docrecencja_1
download 
Reklamacja Transkrypt
recencja_1
Wydział Medycyny Weterynaryjnej i Nauk o Zwierzętach Katedra Genetyki i Podstaw Hodowli Zwierząt http://jay.up.poznan.pl/GENETYKA/ Prof. dr hab. Dorota Cieślak email [email protected] tel 61 846 6117 Poznań, 15.05.2016 Prof. dr hab. Dorota Lechniak-Cieślak Katedra Genetyki i Podstaw Hodowli Zwierząt Ul. Wołyńska 33 60-631 Poznań Recenzja pracy doktorskiej mgr Piotra Kaczyńskiego pt. ”Rola receptora PGF2α w interakcjach pomiędzy zarodkiem a endometrium podczas wczesnej ciąży u świni ” przygotowanej pod kierunkiem dr hab. Agnieszki Wacławik w Zakładzie Mechanizmów Działania Hormonów PAN w Olsztynie Uwagi ogólne Przedstawiona do oceny praca doktorska składa się z trzech części: opracowania w języku polskim (str 1-48) zawierającego wszystkie elementy standardowej rozprawy oraz dwóch oryginalnych prac twórczych. Opracowanie ma postać zwartego opisu prezentującego stan wiedzy w badanym obszarze, motywację do podjęcia badań oraz ich cel, zastosowane metody i materiały, wyniki, dyskusję oraz podsumowanie wraz ze spisem literatury. Oryginalne prace twórcze zostały opublikowane w czasopismach z listy filadelfijskiej z oficjalnym IF, o uznanej pozycji w obszarze badań z zakresu rozrodu zwierząt: Theriogenology (IF 2014/2015 =1.798) oraz Reproduction (IF 2014/2015 = 3.174). Spełnione zostały zatem wszystkie wymagania stawiane pracy doktorskiej prezentowanej w formie cyklu publikacji: w obu pracach doktorant jest pierwszym autorem, a zgodnie z oświadczeniami współautorów, merytoryczny wkład doktoranta jest istotny (współudział w opracowaniu koncepcji, pobieraniu materiału i przygotowaniu publikacji do druku, wykonanie większości analiz laboratoryjnych oraz opracowanie wyników). Ocena strony merytorycznej rozprawy Głównym obiektem badań rozprawy doktorskiej mgr Piotra Kaczyńskiego jest prostaglandyna F2α (PGF2α) i jej rola w implantacji oraz we wczesnej ciąży świni domowej. Poruszane zagadnienie wplata się w dobrze scharakteryzowany problem wysokiego zamierania zarodków świni w okresie okołoimplantacyjnym i może wskazać nowe mechanizmy leżące u jego podłoża. Doktorant skupił się na problemie potencjalnego zaangażowania receptora prostaglandyny F2α – PTGFR jako mediatora interakcji zarodek-endometrium. W celu weryfikacji hipotezy 1 Wydział Medycyny Weterynaryjnej i Nauk o Zwierzętach Katedra Genetyki i Podstaw Hodowli Zwierząt http://jay.up.poznan.pl/GENETYKA/ Prof. dr hab. Dorota Cieślak email [email protected] tel 61 846 6117 badawczej zakładającej auto- i parakrynne działanie PGF2α w macicy świni poprzez receptor PTGFR, autor przeprowadził serię doświadczeń zmierzających do kompleksowego scharakteryzowania mechanizmu oddziaływania PGF2α poprzez PTGFR. Na podkreślenie zasługuje zakres przeprowadzonych badań (in vivo i in vitro) oraz wykorzystane procedury (ilościowa analiza transkryptów – real time PCR, lokalizacja białka in situ – barwienia immunohistochemiczne, analiza białka – Western Blot, koncentracja czynnika wzrostu śródbłonka naczyń VEGFA – metoda radioimmunologiczna RIA, badanie proliferacji komórek endotelialnych przy użyciu modelu pierwotnych komórek endotelialnych in vitro). Zwierzęta wykorzystane w badaniach (młode loszki, mieszańce) zostały poddane następującym zabiegom: chirurgicznemu przecięciu jednego rogu macicy (model jednostronnej ciąży) oraz wprowadzeniu do macicy kateteru w celu cyklicznego podawania hormonu E2. Uważam, że zarówno układ jak i skala przeprowadzonych doświadczeń w pełni pozwalają na zweryfikowanie postawionej hipotezy badawczej. Wprawdzie autor nie podsumował liczby zwierząt wykorzystanych w doświadczeniu, jednak po szybkiej analizie stwierdziłam, że w pracy wykorzystano ponad 60 loszek, która jest imponująca. Chciałabym także podkreślić przemyślaną sekwencję doświadczeń, począwszy od potwierdzenia ekspresji genu PTGFR na poziomie mRNA i białka oraz charakterystyki dystrybucji białka PTGFR w błonie śluzowej macicy, poprzez analizę wpływu zarodka i czynnika sygnalizującego jego obecność u świni (E2) na ekspresję PTGFR w warunkach in vivo i in vitro, kończąc na charakterystyce mechanizmu regulującego te procesy (PGF2α działając przez receptor PTGFR stymuluje ekspresję czynnika wzrostu śródbłonka naczyń – VEGF w endometrium poprzez aktywację kinazy MAPK1/3). Do najciekawszych zaliczam następujące osiągnięcia pracy: 1. Wykazanie istotnego wpływu obecności zarodków i produkowanego przez nie 17ßetsradiolu na ekspresję receptora PGF2α przy wykorzystaniu opracowanych przez zespół PAN w Olsztynie autorskich modeli badawczych in vivo - jednostronnej ciąży oraz cyklicznej iniekcji E2 bezpośrednio do rogu macicy. 2. Zaproponowanie hipotetycznego mechanizmu auto- /parakrynnego oddziaływania PGF2α w endometrium macicy w okresie okołoimplantacyjnym. Model ten wnosi wiele nowatorskich elementów i potencjalnych wątków badawczych. 2 Wydział Medycyny Weterynaryjnej i Nauk o Zwierzętach Katedra Genetyki i Podstaw Hodowli Zwierząt http://jay.up.poznan.pl/GENETYKA/ Prof. dr hab. Dorota Cieślak email [email protected] tel 61 846 6117 3
