mogą doprowadzić do stresu oksydatywnego. Dlatego wydaje się, iż wolne rodniki mogą być jednymi z najważniejszych czynników odpowiedzialnych za zniszczenie neuronów istoty czarnej śródmózgowia, powodującego chorobę Parkinsona. [0047] Podczas gdy choroba Parkinsona była leczona z pewnymi sukcesami z zastosowaniem dożylnych zastrzyków glutationu, nie odnotowano żadnych sukcesów w użyciu doustnego glutationu w leczeniu choroby Parkinsona. Sechi G, Deledda MG, Bua G, Satta WM, Delana GA, Pes GM, Rosati G. Reduced intravenous glutathione in the treatment of early Parkinson’s diesease, Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry, 1996 Oct;20(7):1159-70 PMID: 8938817. [0048] Kliniczna poprawa spowodowana zastosowaniem opisanego wynalazku zaobserwowana u pacjentów z chorobą Parkinsona sugeruje, iż doustny liposomalny glutation jest nie tylko biodostępny, lecz również jest wchłaniany przez centralny system nerwowy. [0049] Podczas kilku badań wykazano niedobór biochemicznego nadtlenku zredukowanego glutationu w komórkach istoty czarnej śródmózgowia osób z chorobą Parkinsona. Wielkość niedoboru glutationu wydaje się być proporcjonalna do stopnia zaawansowania choroby. [0050] Standartowe leczenie choroby Parkinsona polegało na uzupełnianiu dopaminy w postaci zwanej lewodopa. Lewodopa, również znana jako L-Dopa (od pełnej nazwy L3,4- dihydroksyfenyloalanina) jest neutralnym aminokwasem, naturalnie występującym w komórkach roślinnych i zwierzęcych i jest wykorzystywany do leczenia objawów takich jak zesztywnienie, drżenie, spazmy i słaba kontrola mięśni, występujących przy chorobie Parkinsona. Po doustnym przyjęciu, lewodopa jest wchłaniana przez jelito cienkie. Struktura lewodopy umożliwia jej dotarcie do mózgu, gdzie komórki nerwowe mogą uczestniczyć w reakcji dekarboksylacji lewodopy i wytworzyć dopaminę w celu uzupełnienia jej kurczących się zapasów w mózgu. Dopamina nie może być podawana bezpośrednio, ponieważ nie może przeniknąć przez barierę krew-mózg, złożonej z siatki drobnych naczyń krwionośnych i komórek, które filtrują krew docierającą do mózgu. Lewodopa pokonuje tą barierę poprzez system transportujący neutralny aminokwas. W przypadku, gdy lewodopa jest zażywana samodzielnie, około 95% jest metabolizowane w dopaminę w organizmie, zanim dotrze do mózgu. Dopamina krążąca w organizmie, 8 zamiast być wykorzystana przez mózg, może powodować efekty uboczne takie jak nudności, wymioty zanim ulegnie rozpadowi w wątrobie. [0051] Żeby ograniczyć efekty uboczne, lewodopa jest zazwyczaj podawana w połączeniu z karbidopą w celu zwiększenia dostępności i wykorzystania lewodopy. Karbidopa powstrzymuje zewnętrzną dekarboksylację lewodopy z wyjątkiem centralnej dekarboksylacji, ponieważ nie przekracza ona bariery krew-mózg. Ponieważ zewnętrzna dekarboksylacja jest ograniczona, większa ilość lewodopy może być przenoszona do mózgu, gdzie zostanie przetworzona na dopaminę i złagodzi objawy choroby Parkinsona. Karbidopa i lewodopa podawane są razem w lekach o nazwie rynkowej Stalevo (znak towarowy zastrzeżony przez Orion Pharma Inc.) lub Sinemet (znak towarowy zastrzeżony przez Bristol-Myers-Squibb) i różnych generycznych formach. Dodatkowe zastosowanie karbidopy jest tak efektywne, iż dawka lewodopy musi zostać zredukowana o 80%, gdy używa się obu substancji jednocześnie. Ogranicza to występowanie skutków ubocznych lewodopy. Po dodaniu karbidopy, okres połowicznego rozpadu lewodopy wydłuża się z 1 do 2 godzin (może trwać aż do 15 godzin u niektórych osób). Około 30% karbidopy jest wydalane w niezmienionej formie z moczem. [0052] W leczeniu PD używane są również agonisty dopaminy, takie jak dwuchlorowodorek pramipeksolu sprzedawany pod nazwą MIRAPEX (znak towarowy zastrzeżony przez Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. i Pfizer, Inc.), który także może być podany z doustną dawką liposomalnego zredukowanego glutationu. [0053] Karbidopa/lewodopa zmniejsza sztywność oraz powolność ruchów będące efektem choroby Parkinsona, ale jest mniej efektywna przy leczeniu drżenia oraz problemów z równowagą. [0054] W trakcie ostatnich badań okazało się, że dopamina (podawana oddzielnie lub w połączonej formie karbidopy i lewodopy) skutkuje zwiększeniem występowania wolnych rodników i kontynuacją procesu chorobowego. Z tego powodu, podczas gdy podawanie lewodopy umożliwia złagodzenie objawów choroby Parkinsona, nie ma ono wpływu na podstawowe mechanizmy powodujące powstawanie wolnych rodników, utlenianie oraz wewnątrzkomórkową utratę glutationu. Po kilku latach stosowania, efektywność karbidopy/lewodopy zmniejsza się i pacjenci potrzebują większych i częstszych dawek w celu kontrolowania objawów choroby. [0055] Wiele badań wykazało niedobór biochemicznego przeciwutleniacza o nazwie zredukowany glutation w konkretnych komórkach mózgowych, związanych z zaburzeniami ruchu, zwanych istotą czarną śródmózgowia (Pearce RK, Owen A, Daniel S, 9 Jenner P, Marsden CD. Alterations in the distribution of glutathione in the substantia nigra in Parkinson’s disease. Journal of Neural Transmission, 1997:104(6-7):661-77. PMID:9444566). [0056] Wielkość niedoboru glutationu wydaje się być proporcjonalna do stopnia zaawansowania choroby. Pojawiają się teorie, iż sekwencja zdarzeń, które powodują utratę dopaminy, widoczna przy chorobie Parkinsona związana jest z zwiększonym występowaniem dopaminy w komórkach istoty czarnej śródmózgowia z powodu zwiększonej produkcji peroksydów wodoru. Występowanie tej substancji tworzącej wolne rodniki jest widocznie związana brakiem zredukowanego glutationu lub nagromadzeniem się glutationu w utlenionym stanie. W artykule, który ukazał się we Włoszech w 1996 roku rozważano możliwość terapeutycznego wspomagania komórek z niedoborem glutationu przez użycie dożylnego glutationu. Glutation podawany był dożylnie 9 pacjentom, w dawkach 600 mg dwa razy dziennie, przez 30 dni. Pacjenci byli leczeni standardową terapią wykorzystującą karbidopę-lewodopę. Zauważono, iż stan wszystkich pacjentów poprawił się po terapii glutationowej, a ich niepełnosprawność uległa zmniejszeniu o 42%. Korzyści terapeutyczne utrzymywały się przez 2-4 miesiące. Autorzy zauważyli, że glutation jest wyjątkowo skuteczny i przypuszczali, że może on opóźnić rozwój choroby. Użycie zredukowanego glutationu w liposomie nie było w żaden sposób wspomniane (Sechi G, Deledda MG, Bua G, Satta WM, Delana GA, Pes GM, Rosati G. Reduced intravenous glutathione in the treatment of early Parkinson’s disease. Progress in Neuropsychopharmacology & Biological Psychiatry, 1996 Oct;20(7):1159-70. PMID: 8938817). [0057] Użycie wynalazku pozwala przywrócić poziom zredukowanego glutationu w komórkach mózgowych powiązanego z chorobą Parkinsona, co może zostać efektywnie wykorzystane przez organizm chorego i przywrócić prawidłowy metabolizmu dopaminy, jak i jej prawidłowe działanie. Obecnie nie istnieją zastrzeżenia patentowe ani żadne wzmianki w literaturze opisujące użycie liposomalnego glutationu do leczenia choroby Parkinsona. [0058] Wynalazek jest najbardziej efektywny kiedy optymalna dawka glutationu jest podawana z użyciem liposomalnego glutationu dla przywrócenia metabolizmu dopaminy do stanu funkcjonalnego. Pozwala to na złagodzenie objawów przez umożliwienie komórkom istoty czarnej śródmózgowia oraz prążkowia, reagującym na dopaminę, na reagowanie na niższe ilości dostępnej dopaminy. Wynalazek podawany osobie z chorobą Parkinsona, która stosuje lewodopę/karbidopę, pozwala jej na bardziej efektywną reakcję na obecny sposób dawkowania, pozwalając na niższe plateau dawkowania, którego nie 10 otrzymaliby w innym wypadku. Dodatkowo, zastosowanie wynalazku pozwoli niektórym osobom na reakcję na niższe dawki lewodopy/karbidopy. Dla osób wykazujących wczesne objawy choroby Parkinsona zastosowanie wynalazku może pozwolić na opóźnienie potrzeby aplikowania lewodopy/karbidopy. [0059] Osoby z postępująca chorobą Parkinsona mogą mieć liczne problemy motoryczne związane z terapią z użyciem lewodopy. Zaburzenia funkcji motorycznych, takie jak poranna akinezja i jej ustępowanie są wskazaniem do użycia wynalazku liposomalnego glutationu. [0060] Wynalazek jest kombinacją mającą na celu dostarczenie terapeutycznie efektywnej dawki glutationu osobom z chorobą Parkinsona przy zastosowaniu liposomalnego kapsułkowania glutationu. Przed wprowadzeniem wynalazku, jedyną metodą dostarczania terapeutycznie efektywnej dawki glutationu był dożylny zastrzyk glutationu. Podczas gdy dożylny zastrzyk jest pomocny dla ustalenia efektywności terapeutycznej glutationu podawanego oddzielnie, koszty i niedogodności podawania zastrzyku sprawiły, iż niezmiernie trudne jest podawanie wielokrotnych dawek podczas stałej terapii. Wynalazek jest również użyteczny w postępowaniu z bardziej ogólnymi rodzajami chorób neurodegeneratywnych, takich jak choroba Parkinsona. [0061] Podczas gdy istnieją prace naukowe traktujące o dożylnej absorpcji liposomalnej chroniącej komórki wątroby u zwierząt wystawionych na toksyczne działanie substancji na wątrobę (Wendel A., Hepatic lipid peroxidation: caused by acute drug intoxication, prevented by liposomal glutathione, International Journal Clinical Pharmacology Research, 1983;3(6):443-7. PMID: 6678834), nie istnieje literatura na temat korzystnych skutków zażywania doustnego liposomalnego glutationu w leczeniu jednostek chorobowych, ani technologia z zastosowaniem liposomalnego glutationu podawanego doustnie (posiadającej zastrzeżenie patentowe) w terapii stanów chorobowych takich jak choroba Parkinsona lub mukowiscydoza. [0063] Ze względu na brak dostępności glutation nie był podawany w postaci doustnej w celu leczenia stanów chorobowych. Przedmiotem wynalazku jest kompozycja zawierająca glutation, która jest efektywna przy doustnym podaniu, metodę wytwarzania kompozycji zawierającej glutation, która jest efektywna przy doustnym podaniu i jest metodą doustnego podawania zredukowanego glutationu poprzez zawarcie zredukowanego glutationu w liposomie, co powoduje zwiększone wchłanianie glutationu z przewodu pokarmowego oraz do komórek ciała. Dodatkowo kapsułkowanie w liposomie zapobiega lub spowalnia degradację aktywnej formy 11 zredukowanego glutationu przed przechodzeniem w stan utleniony zanim zostanie on wchłonięty ogólnoustrojowo. Metoda podawania zwiększa w ten sposób biodostępność zarówno przez wchłanianie jak i przez utrzymywanie aktywnego stanu przeciwutleniacza w zredukowanym glutationie. [0064] Liposomalne preparaty zastrzegane tym wynalazkiem pozwalają na produkcję trwałego produktu, który może być użyty do podawania glutationu w dogodnej formie. Trwałość ma tu dwojakie znaczenie: pierwsze, omówione wcześniej, to efektywne dostarczania zredukowanego glutationu do komórek; oraz drugie, dotyczący stabilności produktu pod względem żywotności. Opisany preparat liposomalno-glutationowy jest również trwały oksydacyjnie i pozwala na dwuroczną przewidywaną żywotność produktu bez schładzania, opartą na standaryzowanych testach warunków skrajnych produktów i ma określone właściwości wchłaniania w membrany komórkowe, co wpływa na poprawę niektórych stanów chorobowych. [0065] Tabela poniżej pokazuje wyniki badań nad trwałością żywotności, która jest nowatorska w tym wynalazku w porównaniu do dotychczasowej techniki, gdzie niemożliwe było połączenie trwałości żywotności i trwałości in vivo w celu umożliwienia dostarczenia zredukowanego glutationu do komórek. Tabela 1 Preparat 1 [0066] Czas: 4 miesiące po wyprodukowaniu Utleniony glutation: 4,177 mg/ml Zredukowany Glutation: 80,36 mg/ml % Zredukowanego Glutationu: 95% Preparat 2 [0067] Czas: podczas produkcji Utleniony glutation: 2,933 mg/ml Zredukowany Glutation: 84,14 mg/ml % Zredukowanego Glutationu: 96,7% [0068] Dotychczas użycie liposomów zawierających zakapsułkowany glutation nie było rozpowszechnione gdyż istniała obawa, że kwasy i enzymy żołądka niszczą te substancje. Preparat będący przedmiotem wynalazku może dostarczyć do organizmu terapeutycznie aktywne ilości glutationu. Wynalazek wykorzystuje kapsułkowanie lipidowe glutationu 12 (zredukowanego) w pęcherzyku lipidowym liposomów i podawany doustnie a następnie wchłaniany przez błony śluzowe nosa, ust, gardła i przewodu pokarmowego zapewnia dogodne podawanie terapeutycznie efektywnych ilości glutationu (zredukowanego). Wynalazek może być również stosowany miejscowo przez podawanie naskórne, podskórne lub dożylne. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYKONIANIA WYNALAZKU [0069] Przykład 1 [0070] Liposomalny glutationowy Napój lub Spray 2500 mg na uncję % wagowych Woda Dejonizowana 71,9 Gliceryna 15,00 Polisorbat 20 2,50 Lecytyna 1,50 Wyciąg z Pestek Cytrusów 0,50 Sorbinian Potasu 0,10 Glutation(zredukowany) 8,50 [0071] Składniki: lecytyna, alkohol etylowy, cholesterol i gliceryna zostały zmieszane w dużej kolbie pomiarowej i pozostawione w celu przygotowania postaci leku (w przypadku kiedy procent glutationu (zredukowanego) wynosi 8,5, glutation (zredukowany) może być obniżony do poziomu 8,25 z dodatkiem 0,25% octanu tokoferolu). [0072] W osobnej zlewce, woda, kwas hydroksycytrynowy, gliceryna, polisorbat 20, glutation zostały zmieszane i podgrzane do 50 stopni C. [0073] Mieszanina wody została dodana do mieszaniny lipidów podczas energicznego mieszania z wysoką szybkością przy pomocy homogenizatora-miksera o wysokim ścinaniu, przy 750-1500 obrotach na minutę przez 30 minut. [0074] Homogenizator został zatrzymany a roztwór został umieszczony na talerzu magnetycznym, pokrytym folią Parafilm i mieszany mieszadełkiem magnetycznym do chwili osiągnięcia temperatury pokojowej. Następnie dodano wyciąg z pestek cytrusów i roztwór został umieszczony w odpowiednim dozowniku jako płyn lub w formie sprayu. [0075] Analiza preparatu pod mikroskopem optycznym ze spolaryzowanym światłem przy 400krotnym powiększeniu potwierdziła obecność zarówno wielowarstwowych pęcherzyków lipidowych (MLV) jak i jednowarstwowych pęcherzyków lipidowych. 13 [0076] Substancja będąca przedmiotem wynalazku była wytwarzana przy użyciu różnych ilości glutationu w celu otrzymania dawek glutationu o mniejszym stężeniu. Przytaczana metoda wytwarzania opisana jest w Keller et al, U.S. Pat No. 5,891,465. [0077] Substancja ta została również wyprodukowana z dodatkiem EDTA (kwas edetynowy), 100 mg na uncję zostało kapsułkowane w liposomie wraz z glutationem. [0078] Przykład 1A [0079] Liposomalny glutationowy Napój lub Spray 2500 mg na uncję lub forma odpowiednia dla kapsułkowania lub żelu % wagowych Woda Dejonizowana 74,4 Gliceryna 15,00 Lecytyna 1,50 Wyciąg z Pestek Cytrusów 0,50 Sorbinian Potasu (opcjonalny konserwant) 0,10 Glutation (zredukowany) 8,50 [0080] Mieszanina lipidowa, w skład której wchodzą lecytyna, alkohol etylowy i gliceryna została zmieszana w duże kolbie pomiarowej i pozostawiona do wytworzenia się postaci leku. [0081] W osobnej zlewce, mieszanina wody, zawierająca wodę, glicerynę i glutation została zmieszana i podgrzana do 50 stopni C. [0082] Mieszanina wody została dodana do mieszaniny lipidów podczas energicznego mieszania z wielką szybkością homogenizatorem-mikserem o wysokim ścinaniu, przy 7501500 obrotach na minutę przez 30 minut. [0083] Homogenizator został zatrzymany a roztwór został umieszczony na talerzu magnetycznym, pokrytym folią Parafilm i mieszany mieszadełkiem magnetycznym do chwili osiągnięcia temperatury pokojowej. W standardowej produkcji, wyciąg z pestek cytrusów zostałby dodany, jak i konserwant taki jak sorbinian potasu lub BHT zostałby dodany. Roztwór zostałby umieszczony w odpowiednim dozowniku jako płyn lub w formie sprayu. 14 [0084] Analiza preparatu pod mikroskopem optycznym z spolaryzowanym światłem przy 400 krotnym powiększeniu potwierdziła obecność zarówno wielowarstwowych pęcherzyków lipidowych (MLV) jak i jednowarstwowych pęcherzyków lipidowych. [0085] Substancja będąca przedmiotem wynalazku była wytwarzana przy użyciu różnych ilości glutationu w celu otrzymania dawek glutationu o mniejszym stężeniu. Metoda wytwarzania opisana w Keller et al, U.S. Pat No. 5,891,465 jest częścią tego opisu. [0086] Przykład 2 (metoda inna niż opisana w wynalazku) [0087] Liposomalny glutationowy Napój lub Spray 1000 mg na uncję [0088] Z EDTA 1000 mg na uncję % wagowych Woda Dejonizowana 73,55 Gliceryna 15,00 Polisorbat 20 2,50 Lecytyna 1,50 Wyciąg z Pestek Cytrusów 0,50 Sorbinian Potasu 0,10 Glutation(zredukowany) 3,55 EDTA 3,30 [0089] Metoda 2 polega na umieszczeniu ciekłego liposomu (takiego jak w Przykładzie 1A) w żelowej kapsułce dla zwiększenia trwałości, co zapewnia dogodny sposób podawania i wspomaga uwalnianie treści liposomu. Tu glutation w formie zredukowanej jest kapsułkowany w liposomach albo w formie preliposomu zamknięty w kapsułce. Kapsułka może być miękką kapsułką żelową odporną na działanie pewnych ilości wody, dwuczęściową kapsułką odporną na działanie wody lub dwuczęściową kapsułką, w której liposomy są wstępnie uformowane i następnie odwodnione. [0090] Kapsułka liposomowa, może być zażywana doustnie, jak i podawana do oka, donosowo, doodbytniczo lub waginalne. [0091] Kompozycja przytoczona w przykładach 1 i 2 może być wykorzystana do kapsułkowania. [0092] Kapsułki żelowe mają mniejszą odporność na wodę. Przeciętna odporność na wodę dla miękkiej kapsułki żelowej wynosi 10% w jej wnętrzu. Stężenie wody w formule liposomowej może zawierać 60-90% wody. Niezbędnym komponentem opisywanego 15 wynalazku jest wytworzenie liposomu z stosunkowo małą ilością wody, sięgającą 5-10%. Poprzez wytworzenie liposomu z niskim poziomem wody, liposom jest w stanie zamknąć substancję aktywną biologicznie oraz ograniczyć kontakt wewnętrznej warstwy kapsułki z wodą. Stężenie wody nie powinno przekraczać poziomu odporności na wodę kapsułki, dla której jest przewidziana. Preferowaną dla tego wynalazku kapsułką jest taka, której odporność na wodę mieści się w 15-20%. [0093] Metoda opisana przez Keller et al, U.S. Pat No. 6726924 jest włączona do tego opisu. [0094] Komponenty są mieszane, a liposomy są wytworzone z użyciem techniki wstrzykiwania (Lasic, D., Liposomes, Elsevier, 88-90, 1993). Gdy mieszanina liposomowa wystygła, pobrano 0,7 ml do 1 ml strzykawki insulinowej i wstrzyknięto w otwarcie miękkiej kapsułki żelatynowej, które następnie zamknięto przy użyciu pęsety. Końcowa kapsułka zawiera 10 mg CoQ10. Napełnianie kapsułek żelatynowych na wielką skalę jest najlepsze z użyciem metody rotary-die lub innych takich jak kapsułkarka Norton. [0095] Przykład 3 (metoda inna niż opisana w wynalazku [0096] Wytwarzanie glutationu LipoCap Składnik Stężenie(%) Monooleinian Sorbitolu 2,0 Glutation(zredukowany) 89,8 Woda Puryfikowana 4,0 Sorbinian Potasu 0,2 Polisorbat 20 2,0 Phospholipon 90 (DPPC) 2,0 [0097] Komponenty są mieszane, a liposomy są wytworzone z użyciem techniki wstrzykiwania (Lasic, D., Liposomes, Elsevier, 88-90, 1993). Gdy mieszanina liposomowa wystygła, pobrano 0,7 ml do 1 ml strzykawki insulinowej i wstrzyknięto w otwarcie miękkiej kapsułki żelatynowej, które następnie zamknięto przy użyciu pęsety. Powstała kapsułka jednogramowa zawiera 898 IU witaminy E. Do zastosowań komercyjnych preferowane są metody napełniania kapsułek żelatynowych na wielką skalę, takie jak metoda rotary die. 0098] Metoda nr 3 jest oparta na wytworzeniu zawiesiny liposomowej z użyciem samokształtujących się, stabilnych termodynamicznie liposomów ukształtowanych przez 16 dodanie diacyglicerolu lipidu PEG do wodnego roztworu, kiedy to lipid ma odpowiednie właściwości szczelne i gdy połączenie zachodzi powyżej temperatury topnienia lipidu. Metoda opisana przez Keller et al, U.S. Pat No. 6,610,322 jest włączona do tego opisu. [0099] Większość, jeśli nie wszystkie znane zawiesiny liposomowe nie są termodynamicznie stabilne. Liposomy w znanych zawiesinach są za to kinetycznie zamknięte w wyższych stanach energetycznych dzięki energii użytej w ich formowaniu. Energia może być dostarczona w postaci ciepła, sonikacji, ekstruzji lub homogenizacji. Ponieważ każdy wysoki stan energetyczny dąży do obniżenia swojej energii swobodnej, znane liposomowe preparaty doświadczają problemów z agregacją, fuzją, sedymentacją i wyciekami substancji związanych z liposomami. Termodynamicznie stabilne liposomowe preparaty, które potrafiłyby uniknąć niektóre z tych problemów są z tego względu pożądane. [0100] Niniejsza metoda preferuje zawiesiny liposomowe, które są termodynamicznie stabilne w temperaturze ich tworzenia. Tworzenie tego typu zawiesina jest uzyskiwana przez użycie kompozycji lipidów, które cechują się kilkoma podstawowymi właściwościami. Po pierwsze, kompozycja lipidowa mu mieć właściwości szczelne pozwalające na tworzenie się liposomów. Po drugie, jako część grupy głównej, lipidy powinny zawierać polietylenoglikol (PEG) lub dowolny polimer, mający podobne właściwości, który ustabilizuje sterycznie liposomy w zawiesinie. Po trzecie, lipid musi mieć temperaturę topnienia, która pozwoli mu na zmianę w stan ciekły, gdy zostanie zmieszany z roztworem wodnym. [0101] Dzięki użyciu zawiesin lipidowych i ich właściwościom, mieszanie lipidu z roztworem wodnym w celu uzyskania liposomów nie wymaga zużycia dużej ilości energii. Po zmieszaniu z wodą, molekuły lipidowe rozpraszają się i samoistnie układają, gdy system powraca do swojego naturalnego stanu niewielkich ilości energii swobodnej. W zależności od użytych lipidów, stan najniższych ilości energii swobodnej może zawierać małe liposomy o jednowarstwowych pęcherzykach (SUV), o wielowarstwowych pęcherzykach (MLV), lub kombinację wymienionych. [0102] W jednym z aspektów, wynalazek stosuje metodę przygotowania liposomów (według zastrz. 1). Metoda obejmuje dostarczanie roztworu wodnego, dostarczanie roztworu lipidowego, gdzie roztwór ma pomiar parametru szczelnego P a (Pa odnosi się do powierzchniowego parametru szczelnego) wynoszący pomiędzy ok. 0,84 i 0,88, Pv (Pv odnosi się do objętościowego parametru szczelnego) wynoszący pomiędzy ok. 0,88 i 0,93, (Patrz, D.D. Lasic, Liposomes, From Physics to Applications, Elsevier, p.51 1993), i gdzie 17 przynajmniej jeden lipid w roztworze zawiera łańcuch polietylenoglikolowy (PEG); i łączenie roztworu lipidowego z roztworem wodnym. Preferowanym jest, by łańcuch PEG korzystnie posiadał wagę molekularną pomiędzy 300 Daltonami , a 5000 Daltonami. Energia kinetyczna, taka jak wstrząsy lub wirowania, może być dostarczona roztworowi lipidowemu i roztworowi wodnemu. Roztwór lipidowy może zawierać pojedynczy lipid. Lipid może zawierać dioleolylglycerol-PEG-12, oddzielnie lub jako jeden z lipidów w mieszance. Metoda może ponadto zawierać przygotowanie aktywnego związku chemicznego, w tym wypadku glutationu (zredukowanego); a także połączenie aktywnego związku chemicznego z roztworem lipidowym i roztworem wodnym. [0103] Metoda 3 to połączeniem glutationu (zredukowanego) i EDTA. [0104] Inne metody zastosowania glutationu (zredukowanego) i związków chemicznych zastrzeżone w tym wynalazku, łącznie z lewodopą, karbidopą, selenem i EDTA są opisane w Keller et al, U.S. Pat. No. 6,610,322. PRZYKŁADY BADAŃ I DAWKOWANIE [0105] Liposomalny glutation w mukowiscydozie [0106] Przypadek 1. U MF w wieku 4 lat została zdiagnozowana mukowiscydoza i stwierdzono u niej podwyższony poziom chlorku w pocie. Przechodzi ona częste infekcje układu oddechowego, wymagające terapii oraz cierpi na chroniczny kaszel. Według matki, dziewczynka ma mało energii na zabawę i wysiłek fizyczny. Poziom glutationu czerwonych krwinek u MF został określony w grudniu 2004 roku na poziomie 136 (normalny przedział to 200 – 400 mikromoli/l). [0107] Doustny liposomalny glutation zredukowany został podany (i przyswojony) w ilości, 300 mg glutationu na dawkę, przy jednej dawce na dzień przez dwa tygodnie. Po dwóch tygodniach podawania, glutation został określony na poziomie 570 mikromoli/l. W czasie podawania doustnego liposomalnego glutationu zredukowanego, u dziewczynki zauważono ustanie chronicznego kaszlu oraz wzrost energii. Według matki, po podaniu liposomalnego glutonianu dziewczynka zaczęła funkcjonować normalnie. Dawka została zmniejszona do 150 mg, podawanej raz dziennie, a poziom glutationu zredukowany do 240 mikromoli/l. w celu utrzymania efektów działania. [0108] Przypadek 2. Laura B [0109] 23 lata, z CF objawiającą się przewlekłymi chronicznymi chorobami płucnymi oraz chronicznym zapaleniem zatok. [0110] Jej płuca przez dwa lata były w złym stanie. 18 [0111] Poziom RBC i GSH był niski. [0112] Początkowy poziom RBC GSH był na niskim poziomie 46 mikromoli/l. Po 3 tygodniach terapii RBC GSH wynosiło 246 mikromoli/l. Normalny przedział RBC GSH to 200 - 400 mikromoli/l. [0113] Pod względem klinicznym, pacjentka zauważyła zmniejszenie się ilość wydzieliny śluzowej w obu zatokach i w płucach, jak również złagodzenie chronicznego kaszlu. [0114] Przypadek 3. [0115] GF, 18 miesięczna dziewczynka z objawami mukowiscydozy ze strony układu pokarmowego. W pierwszych 12 miesiącach życia dziewczynka rozwijała się prawidłowo, przy wadze 50 percentylu wagi. W czasie wstępnej oceny dziecko spadło do 25 percentylu wagi. Jej poziom glutationu we krwi był w normie. Dziecko było leczone przez podawanie liposomalnego glutationu w dawce 100 mg na 30 funtów wagi, dwa razy dziennie. [0116] Po trzech miesiącach przyswajania liposomalnego glutationu rozwój dziecka wrócił do normy, a jej waga wróciła do 50-60 percentylu. [0117] Zalecone dawkowanie zgodnie z opisem w przykładzie 1. [0118] Przyjmowanie doustnego liposomalnego glutationu 2500 mg na uncję. ZALECANE UŻYCIE [0119] 1 uncja to 5,56 łyżeczki. [0120] 1 łyżeczka doustnego liposomalnego glutationu zredukowanego zawiera w przybliżeniu 440 mg GSH. [0121] Sugerowana dawka zależy od masy ciała. Proponowane ilości dotyczą dziennego użycia. [0122] Delikatne zmieszanie liposomalnego glutationu z wybranym płynem. [0123] Po otwarciu zaleca się pozostawieniu w chłodnym miejscu. DZIENNA DAWKA WEDŁUG MASY CIAŁA [0124] Poniżej 30 funtów: 1/4 łyżeczki = 110 mg GSH [0125] 30 – 60 funtów: 1/2 łyżeczki = 220 mg GSH [0126] 60 – 90 funtów: 3/4 łyżeczki = 330 mg GSH [0127] 90 – 120 funtów: 1 łyżeczka = 440 mg GSH [0128] 120 – 150 funtów: 1 1/2 łyżeczki = 660 mg GSH [0129] Powyżej 150 funtów: 2 łyżeczki = 880 mg GSH [0130] Choroba Parkinsona: 19 [0131] Zastosowanie substancji w leczeniu choroby Parkinsona rozpoczyna się od obserwacji reakcji na terapię glutationową z użyciem dożylnych zastrzyków 1500 mg glutationu. 1500 mg glutationu jest podawane dożylnie co 12 do 24 godzin, maksymalnie 3 dawki; po czym obserwuje się reakcję na terapię. Jeśli reakcja na glutation jest pozytywna (złagodzenie u osoby objawów choroby Parkinsona), substancja (liposomalny glutation) jest podawany doustnie w celu utrzymania łagodzenia objawów choroby Parkinsona. [0132] Wskazówki dotyczące dawkowania Lewodopy [0133] Karbidopa/ Lewodopa: Każda tabletka 10/100 zawiera: karbidopa, 10 mg i lewodopa, 100 mg. [0134] Każda tabletka 25/100 zawiera: karbidopa, 25 mg i lewodopa, 100 mg. [0135] Każda tabletka 25/250 zawiera: karbidopa, 25 mg i lewodopa, 250 mg. [0136] Każda tabletka dla podtrzymywania uwalniania zawiera: karbidopa, 50 mg i lewodopa 200 mg. [0137] Przykład badań 3: [0138] PP jest 67 letnią kobietą z drżeniem rąk, będącym objawem choroby Parkinsona. Drżenie utrudnia jej życie w stopniu nie pozwalającym na normalne funkcjonowanie. Przepisano jej doustny liposomalny glutation zredukowany, 600 mg, dwa razy w ciągu tygodnia. Po trzech tygodniach przyjmowania substancji, PP zaobserwowała znaczne zmniejszenie drżenia rąk, a czynności codzienne stały się łatwiejsze. [0139] Instrukcje dotyczące dawkowania Liposomalnego Glutationu przy chorobie Parkinsona [0140] W terapii początkowej zaleca się podawanie 1,5 łyżeczki liposomalnego glutationu, zawierającego w przybliżeniu 660 mg glutationu, dwa razy dziennie przez dwa tygodnie. Jeżeli nastąpi kliniczna poprawa w tym czasie, dawka może zostać zmniejszona do poziomu, który zapewni utrzymanie pozytywnej reakcji. [0141] Jeżeli reakcja nie nastąpi w czasie dwóch tygodni, terapia przy podawaniu 1,5 łyżeczki liposomalnego glutationu, zawierajacego około 660 mg glutationu, dwa razy dziennie powinna być stosowana do zakończenia ustalonego okresu lub do czasu gdy kliniczna poprawa zostanie osiągnięta. Jeżeli nastąpi kliniczna poprawa w tym czasie, dawka może zostać zmniejszona do poziomu, który zapewni utrzymanie pozytywnej reakcji. [0142] Inny rodzaj podawania: [0143] Wstępna dawka 1 uncja = 2,500 mg 20 [0144] Powtarzać co 12 godzin, maksymalnie 4 dawki. [0145] Obserwować reakcję i kontynuować podawanie dawek używając [0146] następującego wskaźnika masy ciała do określenia dawkowania: USTAL DZIENNĄ DAWKĘ Z Zredukowany glutation WYKORZYSTANIEM MASY CIAŁA I określany jako GSH REAKCJI NA TERAPIĘ 60-90 funtów 3/4 łyżeczki 330 mg GSH 90-120 funtów 1 łyżeczka 440 mg GSH 120-150 funtów 1,5 łyżeczki 660 mg GSH Ponad 150 funtów 2 łyżeczki 880 mg GSH Słowo „Selen” oznacza selen jako pierwiastek chemiczny lub farmaceutycznie akceptowalne związki chemiczne, zawierające selen. Ponieważ Selen wydaje się poprawiać biochemiczne cykle związane z glutationem, stąd zapewnienie odpowiednich poziomów selenu. Przykład 1. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca dostarczanie, po doustnym podaniu, terapeutycznie efektywnej dawki glutationu (zredukowanego) zawierającej: terapeutyczną dawkę zredukowanego glutationu ustabilizowanego w liposomalnym nośniku farmaceutycznym zdolnym do bycia przyswojonym doustnie i pomimo doustnego podawania, zdolnym do dostarczenia glutationu (zredukowanego) w fizjologicznie aktywnym stanie w celu złagodzenia objawów chorobowych poprzez transfer glutationu do komórek zwierzęcych. Przykład 2. Kompozycja zgodna z Przykładem 1, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 3. Kompozycja zgodna z Przykładem 1, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 4. Kompozycja zgodna z Przykładem 1, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 5. Kompozycja zgodna z Przykładem 1, ponadto zawierająca: wspomniany liposomalny nośnik farmaceutyczny zawierający żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 6. Kompozycja zgodna z Przykładem 5, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 7. Kompozycja zgodna z Przykładem 5, ponadto zawierająca: 21 terapeutyczną dawkę EDTA. (Inne aspekty wynalazku zgodne z zastrzeżeniem patentowym 1 odnoszą się do następujących przykładów : Przykład 8. Kompozycja zgodna z Przykładem 5, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 9. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca dostarczanie, po doustnym podaniu, terapeutycznie efektywnej dawki glutationu (zredukowanego) osobie z mukowiscydozą, zawierająca: terapeutyczną dawkę zredukowanego glutationu ustabilizowanego w liposomalnym nośniku farmaceutycznym zdolnym do bycia przyswojonym doustnie i pomimo doustnego podawania, zdolnym do dostarczenia glutationu (zredukowanego) w fizjologicznie aktywnym stanie w celu złagodzenia objawów chorobowych poprzez transfer glutationu do komórek zwierzęcych. Przykład 10. Kompozycja zgodna z Przykładem 9, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 11. Kompozycja zgodna z Przykładem 9, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 12. Kompozycja zgodna z Przykładem 9, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 13. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca dostarczanie, po doustnym podaniu, terapeutycznie efektywnej dawki glutationu (zredukowanego) osobie z mukowiscydozą, zawierająca: codziennie zalecaną dzienną dawkę zredukowanego glutationu ustabilizowanego w liposomalnym nośniku farmaceutycznym zdolnym do bycia przyswojonym doustnie, która podnosi poziom glutationu w czerwonych krwinkach do normalnego przedziału; oraz łagodzi objawy występujące u osoby chorej, związane z mukowiscydozą. Przykład 14. Kompozycja zgodna z Przykładem 13, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 15. Kompozycja zgodna z Przykładem 13, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 16. Kompozycja zgodna z Przykładem 13, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz 22 terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 17. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca dostarczanie, po doustnym podaniu, terapeutycznie efektywnej dawki glutationu (zredukowanego) osobie z chorobami neurodegeneratywnymi, takimi jak choroba Parkinsona, zawierająca: codziennie zalecaną dzienną dawkę zredukowanego glutationu ustabilizowanego w liposomalnym nośniku farmaceutycznym zdolnym do bycia przyswojonym doustnie, która podnosi poziom glutationu w czerwonych krwinkach do normalnego przedziału; oraz łagodzi objawy choroby Parkinsona. Przykład 18. Kompozycja zgodna z Przykładem 17, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 19. Kompozycja zgodna z Przykładem 17, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 20. Kompozycja zgodna z Przykładem 17, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 21. Kompozycja zgodna z Przykładami 1 do 17, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę lewodopy. Przykład 22. Kompozycja zgodna z Przykładami 1 do 17, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę karbidopy. Przykład 23. Kompozycja zgodna z Przykładami 1 do 17, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę lewodopy i karbidopy. Przykład 24. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca leczenie chorób neurodegeneratywnych wynikających z wad metabolizmu dopaminy, wliczając w to chorobę Parkinsona, poprzez doustne podawanie, zawierająca: w farmaceutycznie akceptowalnym nośniku, przynajmniej jeden związek chemiczny wybrany z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę; oraz terapeutyczną dawkę zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym. Przykład 25. Kompozycja farmaceutyczna umożliwiająca leczenie chorób neurodegeneratywnych wynikających z wad metabolizmu dopaminy, wliczając w to chorobę Parkinsona, poprzez doustne podawanie, zawierająca: terapeutyczną dawkę zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym, zawierającym żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny; oraz 23 w farmaceutycznie akceptowalnym nośniku, przynajmniej jeden związek chemiczny wybrany z grupy związków chemicznych podnoszących poziom dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 26. Kompozycja zgodna z Przykładami 24 i 25, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu. Przykład 27. Kompozycja zgodna z Przykładami 24 i 25, ponadto zawierająca: terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 28. Kompozycja zgodna z Przykładami 24 i 25, ponadto zawierająca: farmaceutycznie akceptowalną formę Selenu; oraz terapeutyczną dawkę EDTA. Przykład 29. Metoda doustnego podawania zredukowanego glutationu zawierająca: kapsułkowanie terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym; oraz podawanie wspomnianego nośnika zwierzęciu. Przykład 30. Metoda zgodna z Przykładem 29, ponadto zawierająca: wspomniany liposomalny nośnik farmaceutyczny mający żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 31. Metoda podawania terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku poprzez doustne, donosowe, miejscowe, lub przez błonę śluzową przewodu pokarmowego zawierająca: zawieranie terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym; oraz podawanie wspomnianego nośnika doustnie, donosowo, miejscowo lub przez błonę śluzową przewodu pokarmowego. Przykład 32. Metoda leczenia choroby Parkinsona lub mukowiscydozy zawierająca następujące kroki: podawanie terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym, zawierającym żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 33. Metoda leczenie pacjentów z chorobą Parkinsona zawierająca następujące kroki: podawanie dożylnej dawki glutationu wspomnianemu pacjentowi i na podstawie reakcji pacjenta na wspomnianą dawkę, zwiększanie lub zmniejszanie takiej dawki, i po ustaleniu poziomu, przy którym pacjent wykazuje terapeutyczną reakcję, ustalenie i następnie podawanie odpowiedniej terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w doustnym liposomalnym nośniku farmaceutycznym. 24 Przykład 34. Metoda zgodna z Przykładem 33, ponadto zawierająca: wspomniany liposomalny nośnik farmaceutyczny mający żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 35. Metoda leczenie pacjentów z chorobą Parkinsona lub mukowiscydozą zawierająca następujące kroki: podawanie doustnej dawki liposomu ze zredukowanym glutationem wspomnianemu pacjentowi w ilości 1500 gramów na dzień przez sumę trzech dawek w odstępach co najmniej 12-24 godzin, i na podstawie reakcji pacjenta na wspomnianą dawkę, zwiększanie lub zmniejszanie takiej dawki, aż po jednej godzinie od podania dawkipacjent wykazuje normalne poziomy glutationu, i po ustaleniu poziomu, przy którym pacjent wykazuje terapeutyczną reakcję, podawanie wspomnianej terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w trybie stałym. Przykład 36. Metoda zgodna z Przykładem 35, ponadto zawierająca: wspomnianą dawkę liposomu zawierająca żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 37. Metoda leczenia pacjentów z chorobą Parkinsona z aktualnym wykorzystaniem w ich terapii przynajmniej jednego związku chemicznego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy wliczając w to lewodopę i karbidopę; podawanie doustnej dawki liposomu ze zredukowanym glutationem wspomnianemu pacjentowi w ilości 1500 gramów na dzień, maksymalnie trzy dawki w odstępach co najmniej 12-24 godzin, i na podstawie reakcji pacjenta na wspomnianą dawkę, zwiększanie lub zmniejszanie takiej dawki, aż po jednej godzinie od podania dawki pacjent wykazuje normalne poziomy glutationu, i/lub, po ustaleniu poziomu, przy którym pacjent wykazuje terapeutyczną reakcję, podawanie wspomnianej terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w trybie stałym. Następnie, metodą krok po kroku, zmniejszanie dawki przynajmniej jednego ze związków chemicznych wybranego z grupy związków chemicznych podnoszących poziom dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę, dopóki symptomy choroby Parkinsona zaczną się nieznacznie pojawiać, i następnie zwiększanie wspomnianej doustnej liposomalnej dawki zredukowanego glutationu dla wspomnianego pacjenta dopóki symptomy nie znikną, w celu zminimalizowania konieczności wspomnianego podawania przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych podnoszących poziom dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. 25 Przykład 38. Metoda zgodna z Przykładem 37, ponadto zawierająca: wspomnianą dawkę liposomu zawierająca żel wybrany z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny. Przykład 39. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki Selenu. Przykład 40. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki Selenu i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 41. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki EDTA. Przykład 42. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki EDTA i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 43. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznych dawek Selenu i EDTA. Przykład 44. Metoda zgodna z Przykładami 29-38, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznych dawek Selenu, EDTA i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 45. Metoda wytwarzania terapeutycznie efektywnego doustnego preparatu zredukowanego glutationu zawierająca: kapsułkowanie terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu w liposomalnym nośniku farmaceutycznym. Przykład 46. Metoda wytwarzania zgodna z Przykładem 45, ponadto zawierająca: użycie żelu wybranego z grupy nieutlenionych jadalnych żelów, w tym gliceryny, do wspomnianego kapsułkowania wspomnianej terapeutycznej dawki zredukowanego glutationu. Przykład 47. Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki Selenu. Przykład 48. Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: 26 połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki Selenu i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 49. Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki EDTA. Przykład 50. Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznej dawki EDTA i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 51 Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznych dawek Selenu i EDTA. Przykład 52. Metoda zgodna z Przykładami 45-46, ponadto zawierająca: połączenie ze wspomnianym nośnikiem terapeutycznych dawek Selenu, EDTA i przynajmniej jednego związku chemicznego wybranego z grupy związków chemicznych zmieniających metabolizm dopaminy, wliczając w to lewodopę i karbidopę. Przykład 53. Użycie kompozycji zgodne z Przykładami 1-28 do wytwarzania medykamentu do zastosowań terapeutycznych. Przykład 54. Kompozycja przygotowana zgodnie z Przykładami 45-52. 27 Zastrzeżenia patentowe 1. Liposomalny preparat do doustnego podawania glutationu (zredukowanego) w płynie lub sprayu zawierający: 71,9% wagowych dejonizowanej wody, 15,00% wagowych gliceryny, 2,50% wagowych polisorbatu 20 1,50% wagowych lecytyny 0,50% wagowych wyciągu z pestek cytrusów 0,10% wagowych sorbinianu potasu oraz 8,50% wagowych zredukowanego glutationu 2. Liposomalny glutationowy napój lub spray według zastrz. 1, zawierający terapeutyczną dawkę lewodopy lub karbidopy. 3. Liposomalny glutationowy napój lub spray według zastrz. 1, zawierający terapeutyczną dawkę lewodopy i karbidopy. 29 ŹRÓDŁA CYTOWANE W OPISIE Lista cytowanych przez zgłaszającego źródeł ma jedynie za zadanie służyć wygodzie czytelnika. Nie stanowi ona części europejskiej dokumentacji patentowej. Chociaż listę tę przygotowano z wielką starannością, nie można wykluczyć obecności błędów lub przeoczeń, w związku z czym Europejski Urząd Patentowy nie bierze na siebie jakiejkolwiek odpowiedzialności za nie. Dokumenty patentowe cytowane w opisie niniejszego wynalazku: US 6495170 B, Smith [0019] US 6764693 B, Smith [0021] US 5747459 A, Rowe [0019] US 5891465 A, Keller [0076] US 6204248 B, Demopoulus [0021] US 6726924 B, Keller [0093] US 6350467 B, Demopoulus [0021] US 6610322 B, Keller [0098] [0104] Dokumenty nie patentowe cytowane w opisie niniejszego wynalazku: Constantinescu I. Artificial cells, blood substitutes, and immobilization biotechnology, November 2003, vol. 31 (4), 395-424 [0026] Sechi G ; Deledda MG ; Bua G ; Satta WM ; Deiana GA ; Pes GM ; Rosati G. Reduced intravenous glutathione in the treatment of early Parkinson’s disease. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry, October 1996, vol. 20 (7), 1159-70 [0047] Pearce RK ; Owen A ; Daniel S ; Jenner P ; Marsden CD. Alterations in the distribution of glutathione in the substantia nigra in Parkinson’s disease. Journal of Neural Transmission, 1997, vol. 104 (6-7), 661-77 [0055] Sechi G ; Deledda MG ; Bua G ; Satta WM ; Deiana GA ; Pes GM ; Rosati G. Reduced intravenous glutathione in the treatment of early Parkinson’s disease. Progress in Neuro-psychopharmacology & Biological Psychiatry, October 1996, vol. 20 (7), 1159-70 [0056] Wendel A. Hepatic lipid peroxidation: caused by acute drug intoxication, prevented by liposomal glutathione. International Journal Clinical Pharmacology Research, 1983, vol. 3 (6), 443-7 [0061] Lasic, D. Liposomes. Elsevier, 1993, 88-90 [0094] [0097] D.D. Lasic. Liposomes, From Physics to Applications. Elsevier, 1993, 51 [0102] 28
